一种用于细胞培养的明胶微载体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，包括以下步骤：S1、配制质量百分比浓度为1‑30wt％的明胶溶液；S2、将明胶溶液进行喷雾、一次冷冻，得到明胶冰冻微球；S3、将明胶冰冻微球加入冷水中进行化冰与分散，得到微孔明胶凝胶微球；S4、将微孔明胶凝胶微球分散到纯净水中，加入交联剂进行二次冷冻并交联固化；S5、将二次冷冻并交联固化后得到的明胶冰冻溶液进行化冰，洗涤，冷冻干燥，得到明胶微载体。本发明专利技术制备方法具有操作简单、绿色环保、成本低廉的特点，制得的明胶微载体不仅具有贯通大孔结构且孔径分布均匀的特点，同时比表面积大以及生物相容性良好，细胞贴附良好，能快速贴合到载体表面。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞培养，特别涉及一种用于细胞培养的明胶微载体的制备方法。

技术介绍

1、微载体培养技术广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认最具发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点，且容易放大。该技术已广泛用于培养各类型细胞，如293细胞、成肌细胞、vero细胞、cho细胞等。

2、微载体是指直径60-500μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。目前市场上微载体材料多种多样，按照结构可分为实心微球微载体和多孔微载体。细胞在实心微载体表面进行粘附和生长，生长空间相对较小，而且细胞裸露在载体表面，容易受碰撞等外在因素影响。多孔微载体具有立体多孔结构，细胞可以在载体内部粘附和增殖，可供细胞生长的表面积更大，细胞在载体内部能够获得稳定的生长环境，因此相较实心微载体多孔微载体具有更多的优势。

3、明胶来源于胶原，作为一种天然的生物材料，其具有生物可降解性、生物相容性、凝胶性和低成本等优点，是在医药领域应用广泛的一种传统生物材料。由于明胶分子结构中存在广泛的rgd(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)识别位点本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，步骤S1中，在配制明胶溶液的过程中加入了pH调节剂，以调节明胶溶液为中性，所述pH调节剂为碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、盐酸、硫酸中的一种或者两种以上的组合。

3.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，步骤S1中，在配制明胶溶液的过程中还加入了晶型生长控制剂，所述晶型生长控制剂的加入量为明胶溶液总质量的0～1wt％；所述晶型生长控制剂为氯化钠、氯化钙、氯化钾、二甲基亚砜、甘油中的一种或两种以上的...

【技术特征摘要】

1.一种用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，步骤s1中，在配制明胶溶液的过程中加入了ph调节剂，以调节明胶溶液为中性，所述ph调节剂为碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、盐酸、硫酸中的一种或者两种以上的组合。

3.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，步骤s1中，在配制明胶溶液的过程中还加入了晶型生长控制剂，所述晶型生长控制剂的加入量为明胶溶液总质量的0～1wt％；所述晶型生长控制剂为氯化钠、氯化钙、氯化钾、二甲基亚砜、甘油中的一种或两种以上的组合。

4.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，所述明胶溶液的质量百分比浓度为1～30wt％。

5.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述喷雾温度为30～100℃，所述喷雾方式为气动喷雾，喷雾流量0.1～5l/min，气动压力0.1～2.0mpa，气动介质为空气、氮气、二氧化碳中的任一种；所述明胶微球形成的喷雾液滴粒径为100～500μm；所述一次冷冻方式以液氮或者低温冷空气作为速冻剂，所述低温冷空气的温度为-80～-40℃。

6.根据权利要求1所述的用于细胞培养的明胶微载体的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述将一次冷冻后得到的明胶冰冻微球加入纯净水中进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：王进产，杨梦梦，康笃利，
申请(专利权)人：洛阳赛奥生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：