稳定保持聚A尾的方法技术

技术编号:40948135 阅读:20 留言:0更新日期:2024-04-18 20:22
本发明专利技术涉及一种稳定保持聚(A)尾的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及一种稳定保持聚(a)尾(poly(a)tail)的方法。


技术介绍

1、最近,mrna作为活性药物成分(api)吸引了人们的注意。mrna需要一种称为聚(a)尾的成分,其在rna的稳定性和翻译过程中起着重要作用。在mrna构成mrna疫苗的情况下,聚(a)尾的长度被认为具有120的标准大小(mol ther nucleic acids.2021年12月3日;26:945-956)。在细胞内转录的mrna具有聚(a)信号,并在转录过程之后进行聚(a)的添加过程。体外转录(ivt)产生的mrna也需要聚(a)尾,以提高体内稳定性和翻译效率。

2、有两种方法可以添加聚(a)尾。一种方法是在ivt后使用聚(a)聚合酶合成聚(a),另一种方法则是在用于ivt的模板中包含腺嘌呤重复序列,从而通过ivt生成聚(a)。

3、在前一种情况下,需要单独的过程,以便使用聚(a)聚合酶在mrna中合成聚(a),并且生成的聚(a)尾长度可能不恒定。然而,在后一种情况下,不需要除ivt过程之外的单独过程,并且生成的聚(a)尾的长度可以是恒定的。因本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种稳定保持质粒中聚(A)尾的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述培养步骤包括(1)在31℃或更低的温度条件下复苏细胞系。

3.根据权利要求2所述的方法,其中包括(2)在31℃或更低的温度条件下在固体培养基上培养细胞系,以在(1)的复苏步骤后形成菌落。

4.根据权利要求3所述的方法,其中所述培养还包括(3)在31℃或更低的温度条件下,在液体培养基中培养(2)固体培养基培养形成的菌落。

5.根据权利要求4所述的方法,其中所述在液体培养基中培养菌落的步骤包括进行再次培养。

6.根据权利要求1至4中任一项所...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种稳定保持质粒中聚(a)尾的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述培养步骤包括(1)在31℃或更低的温度条件下复苏细胞系。

3.根据权利要求2所述的方法,其中包括(2)在31℃或更低的温度条件下在固体培养基上培养细胞系,以在(1)的复苏步骤后形成菌落。

4.根据权利要求3所述的方法,其中所述培养还包括(3)在31℃或更低的温度条件下,在液体培养基中培养(2)固体培养基培养形成的菌落。

5.根据权利要求4所述的方法,其中所述在液体培养基中培养菌落的步骤包括进行再次培养。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中温度条件为16℃至31℃。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中温度条件为19℃至...

【专利技术属性】
技术研发人员:申珍焕崔瑛埈金勋权容旻郑惠远
申请(专利权)人:爱思开生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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