【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学检测，具体涉及一种嗅觉受体or51l1突变体及其用途，更具体涉及一种or51l1突变体、核酸分子、表达载体、重组细胞或重组细胞系、试剂或试剂盒及其它们的用途、检测化合物的方法。
技术介绍
1、在我们的生活环境中，存在着大量具有不同极化特性和分子量的恶臭物质，例如中链和长链脂肪酸。包括人类在内的哺乳动物气味识别的机制主要是通过气味分子与存在于鼻腔嗅上皮上的特异嗅觉受体相结合。
2、当有气味的物质被鼻子吸入的空气带到嗅觉上皮（olfactory epithelium，oe），嗅觉上皮中含有数量巨大的嗅觉神经元（olfactory receptor neuron，orn），并且每个嗅觉神经元选择性地表达一种嗅觉受体（odorant receptor，or）。气味分子特异性地与某种orn上的or相互作用，激活orn，将化学信号转换为动作电位。然后通过嗅球将信息传递到位于大脑皮层的高级中枢神经系统，翻译成嗅觉。据报道，人类有约400种不同的嗅觉受体，而这些受体是由大约3%的人类基因组编码的。
3、or51l1为人类嗅觉受体家族中的一员，其可以选择性的识别恶臭物质己酸，并可以作为嗅觉受体反应的指示剂在寻找恶臭抑制剂中发挥重要作用。但or51l1野生型对己酸的响应强度和灵敏度略低，不利于筛选出效果良好的恶臭抑制剂。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本专利技术提供了一种嗅觉受体or51l1突变体及
2、本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：
3、本申请通过计算机模拟结合生物学筛选的方法，锚定嗅觉受体的结合口袋，并对结合口袋中的氨基酸进行修改，以增强嗅觉受体对气味分子的响应强度以及提高灵敏度，且能改变配体谱（气味分子选择范围），这为嗅觉受体的改造提供了基础。
4、进一步地，本申请对嗅觉受体or51l1野生型的结合口袋中的11个氨基酸进位点进行突变，得到不同的突变体。然后通过双荧光素酶法测定各突变体的活性，发现嗅觉受体的两个氨基酸位点t161、l209的突变可改变嗅觉受体的活性，改变与之结合的气味分子选择范围，以增强嗅觉受体对气味分子的响应强度以及提高灵敏度，尤其是增强了or51l1结合戊酸、己酸、庚酸及苯乙酸乙酯的活性。因此，本专利技术在一定程度上为改进芳香物质、恶臭物质、芳香物质增强剂、恶臭物质抑制剂、恶臭物质掩盖剂或其他活性分子筛选的方法提供了基础。
5、在本专利技术的第一方面，本专利技术提出了一种or51l1突变体。根据本专利技术的实施例，与氨基酸序列如seq id no:1所示的or51l1野生型相比，所述or51l1突变体的突变位点为t161a或l209f。相较于or51l1野生型，本专利技术的or51l1突变体通过上述位点的突变，可增强其活性、改变与之结合的气味分子选择范围，以及对气味分子的响应强度以及提高灵敏度，尤其是增强了or51l1结合戊酸、己酸、庚酸及苯乙酸乙酯的活性。
6、在本专利技术的一个可选实施例中，与氨基酸序列如seq id no:1所示的or51l1野生型相比，所述or51l1突变体的突变位点为t161a，所述or51l1突变体的氨基酸序列如seq idno:2所示。在本专利技术的另一个可选实施例中，与氨基酸序列如seq id no:1所示的or51l1野生型相比，所述or51l1突变体的突变位点为l209f，所述or51l1突变体的氨基酸序列如seqid no:3所示。
7、or51l1（genbank: ali87718.1）的氨基酸序列：
8、mgdwnnsdavepifilrgfpgleyvhswlsilfclaylvafmgnvtilsviwiesslhqpmyyfisilavndlgmslstlptmlavlwldapeiqasacyaqlffihtftflessvllamafdrfvaichplhyptiltnsvigkiglacllrslgvvlptplllrhyhychgnalshafclhqdvlrlsctdartnsiyglcvviatlgvdsifillsyvlilntvldiasreeqlkalntcvshicvvliffvpvigvsmvhrfgkhlspivhilmadiylllppvlnpivysvrtkqirlgilhkfvlrrrf（seq id no:1）；
9、or51l1 t161a的氨基酸序列：
10、mgdwnnsdavepifilrgfpgleyvhswlsilfclaylvafmgnvtilsviwiesslhqpmyyfisilavndlgmslstlptmlavlwldapeiqasacyaqlffihtftflessvllamafdrfvaichplhyptiltnsvigkiglacllrslgvvlpaplllrhyhychgnalshafclhqdvlrlsctdartnsiyglcvviatlgvdsifillsyvlilntvldiasreeqlkalntcvshicvvliffvpvigvsmvhrfgkhlspivhilmadiylllppvlnpivysvrtkqirlgilhkfvlrrrf（seq id no:2）；
