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去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法及其应用技术

技术编号:40946639 阅读:4 留言:0更新日期:2024-04-18 20:19
本发明专利技术无复制病毒‑抗体复合物制备和用于抗疫的防治方法,病毒‑抗体复合物介导产生抗体比病毒感染细胞产生速度快,【病毒感染目的细胞‑复制‑(释放复制的病毒)‑感染细胞坏死‑释放炎性物质‑淋巴细胞识别‑吞噬‑释放少量的IGM‑结合病毒感染的细胞‑吞噬病毒感染的细胞‑最后再释放大量的IGg】,一般需要3‑7天,而病毒‑抗体复合物介导产生抗体会很快。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种去复制能力rna病毒-抗体复合物制备方法,特别是针对去复制能力rna病毒-抗体复合物的制备及其介导产生特异抗体的具体应用方法。


技术介绍

1、从2019年抗疫到现在已经3年了,从2019年到2020年当初突然抗疫,到2021年全世界疫苗接种,到现在疫情还在世界各地流行,而且还有反弹之势,全世界现在的数据2022.11.17海外:累计确诊:6.27亿人,累计死亡:659.63万人,现在确诊:1351.87万人。

2、国内:累计确诊:818.36万人,累计死亡:2.95万人,现在确诊:1.66万人。

3、2022.11.16中国疫苗接种34.41亿计次,接种率:92.44%。

4、2022.11.13牛津大学统计全球累计报告接种新冠疫苗129.38亿计次,接种率:68.23%。

5、虽然有各项防疫方法、政策以及全世界各地人民和各级政府共同努力,疫苗接种等等,疫情依然持续,其中主要因素是:rna病毒变异太快,疫苗需要一个较长的周期。往往跟不上病毒变异的速度。

6、同时现在针对细菌的药物很多,有数千种,而针对病毒的药品较少,且存在以下缺陷:

7、(1)现在的疫苗一般是活体,具有一定的复制性,存在一定风险,怎么样获得一种无复制能力,同时具有抗原能力的病毒,同时要简单、快捷、易于完成,效率高等特点。

8、(2)现在的疫苗需要n代脱毒,需要时间较长,不能及时使用。怎么样用现在的病毒及时使用节约时间非常重要。

9、(3)现在的抗疫主要的方法是以“防”为主,我们知道“旧防必失”道理,怎么样用一种直接进攻的方式针对疫情。

10、(4)用的药品越单纯对机体的影响就越小,怎么样获得单纯的药品。

11、(5)用药后起效要快。

12、(6)用药后维持时间长。

13、(7)用药后既要有预防作用,也要有治疗作用。

14、(8)只要少量用药,少量用药可以形成瀑布现象。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供无复制病毒-抗体复合物制备及其介导产生特异抗体和用于抗疫的防治方法,以解决上述
技术介绍
中提到的问题。

2、一种去复制能力rna病毒-抗体复合物制备方法,包括以下步骤:

3、s1:目标病毒的获取,从患者体液或感染环境中提取目标病毒,通过基因测顺方式确定目标病毒毒株类型,针对已知类型的目标病毒可直接取得其病毒毒株样本;

4、s2:目标病毒的培育,在鸡胚或其他满足病毒复制培育条件的活体组织接种目标病毒,使得目标病毒大量繁殖培育;

5、s3:目标病毒的提纯,将步骤s2中培养所得到的大量目标病毒取样进行基因测顺再次确认s2中培育得到的病毒为目标病毒后,对培育所得到的目标病毒进行提纯、干燥,保存在密封且坚固的非金属容器内;

6、s4:病毒灭核,将s3所得到的装有提纯目标病毒的容器使用x射线、γ射线、超声波进行共振辐照,辐照方式采取短时间内间断性多次进行,x线与γ射线使核苷酸链发生致死性断裂,使病毒完全失去复制能力,利用rna病毒的结构特性,采用x射线、γ射线或者超声波进行辐照可以使目标病毒核心散热比周围病毒壳体慢,使得大分子的多聚酶变性、rna链断裂成小分子物质,使得病毒内部rna链断裂失去复制能力而外部壳体完整具备抗原性,从而制得具备抗原性但没有复制能力的目标病毒;

7、s5:igg分子提取及病毒-抗体复合物制备,将目标病毒感染康复患者的人体血清或者经特殊制备的动物抗体血清采用特制过滤装置滤掉其中大分子物质,得到高纯度含igg分子抗体血清,将所述高纯度含igg分子抗体血清与步骤s4中得到的目标病毒混合,使得igg分子抗体与目标病毒壳体表面刺突结合,得到具有抗原性但无复制能力病毒-抗体复合物血清;

8、s6:病毒-抗体复合物提纯,将s5中制得的病毒-抗体复合物血清进行离心沉淀,然后采用特制的过滤装置过滤掉其中的小分子物质,得到大分子的具有抗原性无复制能力病毒-抗体复合物液;

9、s7:介导产生特异性抗体应用,将s6中所得到的的病毒-抗体复合物液接种,由于免疫系统作用,b淋巴细胞会吞噬所接种的rna链断裂的无复制能力的目标病毒,同时正反馈给b淋巴细胞合成、释放针对目标病毒的特异目标抗体;

