一种基因工程菌、含该基因工程菌的多菌混合转化体系及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基因工程菌、含该基因工程菌的多菌混合转化体系及其应用，属于生物工程技术领域；本发明专利技术采用基因工程手段在枯草芽孢杆菌B.subtilis WB800N的基础上构建了联合表达D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶(DAE)和L‑鼠李糖异构酶(L‑RI)的基因工程菌，然后通过启动子工程技术来提升基因工程菌的双酶表达量；本发明专利技术还基于该基因工程菌制备了一种多菌混合转化体系，所述基因工程菌和多菌混合转化体系能够有效提高D‑果糖的转化效率，进而实现了D‑阿洛酮糖和D‑阿洛糖的高效联产，具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种基因工程菌、含该基因工程菌的多菌混合转化体系及其应用。

技术介绍

1、d-阿洛酮糖和d-阿洛糖是一种天然稀有糖，具有高甜度低热量的特点，是一种几乎无热量的甜味剂，具有改善肠道菌群、降血糖、抗氧化，预防肥胖等功效，可代替蔗糖广泛应用于饼干、果汁、饮料等食品领域，同时d-阿洛糖还具有抗癌、抗肿瘤等生理功能，可作为医药合成的中间体，应用于医药临床领域中。

2、目前，d-阿洛酮糖和d-阿洛糖的制取主要有化学合成法和生物合成法两种，其中化学法存在效率低效、副产物多、纯化繁琐、成本高昂、污染大等缺陷，难以用于工业化生产d-阿洛酮糖。生物合成法是使用生物催化剂，以廉价的d-果糖为底物，催化d-果糖转化为d-阿洛酮糖和d-阿洛糖。具体的，先利用d-阿洛酮糖3-差向异构酶(dae)将d-果糖异构化为d-阿洛酮糖，然后l-鼠李糖异构酶再将d-阿洛酮糖异构化为d-阿洛糖。尽管生物合成法相比化学合成法具有反应迅速、绿色环保、原料廉价等优点，但是多酶级联生物合成时存在d-果糖的利用率不高的不足，进而导致了d-阿洛酮糖和d-阿洛糖的产量本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种联合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶和L-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌包含联合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶和L-鼠李糖异构酶的重组载体。

2.根据权利要求1所述的联合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶和L-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌的出发菌株为枯草芽孢杆菌。

3.根据权利要求1所述的联合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶和L-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述联合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶和L-鼠李糖异构酶的重组载体的载体包括pP43NMK；

4.根据权利要求3所述的联合表达D-阿洛酮糖3-...

【技术特征摘要】

1.一种联合表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶和l-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌包含联合表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶和l-鼠李糖异构酶的重组载体。

2.根据权利要求1所述的联合表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶和l-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌的出发菌株为枯草芽孢杆菌。

3.根据权利要求1所述的联合表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶和l-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述联合表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶和l-鼠李糖异构酶的重组载体的载体包括pp43nmk；

4.根据权利要求3所述的联合表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶和l-鼠李糖异构酶的基因工程菌，其特征在于，所述启动子为phpaⅱ和pspovg启动子组合。

5.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包含权利要求1～4任一项所述的基因工程菌。

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【专利技术属性】
技术研发人员：齐向辉，汤馨睿，赵梅，张存胜，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：