一种源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株及其应用制造技术

技术编号:40961364 阅读:19 留言:0更新日期:2024-04-18 20:39
本发明专利技术提供了一种源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株及其应用,属于细胞技术领域。本发明专利技术针对TP53、KRAS两种肺癌患者常见突变位点设计gRNA构建敲降载体,同时构建过表达人KRAS G12D的载体,通过慢病毒递送系统对支气管镜下刷检获取的犬气道基底干细胞进行感染和多重基因编辑,构建犬原代气道基底干细胞来源的肺癌细胞株。与犬原代气道基地干细胞系和已知的小鼠肺癌细胞系(A72,CMT167)相比,本发明专利技术保护的肺癌细胞株均具有更强的增殖和迁移能力以及较强的成瘤特性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞,具体涉及一种源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株及其应用


技术介绍

1、肺癌是起源于支气管上皮或肺泡上皮的肺原发性恶性肿瘤。肺癌发病率位居第二,但其病死率居于首位。腺癌是目前最常见的肺癌病理亚型,在全球范围内约占非小细胞肺癌(nsclc)确诊病例总数的78%。尽管手术仍然是首选治疗手段,电子支气管镜或ct引导下的局部介入治疗,如冷冻消融,对于不宜手术的早期局限性nsclc也能取得较好的疗效和预后,并且具有较低的并发症发生率。

2、然而,新型诊疗技术不能直接应用于临床,需要进行严格的临床前动物实验评估以便充分了解其安全性和有效性。肺癌动物模型的构建与研究对动物实验评估而言便显得尤为重要。目前已有的肺癌动物模型主要依赖于小鼠、兔、猪、犬以及羊等动物构建的,构建方式主要有基因工程技术,原位移植,异位移植以及化学诱导等。crispr-cas9系统是目前最为常用的基因编辑技术并广泛应用于细胞系和胚胎实验。气道基底干细胞的恶性转化被认为是肺癌发生的始动因素。tp53和kras在细胞增殖、分化、存活、细胞周期停滞、细胞衰老和凋亡反应等多本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,在犬原代气道基底干细胞的基础上进行如下改造:敲降犬TP53基因和KRAS基因和过表达人KRAS G12D的基因或蛋白。

2.根据权利要求1所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,人KRASG12D的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.根据权利要求1或2所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,人KRAS G12D的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.根据权利要求1所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,用于敲降犬TP53基因...

【技术特征摘要】

1.一种源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,在犬原代气道基底干细胞的基础上进行如下改造:敲降犬tp53基因和kras基因和过表达人kras g12d的基因或蛋白。

2.根据权利要求1所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,人krasg12d的蛋白的氨基酸序列如seq id no:1所示。

3.根据权利要求1或2所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,人kras g12d的基因的核苷酸序列如seq id no:2所示。

4.根据权利要求1所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,用于敲降犬tp53基因或kras基因的试剂包括靶向犬tp53基因或kras基因的sgrna或包含所述靶向犬tp53基因或kras基因的sgrna的敲除载体。

5.根据权利要求4所述源于犬原代气道基底干细胞的肺癌细胞株,其特征在于,所述靶向犬tp53基因的sgrna的核苷酸序列如seq ...

【专利技术属性】
技术研发人员:金晶钟长镐邢悦年李时悦宋新宇张梦妮
申请(专利权)人:广州医科大学附属第一医院广州呼吸中心
类型:发明
国别省市:

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