一种多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备与应用制造技术

本发明专利技术涉及微流控技术、化学合成与癌症免疫治疗学的交叉技术领域，公开了一种多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，包括以下步骤：(1)将抗体通过碳二亚胺法修饰到海藻酸盐上，获得抗体修饰的海藻酸盐；(2)人工抗原呈递凝胶液滴的制备：将步骤(1)制备的抗体修饰的海藻酸盐制备成凝胶液滴，同时将可溶性细胞因子和胶原模拟肽封装到凝胶液滴中。利用本发明专利技术制备的AAPGD在体外增殖T细胞，细胞增殖速度快、活性高。增殖的T细胞中，具有低分化和特异性抗肿瘤能力的T细胞比例大。回输治疗时，AAPGD还能增强体内T细胞对肿瘤部位的浸润。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微流控技术、化学合成与癌症免疫治疗学的交叉，具体涉及一种多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备与应用。

技术介绍

1、近年来，免疫疗法已成为治疗各种类型癌症和复发性病毒疾病的一种强有力和潜在的治疗方法。过继细胞疗法(adoptive cell transfer,act)是一种免疫疗法，包括体外分离和扩增抗原特异性t细胞，随后过继转移回患者。越来越多的证据表明，抗原特异性cd8+t细胞的过继转移可能是对抗慢性病毒感染和恶性肿瘤(如黑色素瘤)的一种有效策略。最近rosenberg sa的研究表明：外周血中循环的pd-1+cd 8+t细胞能够特异性识别黑色素瘤抗原，并且与肿瘤局部表达pd-1的肿瘤侵润的特异性cd 8+t具有相似的t细胞抗原受体(tcell receptor,tcr)，因此，从外周血获取t细胞具有抗肿瘤的能力。

2、然而从外周血中获得的t细胞体外无法控制其低分化、特异性、大规模增殖以及常规给药方式很难使抗肿瘤t细胞浸润到复杂的肿瘤微环境中。而且制备工艺非常复杂，成本高昂，治疗价格昂贵，限制其在临床上的推广。

3、t本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于，步骤(1)的修饰方法为：将海藻酸盐溶解在MES溶液中，然后向溶液中加入EDC和磺基-NHS，在25～30℃下持续搅拌反应20～24小时，随后向溶液中加入抗体，继续搅拌反应25～35分钟，透析后冻干，获得抗体修饰的海藻酸盐。

3.根据权利要求1所述的多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法为：将步骤(1)制备的抗体修饰的海藻酸盐溶于水中制备成2wt％的抗体修饰的藻酸盐...

【技术特征摘要】

1.一种多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于，步骤(1)的修饰方法为：将海藻酸盐溶解在mes溶液中，然后向溶液中加入edc和磺基-nhs，在25～30℃下持续搅拌反应20～24小时，随后向溶液中加入抗体，继续搅拌反应25～35分钟，透析后冻干，获得抗体修饰的海藻酸盐。

3.根据权利要求1所述的多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法为：将步骤(1)制备的抗体修饰的海藻酸盐溶于水中制备成2wt％的抗体修饰的藻酸盐溶液，然后与50mm ca-edta络合物溶液、可溶性细胞因子和胶原模拟肽按质量体积比为100μl∶50μl∶1μg∶1μg混合制备成水相，将所述水相和油相均由恒流微泵驱动，进入具有疏水通道表面的pdms液滴微流控芯片，所述油相为碳氟化合物油，在出口处收集液滴，向收集的液滴中加入醋酸，液滴凝胶化后，向油相中加入pfo溶液，将凝胶液滴从油相中分离出来，漂洗数次后获得凝胶液滴，简称aapgd。

4.根据权利要求2所述的多功能人工抗原呈递凝胶液滴的制备方法，其特征在于：所述海藻酸盐为海藻酸钠，所述mes溶液包含0.1m mes和0.3m n...

【专利技术属性】
技术研发人员：田已申，胡蓉，苏敏，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：