【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于基因载体的,特别是关于一种clc-3基因的shrna质粒及其构建方法和应用。
技术介绍
1、clc-3(chloride channels 3),氯离子通道蛋白3,由clcn-3基因编码,是电压门控性氯离子通道家族成员之一。clc-3是clc家族普遍表达的成员,其广泛分布于脑、心脏、骨骼肌、肾、肝胰腺等各种细胞,且在内分泌细胞如肾上腺嗜铬细胞和胰岛细胞内表达丰富[12,13]。前期研究发现clc-3参与et-i诱导的血管平滑肌细胞增殖,并通过调节膜受体依赖和线粒体依赖两种信号通路参与不同类型细胞凋亡。同时clc-3基因敲除小鼠空腹血清胰岛素分泌明显下降,clc-3被认为在胰腺β细胞中参与胰岛素分泌,然而具体机制仍有争议。我们既往研究表明,clc-3在t2dm中参与棕榈酸诱导的前脂肪细胞凋亡。并且在t2dm中脂肪组织clc-3表达随胰岛素抵抗水平升高而增高,而肝脏及骨骼肌中均未发现二者相关性。我们另一个研究还发现clc-3参与了与脂肪组织巨噬细胞炎症(atm)相关的高脂饮食诱导的肥胖。然而,有效的鼠源性clc-3shrna
...【技术保护点】
1.一种ClC-3基因的shRNA序列,其特征在于,包括shRNA6和shRNA7,具体序列为shRNA6(SEQ ID NO.1):CCACGACTGGTTTATCTTC;
2.一种ClC-3基因的shRNA质粒的构建方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
3.如权利要求2所述的ClC-3基因的shRNA质粒的构建方法,其特征在于,所述步骤S1中,针对所述ClC-3基因设计多条干扰靶序列,通过敲低效果选择所述shRNA序列。
4.如权利要求2所述的ClC-3基因的shRNA质粒的构建方法,其特征在于,所述步骤S2具体为,根据步骤S1
...【技术特征摘要】
1.一种clc-3基因的shrna序列,其特征在于,包括shrna6和shrna7,具体序列为shrna6(seq id no.1):ccacgactggtttatcttc;
2.一种clc-3基因的shrna质粒的构建方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
3.如权利要求2所述的clc-3基因的shrna质粒的构建方法,其特征在于,所述步骤s1中,针对所述clc-3基因设计多条干扰靶序列,通过敲低效果选择所述shrna序列。
4.如权利要求2所述的clc-3基因的shrna质粒的构建方法,其特征在于,所述步骤s2具体为,根据步骤s1的所述shrna序列,合...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵晓苗,李水洁,韩江,江素仕,
申请(专利权)人:广东省人民医院,
类型:发明
国别省市:
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