10、作为本专利技术的一个优选方案,步骤s4中x射线、γ射线超声波共振辐照的条件为40℃~56℃,持续时间为1~2min,采取以上条件的辐照效果可以使得目标病毒内部rna核酸链加快断裂和增加断裂几率,失去复制能力,同时保持目标病毒的结构完整性,使得病毒壳体表面刺突保持活性保留抗原性。

11、作为本专利技术的一个优选方案,步骤s5中经过滤提取后的过滤残留液经处理后可回输至血清供体内,减少对于提取血清本体的影响。

12、作为本专利技术的一个优选方案,步骤s5及s6中所述特制过滤装置的滤膜直径选择为30~50nm。

13、作为本专利技术的一个优选方案,步骤s6中所述大分子为说明书附图图9所示的结合了目标抗体的病毒-抗体复合物分子,所述被滤除的小分子物质是步骤s6中未与目标病毒结合的多余的目标抗体以及血清中其他无关的目标抗体等。

14、本专利技术的应用原理是通过抗体-病毒复合物可以介导目标抗体的产生,少量的抗体可以对抗少量的入侵人体的目标病毒,起到预防的目的。通过免疫应答介导产生抗体,可以在不同种群介导产生抗体,大量多次的介导刺激,会将的抗体的滴度达到需要的目标高度,高度的目标抗体滴度可以为抗病毒的治疗有很大的帮助。因为病毒失去复制能力,所以具有抗原性无复制能力病毒-抗体复合物不具备感染细胞的复制能力,进入机体后很快被免疫细胞吞噬,同时本方法的计数原理可以将多种目标病毒(阿尔法+德尔塔+奥密克戎)同时使用,可以有效针对不同种类病毒快速介导产生目标抗体,防治病毒的感染。

15、本专利技术所提供的有益效果是:

16、1.制作具有病毒的抗原性但是无复制能力的病毒;

17、2.此病毒可以与抗体相结合,形成病毒-抗体复合物;

18、3.将病毒-抗体复合物注射入机体,可以直接被b淋巴细胞吞噬,介导淋巴细胞产生人体自身的抗体;

19、4.人体体内含有抗体后:

20、1)产生蝴蝶效应,抗体就可以与正常的病毒结合,刺激b淋巴细胞产生更多的抗体,结合更多的病毒、产生更多的抗体;

21、2)与感染细胞抗原结合,巨噬细胞吞噬感染细胞,防止感染细胞复制并且释放复制的病毒;

22、3)抗体去协助激活前面所述的补体途径,破坏感染细胞。

23、5.病毒-抗体复合物介导产生抗体比病毒感染细胞产生速度快,【病毒感染目的细胞-复制-(释放复制的病毒)-感染细胞坏死-释放炎性物质-淋巴细胞识别-吞噬-释放少量的igm-结合病毒感染的细胞-吞噬病毒感染的细胞-最后再释放大量的igg】一般需要3-7天,而病毒-抗体复合本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤S4中X射线、γ射线超声波共振辐照的条件为40℃~56℃,持续时间为1~2min,采取以上条件的辐照效果可以使得目标病毒内部RNA核酸链断裂失去复制能力,同时保持目标病毒的结构完整性,使得病毒壳体表面刺突保持活性保留抗原性。

3.根据权利要求1所述的去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤S5中经过滤提取后的过滤残留液经处理后可回输至血清供体内,减少对于提取血清本体的影响。

4.根据权利要求1所述的去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤S5及S6中所述特制过滤装置的滤膜直径选择为30~50nm。

5.根据权利要求1所述的去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤S6中所述小分子物质为未与目标病毒结合的IgG分子,所述大分子为说明书附图图9所示的结合了目标抗体的病毒-抗体复合物分子。

6.根据权利要求1所述的去复制能力RNA病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤S7中介导产生特异性抗体的应用方法可以用于任意已知的目标病毒亚型,采用步骤S1~S6的方法制备目标病毒-抗体复合物并将其接种使用能达到防御多种病毒亚型的作用。

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【技术特征摘要】

1.去复制能力rna病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的去复制能力rna病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤s4中x射线、γ射线超声波共振辐照的条件为40℃~56℃,持续时间为1~2min,采取以上条件的辐照效果可以使得目标病毒内部rna核酸链断裂失去复制能力,同时保持目标病毒的结构完整性,使得病毒壳体表面刺突保持活性保留抗原性。

3.根据权利要求1所述的去复制能力rna病毒-抗体复合物制备方法,其特征在于,步骤s5中经过滤提取后的过滤残留液经处理后可回输至血清供体内,减少对于提取血清本体的影响。

4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈向东王庆元吴晓静王建新秦娜李心怡周玲宋学敏罗晶钟琪郑锋郑勤张玲许世荣吴耀华杨亚东李文斌金律周再稳詹妍黄慧琴陈莹莹周全军郝泉水吴志林杨新徐莉高跃刘晓荣郑勇萍张静何倩文王壮为
申请(专利权)人:王庆元
类型:发明
国别省市:

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