【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化学分析，特别涉及一种利用hplc检测维生素b6注射液及其杂质的方法。
技术介绍
1、维生素b6(vitamin b6)又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，遇光或碱易破坏，不耐高温。临床上应用维生素b6制剂防治妊娠呕吐和放射病呕吐。结构式如下：
2、
3、经文献调研可知，现有维生素b6原料药及其制剂相关质量标准收载的方法均只是针对原料药的工艺杂质，即下表的杂质a和杂质b，而维生素b6注射液因采用了高温灭菌的除菌工艺，维生素b6在高温条件下生成了6个降解杂质，即下表的杂质1～6：
4、
5、
6、
7、分析维生素b6及其杂质的现有技术包括中国药典2020版(chp2020)维生素b6项下hplc条件、欧洲药典11版(ep11)维生素b6项下hplc条件、中国专利技术专利
8、《cn114324636a》公开的hplc条件等。然而这些现有技术都不能将工艺杂质及降解杂质全部进行有效分离，且方法中所用试剂如磷酸钾，流动相所用缓冲液的磷酸钾溶液浓度较高，易在色谱系统中析出，导致仪器或色谱柱堵塞；如戊烷磺酸钠为离子对试剂，对色谱柱、仪器均有损伤，且色谱系统较难平衡，降低了检测效率，增加了检测成本。
技术实现思路
1、为解决上述问题，结合各杂质及维生素b6的理化性质，本专利技术提供了有效检测有关物质的分析方法，能同时测定维生素b6和上述工艺杂质及降
2、本专利技术采用的具体技术方案为一种利用hplc检测维生素b6注射液及其杂质的方法，包括以下步骤：
3、步骤1.配制空白溶液：由水和有机溶剂组成，水和有机溶剂的体积比为9：1，所述有机溶剂为甲醇或乙腈；
4、步骤2.色谱条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；
5、色谱柱柱温为30℃～40℃；
6、流动相a为缓冲盐水溶液，缓冲盐为甲酸铵、乙酸铵或磷酸铵，其中缓冲盐的摩尔浓度为10mmol/l～30mmol/l；
7、流动相b为甲醇或乙腈；
8、梯度洗脱程序为：
9、0～15min：流动相b的占比为8％～12％中的一个值；
10、15～20min：流动相b的占比由8％～12％中的一个值变换到25％；
11、20～25min：流动相b的占比为25％；
12、25～30min：流动相b的占比由25％变换到60％；
13、30～35min：60％流动相b；
14、35.1～40min：流动相b的占比为8％～12％中的一个值，且与0～15min流动相b的占比的值相同；
15、流动相的流速为0.8～1.2ml/min；
16、进样体积为5～20μl；
17、步骤3.样品检测：将待测样品用空白溶液溶解，配置成供试品溶液，注入高效液相色谱系统，根据色谱图分析待测样品中所含有关物质的种类及含量。
18、而且，杂质为维生素b6经氧化或聚合所得的降解杂质。
19、而且，步骤3中所含有关物质的种类包括维生素b6、
20、
21、优选地，步骤2中色谱柱的长度为250mm，色谱柱中填料的粒径为3.0～5.0μm。
22、优选地，步骤1中有机溶剂为甲醇，步骤2中流动相a为10mmol/l乙酸铵水溶液，流动相b为甲醇。
23、而且，步骤2中色谱柱柱温为35℃；流动相的流速为1.0ml/min；进样体积为10μl。
24、与现有技术相比，本技术方案的有益效果在于：1、洗脱分离效果好，检测灵敏度高，专属性强，能使样品中各有关物质在同一色谱条件下分离，且灵敏度高。可以快速、准确、可靠的检测出样品中至少6种有关杂质及其含量。通过对制剂中相关杂质的检测，能对合成和制剂过程的质量控制提供数据帮助和调整方向，从而有效控制维生素b6注射液的质量。2、为达到更好的测定效果，提供了最合适的测定条件参数范围，具体来说：(1)流动相a为甲酸铵水溶液或乙酸铵水溶液，得到的基线最好，且可保证空白溶剂对杂质的检测无干扰；其中甲酸铵或乙酸铵的浓度为10mmol/l～30mmol/l，可以得到较好的峰形和分离效果；(2)流动相b的溶剂选择甲醇或乙腈，使得到的峰形和分离效果最好，保留时间适中；(3)有机溶剂采用甲醇或乙腈，保证样品充分溶解；且有机溶剂和水的体积比为1:9，可以进一步提高峰的对称性，防止溶剂效应；(4)流动相的流速为0.8～1.2ml/min，进一步提高分离度的同时还能改善峰形；(5)色谱柱柱温为30℃～40℃，能进一步提高各组分的分离度。
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1.一种利用HPLC检测维生素B6注射液及其杂质的方法，其特征在于包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的利用HPLC检测维生素B6注射液及其杂质的方法，其特征在于：杂质为维生素B6经氧化或聚合所得的降解杂质。
3.根据权利要求1所述的利用HPLC检测维生素B6注射液及其杂质的方法，其特征在于：步骤3中所含有关物质的种类包括维生素B6、
4.根据权利要求1所述的利用HPLC检测维生素B6注射液及其杂质的方法，其特征在于：步骤2中色谱柱的长度为250mm，色谱柱中填料的粒径为3.0～5.0μm。
5.根据权利要求1所述的利用HPLC检测维生素B6注射液及其杂质的方法，其特征在于：步骤1中有机溶剂为甲醇，步骤2中流动相A为10mmol/L乙酸铵水溶液，流动相B为甲醇。
6.根据权利要求1所述的利用HPLC检测维生素B6注射液及其杂质的方法，其特征在于：步骤2中色谱柱柱温为35℃；流动相的流速为1.0mL/min；进样体积为10μL。
【技术特征摘要】
1.一种利用hplc检测维生素b6注射液及其杂质的方法，其特征在于包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的利用hplc检测维生素b6注射液及其杂质的方法，其特征在于：杂质为维生素b6经氧化或聚合所得的降解杂质。
3.根据权利要求1所述的利用hplc检测维生素b6注射液及其杂质的方法，其特征在于：步骤3中所含有关物质的种类包括维生素b6、
4.根据权利要求1所述的利用hplc检测维生素b6注射液及其杂质的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗广华，徐先英，李广媛，施哲儒，郭志荣，黄阳滨，
申请(专利权)人：湖北广济药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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