【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物基因工程与分子生物学，具体涉及甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1及其应用。
技术介绍
1、甜瓜(cucumis melo l.)白粉病是危害甜瓜生产的重要病害之一，在甜瓜的全生长期均可发生。在感染白粉病后，甜瓜表现为入侵点产生白色病斑，植株生长后期变黄萎蔫，光和能力下降，引起早衰和死亡。由于白粉病发病、传播速度极快，甚至在有些地区可以重复发生，周年产生危害，严重影响了甜瓜产量和品质，因此利用分子生物学技术开展甜瓜白粉病抗性研究，鉴定提高白粉病抗性的基因，解析基因功能，对于创制优良抗病材料及白粉病的防治工作具有重要的意义。
2、现有技术以抗病甜瓜材料mr-1和感病甜瓜材料m4-7为亲本构建遗传群体，在10号染色体上定位到一个与甜瓜白粉病抗性高度连锁的基因(gene id：melo3c012438，注释：mlo-like protein)，命名为cmpmr10.1，并发现该基因在感病甜瓜材料中的表达量极显著高于抗病材料，且具有组织特异性。另有研究发现，mlo基因在白粉菌诱导的早期表达量急剧上升，证明了mlo基因是在侵染的早期协助病原菌入侵寄主植株的。野生型mlo基因能调控表皮细胞内乳突的形成，在表皮细胞壁真菌侵染位点抑制细胞壁过氧化氢暴发，并且抑制叶肉细胞次级氧化暴发和叶肉细胞死亡，利于病原菌的侵入，削弱了植物的防御能力，这类基因负调控植物防御能力以及细胞死亡。
3、目前已报道的甜瓜组织特异性启动子较少，从甜瓜中分离获得茎蔓特异性表达启动子，并对启动子进行克隆和功能分析，将对在
技术实现思路
1、为了从甜瓜中分离获得茎蔓特异性表达启动子，进而为创制和筛选抗白粉病的甜瓜材料提供基础研究理论，本专利技术提供了如下技术方案：
2、本专利技术的第一个目的是提供一种甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1，所述启动子pcmpmr10.1的核苷酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。
3、本专利技术的第二个目的是提供一种用于扩增上述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的引物组，当甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的核苷酸序列如seqid no.1所示时，引物组的核苷酸序列如seq id no.3和seq id no.4所示，当甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的核苷酸序列如seq id no.2所示时，引物组的核苷酸序列如seq id no.5和seq id no.6所示.
4、本专利技术的第三个目的是提供一种含有上述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的重组载体。
5、本专利技术的第四个目的是提供一种含有上述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的表达盒。
6、本专利技术的第五个目的是提供一种含有上述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的重组菌。
7、本专利技术的第六个目的是提供上述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1或上述引物或上述重组载体或上述表达盒或上述重组菌在植物中启动cmpmr10.1基因表达中的应用。
8、在本专利技术的一种实施方式中，所述应用为获得含有甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的转基因植物。
9、在本专利技术的一种实施方式中，所述植物为甜瓜。
10、本专利技术的第七个目的是提供上述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1或上述引物或上述重组载体或上述表达盒或上述重组菌在植物遗传改良中的应用。
11、在本专利技术的一种实施方式中，所述植物包括甜瓜。
12、本专利技术的有益效果：
13、本专利技术获得的甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1来源于感白粉病甜瓜m4-7，所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1片段，具有以下特点：(1)位于cmpmr10.1基因的5’端及其上游；(2)碱基长度为1805bp(如seq id no.1所示)或445bp(如seq id no.2所示)；(3)具有引发转录的必要位点及转录起始点；(4)该启动子能够驱动目的基因在植物茎蔓中特异性表达，为通过基因工程手段提高外源基因在作物特定组织的表达和积累水平奠定了理论基础。本专利技术还公开了含有甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的重组表达载体，在重组表达载体的组织特异性表达启动子pcmpmr10.1调控下使下游基因在植物茎蔓中特异性表达，为植物基因工程领域研究基因在植物茎蔓中高效、稳定、特异性地表达提供了工具，具有广泛的应用前景。
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1.一种甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1，其特征在于，核苷酸序列如SEQID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
2.一种用于扩增权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的引物组，其特征在于，当甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示时，引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示，当甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示时，引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
3.一种含有权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的重组载体。
4.一种含有权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的表达盒。
5.一种含有权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的重组菌。
6.权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1或权利要求2所述引物或权利要求3所述重组载
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用为获得含有甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1的转基因植物。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述植物为甜瓜。
9.权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pCmpmr10.1或权利要求2所述引物或权利要求3所述重组载体或权利要求4所述表达盒或权利要求5所述重组菌在植物遗传改良中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述植物包括甜瓜。
...【技术特征摘要】
1.一种甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1，其特征在于，核苷酸序列如seqid no.1或seq id no.2所示。
2.一种用于扩增权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的引物组，其特征在于，当甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的核苷酸序列如seq idno.1所示时，引物组的核苷酸序列如seq id no.3和seq id no.4所示，当甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的核苷酸序列如seq id no.2所示时，引物组的核苷酸序列如seq id no.5和seq id no.6所示。
3.一种含有权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的重组载体。
4.一种含有权利要求1所述甜瓜茎蔓组织特异性表达启动子pcmpmr10.1的表达盒。
...【专利技术属性】
技术研发人员：高鹏，王丽欢，栾非时，朱子成，张泰峰，米琪，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：
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