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一种酶促引入苏糖核酸以提高DNA折纸生物稳定性的方法技术

技术编号:40670272 阅读:42 留言:0更新日期:2024-03-18 19:06
本发明专利技术公开了一种酶促引入苏糖核酸以提高DNA折纸生物稳定性的方法;属于核酸纳米技术和非天然核酸应用领域,步骤:利用末端脱氧核苷酸转移酶在单链DNA的3’末端延伸苏糖核酸,鉴定出当单体为苏糖鸟苷三磷酸时,相应单链产物的抗Exo I降解能力获得提升,P‑tG在14h时仅降解30%,而未进行末端TNA延伸的单链DNA在5min时便降解70%;利用TdT和tGTP同时在多条DNA订书钉链的3’末端延伸TNA,形成含有TNA的DNA折纸;比较DON和DON‑tG的稳定性,在12h时,DON仅剩约20%,DON‑tG仍有约80%;本发明专利技术相比于未进行末端TNA延伸的单链DNA,P‑tG显示了最高的抗Exo I降解能力,使用tGTP对DNA订书钉链进行延伸后,延伸产物与DNA骨架链退火所形成的DON‑tG在10%FBS存在下显示了比未保护DNA折纸更高的稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于核酸纳米技术和非天然核酸应用领域,涉及了一种通过酶促反应在订书钉链末端延伸tna以提高dna折纸生物稳定性的方法,具体的,是涉及了一种先利用tdt和tgtp在dna订书钉链的3’末端延伸tna,再与dna骨架链退火组装而成生物稳定性更高的dna折纸的方法。


技术介绍

1、作为一种纳米结构,dna折纸具有基于碱基配对的可编程性,能够兼容的形状和大小范围较广。dna折纸在生物相容性、对纳米结构的精确控制、力学性质以及位点特异性功能化等方面的优势使得其有着诸多的生物医学应用,包括生物传感、体内成像、药物递送等。然而,dna折纸在生理环境中易被核酸酶降解,较低的生物稳定性限制了dna折纸在生物医学中的应用。目前,提高dna折纸稳定性的方法多为在dna折纸表面包裹能够屏蔽周围环境的物质,如:脂双层、蛋白、与聚乙二醇连接的寡赖氨酸、聚合物、类肽、树突状寡核苷酸及二氧化硅。在这些方法中,起保护作用的物质多是通过与dna间的疏水或静电相互作用实现对dna折纸的包裹,而这种非共价的结合在环境的改变和机械力下容易被破坏。有研究表明,通过点击化学反应使dna形成索本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酶促引入苏糖核酸以提高DNA折纸生物稳定性的方法,其特征在于,其操作步骤如下:

2.根据权利要求1所述的一种酶促引入苏糖核酸以提高DNA折纸生物稳定性的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述利用TdT和TNA三磷酸单体在单链DNA的3’末端延伸TNA具体是:利用TdT和4种TNA三磷酸单体,在5’端标记Cy5荧光团的单链DNA3’端延伸TNA。

3.根据权利要求2所述的一种酶促引入苏糖核酸以提高DNA折纸生物稳定性的方法,其特征在于,根据变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,使用4种单体均可实现DNA3’端的TNA引入。

4.根据权利要求1所述的一种...

【技术特征摘要】

1.一种酶促引入苏糖核酸以提高dna折纸生物稳定性的方法,其特征在于,其操作步骤如下:

2.根据权利要求1所述的一种酶促引入苏糖核酸以提高dna折纸生物稳定性的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述利用tdt和tna三磷酸单体在单链dna的3’末端延伸tna具体是:利用tdt和4种tna三磷酸单体,在5’端标记cy5荧光团的单链dna3’端延伸tna。

3.根据权利要求2所述的一种酶促引入苏糖核酸以提高dna折纸生物稳定性的方法,其特征在于,根据变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,使用4种单体均可实现dna3’端的tna引入。

4.根据权利要求1所述的一种酶促引入苏糖核酸以提高dna折纸生物稳定性的方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述用exo i处理未延伸及分别用4种tna三磷酸单体进行了延伸的单链dna,比较各组中单链随处理时间的降解情况,鉴定出用tgtp进行延伸的p-tg抗exoi的降解能力具体是:

5.根据权利要求4所述的一种酶促引入苏糖核酸以提高dna折纸生物稳定性的方法,其特征在于,

6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员:于涵洋覃博荷王琦姜硕星
申请(专利权)人:南京大学
类型:发明
国别省市:

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