【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析方法，具体为一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法。
技术介绍
1、苯乙醇可用作化妆品中的抗菌防腐剂，或作为香料广泛使用。大部分玫瑰香水和其他花香型香水均包含苯乙醇。苯乙醇被“美国食用香料与萃取物制造者协会”(flavorand extract manufacturers’association，fema)授予了“公认安全的物质”(generallyregarded as safe，gras)资格，并被“美国食品药品监督管理局”(food and drugadministration，fda)批准用于食品用途，被广泛用作调味剂。苯乙醇在鼻用，眼用和耳用制剂中用作抗菌防腐剂。作为药品常用辅料，随着药品安全性要求的进一步加强，苯乙醇的有关物质应进行研究和控制。
2、目前，苯乙醇在美国药典中有收载，但并无有关物质检查项；在中国药典、英国药典中均无收载；2021年1月，药典委发布了“苯乙醇药用辅料标准草案公示稿”，其中有关物质方法采用气相法。目前，现有技术中尚无苯乙醇有关物质的液相检测方法。
3、苯乙醇可能存在的杂质及结构如下表：
4、
5、
6、张奥文在其论文《β-苯乙醇制备工艺研究》中提供了以c18柱(dikmadiamonsilc18，250mm×4.6mm，5μm)为色谱柱、以乙腈-水(45:55)为流动相检测苯乙醇含量的方法；沈潇冰等在《高效液相色谱法测定配制酒中的6种芳香物质》提出了“液相色谱柱：zobax sb-c18柱(4.6mm×15
7、为了药物分析工作的顺利开展，亟需一种对苯乙醇中杂质能够实现准确检测和定量的分析方法。
技术实现思路
1、为了解决现有技术的上述问题，本专利技术提供了一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，可以对苯乙醇中的杂质进行准确地检出和定量。本专利技术的技术方案如下所述：
2、一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，流动相包含磷酸盐缓冲液、甲醇和乙腈，其中，磷酸盐缓冲液为磷酸铵盐配制，ph值范围为3.2～3.6。
3、检测方法的研发过程中，色谱条件对于物质的检出和准确定量有重要影响，包括活性成分或杂质在内的不同化合物，由于其各自的结构特点，对流动相、色谱柱等色谱条件响应不同，造成峰形、分离度、检测灵敏度或精确度可能无法同时实现最佳效果。专利技术人在苯乙醇项目方法研究过程中，意外发现，将流动相中磷酸二氢钠替换为磷酸二氢铵，同时控制一定的ph值条件，并配合适宜的有机相比例和梯度洗脱条件，可显著改善主峰与相邻杂质峰的分离效果，同时可实现多个杂质的准确检出和定量。
4、优选的，所述流动相中磷酸铵盐为磷酸二氢铵或磷酸氢二铵，用磷酸调节ph值。在本专利技术的实施例中，采用的是1.2g/l磷酸二氢铵溶液，作为可替换的方案，也可采用磷酸氢二铵配制缓冲液。
5、优选的，所述流动相包含流动相a和流动相b，其中，流动相a包含有机相和磷酸铵盐溶液，有机相体积百分数为32～38％，磷酸铵盐溶液体积百分数为62～68％；流动相b为有机相，所述流动相a和流动相b的所述有机相包含甲醇和乙腈，甲醇体积百分数为75～79％，乙腈体积百分数为21～25％。
6、进一步的，采用如下梯度洗脱程序：
7、在0～33min内，流动相a体积百分数保持95～100％，流动相b体积百分数保持0～5％；在33～35min内，流动相a体积百分数由95～100％线性渐变至73～81％，流动相b体积百分数由0～5％线性渐变至19～27％；在35～60min内，流动相a体积百分数保持73～81％，流动相b体积百分数保持19～27％；在60～65min内，流动相a体积百分数由73～81％线性渐变至95～100％，流动相b体积百分数由19～27％线性渐变至0～5％；在65～80min内，流动相a体积百分数保持95～100％，流动相b体积百分数保持0～5％。在该配比范围和梯度条件下，各杂质峰之间及主峰与相邻杂质峰间均能实现完全分离，同时活性成分和杂质峰出峰位置基线稳定，峰形良好，能将所有杂质尽快检出。
8、作为一个典型的实施例，所述流动相a中有机相体积百分数为35％，磷酸铵盐溶液体积百分数为65％，有机相中甲醇体积百分数为77％，乙腈体积百分数为23％。
9、优选的，流动相流速为1.4～1.7ml/min，优选1.5ml/min。
10、优选的，色谱柱采用waters ods1 250mm×4.6mm，5μm或与之性能相当的色谱柱。
11、优选的，色谱柱柱温为38～45℃，优选40℃。
