一种醋酸泼尼松的制备方法技术

本发明专利技术提出了一种醋酸泼尼松的制备方法，包括如下步骤：S1，扩增谷胱甘肽硫转移酶蛋白基因和3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶KstD基因得到核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的GTS‑KSTD融合蛋白；S2，构建pET28a‑GTS‑KstD质粒，并将其转化至大肠杆菌BL21中，获得重组菌；重组菌发酵培养，离心后得到重组菌菌泥；S3，醋酸可的松乳化后，加入PMS和步骤S2的重组菌菌泥，转化16‑24h得到醋酸泼尼松。本发明专利技术的重组脱氢酶可利用细胞本身的FAD辅酶再生体系，无需添加外源性的辅酶FAD；同时也提高了3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶KstD转化醋酸泼尼松的效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物制药及医药化工，尤其涉及一种醋酸泼尼松的制备方法。

技术介绍

1、甾体类药物是仅次于抗生素的世界第二大类药物，不同甾体药物均由甾体激素中间体衍生而来。甾体激素具有很强的抗感染、抗过敏、抗病毒和抗休克的药理作用，主要用于严重细菌感染、急性淋巴白血病、风湿病、红斑狼疮、细胞性脑炎、皮肤病、抗肿瘤和抢救危重病人的重要用药。

2、醋酸泼尼松(分子式c23h28o6，化学名为：17α,21-二羟基孕甾-1,4-二烯-3,11,20-三酮-21-醋酸酯)白色或几乎白色结晶性粉末，无臭，味苦；不溶于水，微溶于甲醇、醋酸乙酯，略溶于丙酮，易溶于氯仿。醋酸泼尼松是一类重要的肾上腺皮质激素类药，适用于各种急性严重细菌感染，严重过敏性疾病，胶原性疾病(红斑狼疮、结节性动脉周围炎等)，风湿病、类风湿性关节炎、肾病综合征，严重支气管哮喘、血小板减少性紫癜、粒细胞减少症、急性淋巴性白血病、各种肾上腺皮质功能不全症、剥脱性皮炎、天疱疮、神经性皮炎、湿疹等。

3、专利号为cn111485011a的专利技术专利公开了一种醋酸泼尼松的合成方法，该方本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：步骤S3中所述醋酸可的松：重组菌菌体的质量比为(1-3)：1。

3.如权利要求1所述的一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：步骤S3中转化反应条件为：25-35℃，200-400r/min，通气量0.3-0.8vvm，压力0.01-0.1MPa。

4.如权利要求1所述的一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：步骤S2中重组菌发酵培养方法为：重组菌二级培养后接种于含有卡那霉素的发酵培养基中，在35-37℃、600-800r/min、通气量2...

【技术特征摘要】

1.一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：步骤s3中所述醋酸可的松：重组菌菌体的质量比为(1-3)：1。

3.如权利要求1所述的一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：步骤s3中转化反应条件为：25-35℃，200-400r/min，通气量0.3-0.8vvm，压力0.01-0.1mpa。

4.如权利要求1所述的一种醋酸泼尼松的制备方法，其特征在于：步骤s2中重组菌发酵培养方法为：重组菌二级培养后接种于含有卡那霉素的发酵培养基中，在35-37℃、600-800r/min、通气量2-3vvm条件下发酵培养，当do值达到50％-60％时添加补料培养基、培养至菌液od600值30-80时，加入iptg诱导表达12-18h后离心，获得发酵重组菌；转化反应时加入发酵重组菌菌体。

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【专利技术属性】
技术研发人员：宋龙祥，夏克江，邹振东，系祖斌，李明磊，姚立成，
申请(专利权)人：湖北共同甾体药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：