11、or51l1 l209f的氨基酸序列：
12、mgdwnnsdavepifilrgfpgleyvhswlsilfclaylvafmgnvtilsviwiesslhqpmyyfisilavndlgmslstlptmlavlwldapeiqasacyaqlffihtftflessvllamafdrfvaichplhyptiltnsvigkiglacllrslgvvlptplllrhyhychgnalshafclhqdvlrlsctdartnsiyglcvviatfgvdsifillsyvlilntvldiasreeqlkalntcvshicvvliffvpvigvsmvhrfgkhlspivhilmadiylllppvlnpivysvrtkqirlgilhkfvlrrrf（seq id no:3）。
13、需要说明的是，本专利技术的or51l1突变体是指活性部分，为了得到本专利技术的or51l1突变体的n端或c端添加缀合物（例如蛋白标签）也在本专利技术的保护范围内。
14、在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种核酸分子。根据本专利技术的实施例，所述核酸分子编码第一方面所述的or51l1突变体。根据本专利技术实施例的核酸分子所编码前述的or51l1突变体。
15、根据本专利技术的实施例，所述核酸分子为dna。
16、需要说明的是，对于本文中所提及的核酸分子，本领域技术人员应当理解，实际包括互补双链的任意一条，或者两条。为本文档来自技高网...
【技术保护点】
1. 一种OR51L1突变体，其特征在于，与氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的OR51L1野生型相比，所述OR51L1突变体的突变位点为T161A或L209F。
2.一种核酸分子，其特征在于，编码权利要求1所述的OR51L1突变体。
3. 一种表达载体，其特征在于，携带权利要求2所述的核酸分子。
4.一种重组细胞或重组细胞系，其特征在于，携带权利要求2所述的核酸分子、或权利要求3所述的表达载体；或者
5.根据权利要求4所述的重组细胞或重组细胞系，其特征在于，所述重组细胞或重组细胞系是通过将表达载体引入至宿主细胞中而获得的；
6.一种试剂或试剂盒，其特征在于，包括：
7.嗅觉受体OR51L1在识别化合物中的用途；
8.化合物在激活嗅觉受体OR51L1中的用途；
9.一种检测化合物的方法，其特征在于，包括：
10.根据权利要求7~8任一项所述的用途或权利要求9所述的方法，其特征在于，所述嗅觉受体OR51L1为OR51L1突变体，所述化合物选自苯乙酸乙酯、戊酸、己酸和庚酸中
11. 根据权利要求10所述的用途或方法，其特征在于，与氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的OR51L1野生型相比，所述OR51L1突变体的突变位点为T161A，所述化合物选自苯乙酸乙酯、戊酸、己酸和庚酸中的至少之一；或者
12.一种筛选恶臭抑制剂的方法，其特征在于，包括:
13. 根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述嗅觉受体OR51L1为OR51L1突变体，所述化合物选自戊酸、己酸和庚酸中的至少之一。
14. 根据权利要求13所述的方法，其特征在于，与氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的OR51L1野生型相比，所述OR51L1突变体的突变位点为T161A，所述化合物选自戊酸、己酸和庚酸中的至少之一；或者
15.根据权利要求9或12所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括：
...【技术特征摘要】
1. 一种or51l1突变体，其特征在于，与氨基酸序列如seq id no:1所示的or51l1野生型相比，所述or51l1突变体的突变位点为t161a或l209f。
2.一种核酸分子，其特征在于，编码权利要求1所述的or51l1突变体。
3. 一种表达载体，其特征在于，携带权利要求2所述的核酸分子。
4.一种重组细胞或重组细胞系，其特征在于，携带权利要求2所述的核酸分子、或权利要求3所述的表达载体；或者
5.根据权利要求4所述的重组细胞或重组细胞系，其特征在于，所述重组细胞或重组细胞系是通过将表达载体引入至宿主细胞中而获得的；
6.一种试剂或试剂盒，其特征在于，包括：
7.嗅觉受体or51l1在识别化合物中的用途；
8.化合物在激活嗅觉受体or51l1中的用途；
9.一种检测化合物的方法，其特征在于，包括：
10.根据权利要求7~8任一项所述的用途或权利要求9所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘迎建，郑玉，王菲，刘卫红，石培培，
申请(专利权)人：汉王科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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