12、优选的，采用紫外检测器或二极管阵列检测器(dad检测器)。
13、优选的，还包括供试品溶液的配制，方法为取苯乙醇采用稀释剂配制成浓度为0.5mg/ml的溶液。
14、进一步的，所述稀释剂为流动相a。
15、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
16、1，本专利技术弥补了现有技术中缺少检测苯乙醇有关物质分析方法的弊端，提供了基于高效液相色谱法的技术方案，本专利技术提供的流动相、色谱柱及梯度条件可实现苯乙醇及其所含杂质良好分离，同时保证峰形良好，实现了多个杂质的灵敏检出和准确定量；
17、2，与现有技术中气相方法比，可测定气相方法无法检测出的杂质，本专利技术提供的高液相色谱法对苯乙醇有关物质检出能力更高；
18、3，本方法具有操作简单、灵敏度高、耐用性好、准确度高等特点，经过专属性、定量限、检测限、线性、精密度、准确度的考察，建立了苯乙醇有关物质的定量检测方法。
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1.一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，流动相包含磷酸盐缓冲液、甲醇和乙腈，其中，磷酸盐缓冲液为磷酸铵盐配制，pH值范围为3.2～3.6；
2.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相中磷酸铵盐为磷酸二氢铵或磷酸氢二铵，用磷酸调节pH值。
3.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相中磷酸盐缓冲液为1.2g/L磷酸二氢铵溶液。
4.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相包含流动相A和流动相B，其中，流动相A包含有机相和磷酸铵盐溶液，有机相体积百分数为32～38％，磷酸铵盐溶液体积百分数为62～68％；流动相B为有机相，所述流动相A和流动相B的所述有机相包含甲醇和乙腈，甲醇体积百分数为75～79％，乙腈体积百分数为21～25％。
5.根据权利要求4所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，采用如下梯度洗脱程序：
6.根据权利要求1所述的一种高效液
7.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，色谱柱采用Waters ODS1 250mm×4.6mm，5μm或与之性能相当的色谱柱。
8.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，色谱柱柱温为38～45℃。
9.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，采用紫外检测器或二极管阵列检测器。
10.根据权利要求4所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，还包括供试品溶液的配制，方法为取苯乙醇采用稀释剂配制成浓度为0.5mg/ml的溶液，所述稀释剂为流动相A。
...【技术特征摘要】
1.一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，流动相包含磷酸盐缓冲液、甲醇和乙腈，其中，磷酸盐缓冲液为磷酸铵盐配制，ph值范围为3.2～3.6；
2.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相中磷酸铵盐为磷酸二氢铵或磷酸氢二铵，用磷酸调节ph值。
3.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相中磷酸盐缓冲液为1.2g/l磷酸二氢铵溶液。
4.根据权利要求1所述的一种高效液相法检测苯乙醇有关物质的分析方法，其特征在于，所述流动相包含流动相a和流动相b，其中，流动相a包含有机相和磷酸铵盐溶液，有机相体积百分数为32～38％，磷酸铵盐溶液体积百分数为62～68％；流动相b为有机相，所述流动相a和流动相b的所述有机相包含甲醇和乙腈，甲醇体积百分数为75～79％，乙腈体积百分数为21～25％。
5.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：李铁军，吴彩玲，闫芳，李春红，杨萍，郭志强，孙迎基，
申请(专利权)人：山东京卫制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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