【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于侧柏病害防控，具体涉及一种用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂及其应用。
技术介绍
1、侧柏(platycladusorientalis)也称香柏，是我国分布最广的针叶树种，适应性较强，耐干旱瘠薄，是荒山造林的先锋树种。侧柏叶枯病在河北省、江苏省、陕西省、甘肃省等地普遍发生，植株感染病菌后，轻者对其生长造成影响，严重者导致整株死亡，对多年来的林业生态建设工程成果构成严重的威胁。
2、引起侧柏叶枯病的病原菌为侧柏绿胶杯菌(chloroscyphaplatycladusdaisp.nov)，属子囊菌亚门、盘菌纲、柔膜菌目、绿胶杯菌属。主要侵染的部位为柏科植物侧柏的鳞叶和细枝，受害部位树冠内部和下部发生严重病害，约15天左右，受害植株就会叶片并开始大批脱落，枝条枯干，呈火烧状，最后死亡。
3、目前，一般使用化学杀菌剂防治侧柏叶枯病，然而该防治方法不利于生态可持续发展，因此，急需开发一种环保、高效、低毒的药剂用于防治侧柏叶枯病。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于解决现有技术中使用化学杀菌剂防治侧柏叶枯病存在的不足，提供一种用于防治侧柏叶枯病的黑色素复合菌剂。
2、本专利技术技术方案如下：
3、一种用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，以复合菌剂的总质量为100％计，其由如下质量百分比的组分组成：20-40％的宛氏拟青霉孢子粉，10-20％的宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素，15-25％的分散剂，余量为液体发酵培养基。
4、所述宛氏
5、进一步，所述宛氏拟青霉孢子粉的制备方法，包括如下步骤：
6、(1)将宛氏拟青霉接种到宛氏拟青霉种子培养基中，25℃、120r/min培养4d，得到宛氏拟青霉种子液；
7、(2)将稻米浸泡后经蒸汽灭菌熟化至5-6成熟，冷却后制备稻米培养基，按10％的体积质量比将宛氏拟青霉种子液加入到稻米培养基中，25℃培养6-7天，待长满孢子粉后，终止发酵，通风干燥1-2天，即得；
8、步骤(1)中，所述宛氏拟青霉种子培养基配方：可溶性淀粉20g/l，葡萄糖20g/l，酵母粉2g/l，nac14 g/l，k2hpo30.5 g/l，mgso4.h2o 0.5g/l，caco32g/l；
9、步骤(2)中，所述稻米培养基配方：大米100g，黄豆粉10g，麸皮15g，nac10.5 g，k2hpo30.5 g，caco31 g；料水比10∶6。
10、进一步，所述宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素的制备方法：将宛氏拟青霉接入马铃薯液体培养基，28℃、120r/min培养7d，然后离心，去沉淀，将获得的发酵上清液浓缩后加入无水乙醇，离心，去沉淀，将获得的上清浓缩，再加入sevage试剂，混合均匀后离心，收集上层溶液，经减压浓缩并冻干，得到宛氏拟青霉发酵液粗提物粉末，最后分离纯化，得到宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素。所述分离纯化采用的是高速逆流色谱法，采用的流动相为体积比为4：2：3的甲醇、正己烷和水。
11、进一步，所述分散剂为木质素磺酸钠。
12、进一步，所述液体发酵培养基的配方为：黄豆饼粉20g/l，大豆蛋白胨2g/l，葡萄糖20g/l，可溶性淀粉5g/l，酵母粉2g/l，nacl 4g/l，k2hpo30.5 g/l，mgso4.h2o 0.5g/l，caco32g/l。
13、上述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂的制备方法：按上述质量百分比，取宛氏拟青霉孢子粉、宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素和分散剂加入到液体发酵培养基中，混合均匀，即得复合菌剂。
14、上述复合菌剂在防治侧柏叶枯病方面的应用。应用时，将复合菌剂进行叶面喷施，每周喷药1次，连续喷施10次。
15、本专利技术的有益效果：
16、本专利技术公开了一种用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其活性组分原料由宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素和宛氏拟青霉菌液组成，与现有的化学药剂相比，该复合菌剂毒性低，对环境压力小，对侧柏叶枯病病原菌侧柏绿胶杯菌(chloroscyphaplatycladus daisp.nov)具有显著的专一性抑制效果，对侧柏叶枯病具有很好的防治效果，具有良好的开发应用前景。
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1.一种用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，以复合菌剂的总质量为100％计，其由如下质量百分比的组分组成：20-40％的宛氏拟青霉孢子粉，10-20％的宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素，15-25％的分散剂，余量为液体发酵培养基；
2.如权利要求1所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，所述宛氏拟青霉孢子粉的制备方法包括如下步骤：
3.如权利要求2所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，步骤(1)中，所述宛氏拟青霉种子培养基配方：可溶性淀粉20g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉2g/L，NaC14 g/L，K2HPO30.5 g/L，MgSO4.H2O 0.5g/L，CaCO32 g/L。
4.如权利要求2所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，步骤(2)中，所述稻米培养基配方：大米100g，黄豆粉10g，麸皮15g，NaC10.5g，K2HPO30.5 g，CaCO31 g；料水比10∶6。
5.如权利要求1所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，所述宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素的制备方法：将宛氏拟青霉接入
6.如权利要求1所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，所述分散剂为木质素磺酸钠。
7.如权利要求1至6任一项所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，所述液体发酵培养基的配方为：黄豆饼粉20g/L，大豆蛋白胨2g/L，葡萄糖20g/L，可溶性淀粉5g/L，酵母粉2g/L，NaCl 4g/L，K2HPO30.5 g/L，MgSO4.H2O 0.5g/L，CaCO32 g/L。
8.如权利要求1至7任一项所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂的制备方法，其特征在于，取宛氏拟青霉孢子粉、宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素和分散剂加入到液体发酵培养基中，混合均匀，即得复合菌剂。
9.权利要求1至7任一项所述复合菌剂在防治侧柏叶枯病中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，以复合菌剂的总质量为100％计，其由如下质量百分比的组分组成：20-40％的宛氏拟青霉孢子粉，10-20％的宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素，15-25％的分散剂，余量为液体发酵培养基；
2.如权利要求1所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，所述宛氏拟青霉孢子粉的制备方法包括如下步骤：
3.如权利要求2所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，步骤(1)中，所述宛氏拟青霉种子培养基配方：可溶性淀粉20g/l，葡萄糖20g/l，酵母粉2g/l，nac14 g/l，k2hpo30.5 g/l，mgso4.h2o 0.5g/l，caco32 g/l。
4.如权利要求2所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，步骤(2)中，所述稻米培养基配方：大米100g，黄豆粉10g，麸皮15g，nac10.5g，k2hpo30.5 g，caco31 g；料水比10∶6。
5.如权利要求1所述用于防治侧柏叶枯病的复合菌剂，其特征在于，所述宛氏拟青霉发酵液提取物黑色素的制备方法：将宛氏拟青...
【专利技术属性】
技术研发人员：鞠秀云，张越已，田梦凡，杨可心，张婕，
申请(专利权)人：江苏师范大学，
类型：发明
国别省市：
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