【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物育种，具体涉及准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法。
技术介绍
1、在植物的育性特点分析的过程中，最重要的一步是要了解其减数分裂过程中的联会和配对特点。百合(lilium)是百合科百合属的植物，具有染色体大的特点，是细胞学分析的良好材料。目前市场上流行的百合品种中，有较大的一部分是异源三倍体品种。关于异源三倍体百合在减数分裂过程中的三套染色体是如何联会配对？目前的方法有通过常规染色法观察，以及采用基因组荧光原位杂交技术(gish)。常规染色的方法缺点则是不能区分异源基因组，而且减数分裂中期联会形成的几价体也不能比较准确的判断；基因组荧光原位杂交(gish)的方法虽然能直观的判断异源染色体之间的联会特点，但是不能准确判断染色体之间所形成的是几价体。
2、而要将荧光原位杂交(fish)和基因组荧光原位杂交(gish)的结果结合到一张片子上，往往需要做完一轮fish实验后将片子进行反洗后再进行下一轮gish实验才能达到多色标记的效果。这样即浪费时间又增加成本。
技术实现思路
【技术保护点】
1.准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，包括染色体制片，预处理以提高组织通透性，杂交，洗涤以洗脱非特异结合探针和检测；
2.根据权利要求1所述的准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，染色体制片的过程为：三倍体百合花蕾长28-32mm时取样，取出花药，放入卡诺固定液固定，然后用蒸馏水清洗，置于载玻片上，滴加乙酸溶液，将花药室的小孢子母细胞导出，去除残渣，盖上盖玻片后冰冻1-2h后揭去盖玻片，无水乙醇中脱水，干燥后获得制好的片子备用。
3.根据权利要求2所述的准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的...
【技术特征摘要】
1.准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，包括染色体制片，预处理以提高组织通透性，杂交，洗涤以洗脱非特异结合探针和检测；
2.根据权利要求1所述的准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，染色体制片的过程为：三倍体百合花蕾长28-32mm时取样，取出花药，放入卡诺固定液固定，然后用蒸馏水清洗，置于载玻片上，滴加乙酸溶液，将花药室的小孢子母细胞导出，去除残渣，盖上盖玻片后冰冻1-2h后揭去盖玻片，无水乙醇中脱水，干燥后获得制好的片子备用。
3.根据权利要求2所述的准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，所述卡诺固定液由乙醇和乙酸按照体积比3:1混合获得。
4.根据权利要求1所述的准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，预处理过程为：将制好的片子进行干燥后用2×ssc洗涤，然后在hcl溶液中反应中稀释胃蛋白酶然后先后用去离子水和2×ssc洗涤，然后将载玻片在多聚甲醛中反应，2×ssc中洗涤后干燥，每张载玻片滴加去离子甲酰胺溶液，盖上盖玻片，在75-80℃加热板上变性移除盖玻片，2×ssc中洗涤，将载玻片在乙醇中梯度脱水，风干，预处理的目的是提高组织通透性。
5.根据权利要求1所述的准确判断异源三倍体百合减数分裂联会结果的检测方法，其特征在于，杂交过程中，所述杂交液配方为：20μl去离子甲酰胺，8μl 50％硫酸葡聚糖，4μl20×ssc，1μl 10％sds，2μl 50ng探针dna，2μl 5μg封阻dna，3μl无菌水；
6.根据权利要求5所述的准确...
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