【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及酶发酵，具体而言，涉及一种地衣芽孢杆菌e417-1及其应用。
技术介绍
1、碱性蛋白酶是一类能在碱性条件下水解肽键的酶，其最适ph一般在9-11左右。最早发现于猪的胰脏中，能够在碱性条件下将多肽链水解为氨基酸，因其在碱性ph条件下的活性和稳定性而广泛应用于各个领域。碱性蛋白酶作为一种重要的蛋白水解酶，早已实现了工业化生产，可广泛应用于洗涤剂行业、食品加工业、医药行业、皮革制造行业、丝绸制造行业、环保行业等。
2、微生物发酵产碱性蛋白酶，由于其培养简单、价格低廉、来源广、产量高等优点而被广泛应用于工业化生产。而由于国内现有菌株生产的碱性蛋白酶酶活较低，致使我国工业生产中用到的碱性蛋白酶主要依赖进口。因而，如何提供一种能够提高碱性蛋白酶酶活的生产菌株对我国碱性蛋白酶的广泛应用十分重要。
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的在于提供一种地衣芽孢杆菌e417-1及其应用，以解决现有技术中微生物菌株生产的碱性蛋白酶酶活较低的问题。
2、为了实现上述目的，根据本专利技术的第一个方面，提供了一种地衣芽孢杆菌e417-1，分类命名为地衣芽孢杆菌bacillus licheniformis，于2023年11月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为cctcc no:m 20232199。
3、为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种发酵生产碱性蛋白酶的方法，方法包括：将活化好的上述的地衣芽孢杆菌进行种子培养
4、进一步地，种子培养包括：将活化好的地衣芽孢杆菌的单菌落接种至种子培养基中，进行摇瓶培养；优选地，种子培养基的体积占种子培养的容器体积的20-30％；优选地，种子培养的容器体积为2-5l；优选地，摇瓶培养的温度为33-40℃；优选地，摇瓶培养的转速为180-220rpm/min；优选地，摇瓶培养的时间为24-36h。
5、进一步地，发酵培养包括：将种子培养液接种至发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵培养液；将发酵培养液进行离心，所得上清液即为碱性蛋白酶；优选地，发酵培养基的体积占发酵培养的容器体积的50-60％；优选地，发酵培养的容器体积为50-25000l；优选地，种子培养液以5-10％的体积比进行接种；优选地，发酵培养的温度为33-40℃；优选地，发酵培养的环境ph值为6.3-7.8；优选地，发酵培养中通入的气体体积与进行发酵的液体体积的比值为1：0.8-1.2；优选地，发酵培养的转速为80-140rpm/min；优选地，发酵培养的溶氧量为0-50％；优选地，发酵培养的时间为32-56h；优选地，离心的转速为10000-14000rpm/min；优选地，离心的时间为2-5min。
6、进一步地，当发酵培养的容器体积大于5000l时，进行种子培养之后还包括预发酵培养，预发酵培养包括：将种子培养后的培养液接种至种子培养基中，进行预发酵培养，得到种子培养液；优选地，种子培养基的体积占预发酵培养的容器体积的30-60％；优选地，预发酵培养的容器体积为3000-5000l；优选地，种子培养后的培养液以0.08-0.15％的体积比进行接种；优选地，预发酵培养的温度为33-40℃；优选地，预发酵培养的环境ph值为6.3-7.8；优选地，预发酵培养的转速为180-220rpm/min；优选地，预发酵培养中通入的气体体积与进行发酵的液体体积的比值为1:0.8-1.2；优选地，预发酵培养的时间为16-24h。
7、进一步地，发酵培养还包括：在发酵培养过程中对培养液进行总糖检测，当总糖量小于2.5％时，加入补料培养基。
8、进一步地，补料培养基包括200-300g/l的玉米粉，80-150g/l的豆饼粉及1.5-3g/l的消泡剂。
9、进一步地，种子培养基选自如下任意一种组成：a：30-50g/l的玉米粉，20-40g/l的豆饼粉，1-3g/l的磷酸氢二钠，1-5g/l的碳酸钠及1-5-g/l的消泡剂；或b：5-20g/l的蛋白胨，3-10g/l的酵母提取物，1-10g/l的消泡剂及5-20g/l的nacl；优选地，种子培养基的ph值为7.0-7.5。
10、进一步地，发酵培养基包括以下组分：60-120g/l的玉米粉，50-100g/l的豆饼粉，0.5-3g/l的碳酸钠，1-5g/l的磷酸氢二钠及1-10g/l的消泡剂；优选地，发酵培养基的ph值为7.0-7.5。
11、进一步地，消泡剂包括：有机硅类化合物或聚醚类化合物。
12、应用本专利技术的技术方案，分离了一株地衣芽孢杆菌e417-1(保藏编号为cctcc no:m 20232199)其具有提高的碱性蛋白酶活性，利用其能够生产得到酶活较高的碱性蛋白酶，且适用于工业放大生产，为我国碱性蛋白酶的需求提供了一定的供应支持。
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1.一种地衣芽孢杆菌E417-1，其特征在于，分类命名为地衣芽孢杆菌BacillusLicheniformis，于2023年11月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为CCTCC NO:M 20232199。
2.一种发酵生产碱性蛋白酶的方法，其特征在于，所述方法包括：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述种子培养包括：
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养包括：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，当所述发酵培养的容器体积大于5000L时，进行种子培养之后还包括预发酵培养，
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养还包括：
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述补料培养基包括200-300g/L的玉米粉，80-150g/L的豆饼粉及1.5-3g/L的消泡剂。
8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述种子培养基选自如下任意一种组成：
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基包括以下
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述消泡剂包括：有机硅类化合物或聚醚类化合物。
...【技术特征摘要】
1.一种地衣芽孢杆菌e417-1，其特征在于，分类命名为地衣芽孢杆菌bacilluslicheniformis，于2023年11月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为cctcc no:m 20232199。
2.一种发酵生产碱性蛋白酶的方法，其特征在于，所述方法包括：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述种子培养包括：
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养包括：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，当所述发酵培养的容器体积大于5000l时，进行种子培养之后还包括预发酵培养，
6.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈星宇，胡悦，喻晨，金晶，李陈宗，余华顺，
申请(专利权)人：安琪酶制剂宜昌有限公司，
类型：发明
国别省市：
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