【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体地，涉及mir-3104-5p抑制剂的新用途，更具体地，涉及mir-3104-5p抑制剂在糖尿病治疗中的新用途。
技术介绍
1、糖尿病是一种遗传和环境因素共同作用而形成的多基因遗传性复杂疾病。2型糖尿病发病率不断攀升，占糖尿病总发病率的95%以上。糖尿病及心血管、视网膜等多种并发症严重影响人民健康，造成巨大社会负担和经济花费。新近研究发现生命早期环境对成年期慢性病的发生具有重要驱动作用。针对生命早期不良环境进行尽早干预是极其重要的。作为重大慢性疾病之一，糖尿病的早期防治具有重要价值。多项大型流行病学研究显示，包括早期预防及早期干预可延缓糖尿病发生，改善心血管并发症预后。
2、目前，针对2型糖尿病的药物治疗，临床使用最广泛的是胰岛素刺激剂---磺脲类和胰岛素增敏剂---双胍类。然而，磺脲类只能刺激胰腺产生胰岛素，胰岛素的靶组织对胰岛素的敏感性并未得到有效改善。双胍类具有一定的肾毒性。长期用药使胰腺长期处于紧张的工作状态，最终导致需要体外胰岛素来帮助降糖，这样会进一步导致胰岛功能的部分或全部丧失。同时由于血糖反复反弹，使血液的粘稠度增加，血液的微循环发生障碍，最终仍会发生心、脑、肾及皮肤、神经等方面的并发症。因此，探索2型糖尿病潜在的分子机制和新的治疗靶点，对糖尿病治疗具有重要意义。
3、microrna（mirna）是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸的小rna，在细胞内具有多种重要的调节作用。mirna与糖代谢也存在密切关系。因此，研究mirna与生命早期不良环境导致的糖代
技术实现思路
1、针对上述现有技术中存在的技术问题，本专利技术的目的在于寻找和发现糖尿病治疗和诊断相关的mirna标志物。本专利技术的专利技术人在进行糖尿病发病机制探索的研究中发现，mir-3104-5p在生命早期高脂饮食暴露小鼠中显著上调，通过进一步的动物实验研究发现，抑制mir-3104-5p的表达能够显著改善肝细胞糖代谢，发挥治疗糖尿病的作用。本专利技术基于这一发现得以完成。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、本专利技术的第一方面提供了mir-3104-5p抑制剂在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用。
4、进一步，所述mir-3104-5p抑制剂包括抑制mir-3104-5p表达的干扰分子。
5、进一步，所述mir-3104-5p抑制剂包括靶向mir-3104-5p的sirna、shrna、dsrna、微小rna、反义核酸中的任意一种或多种。
6、进一步，所述靶向mir-3104-5p的sirna的序列如seq id no:2所示。
7、在本专利技术中，所述mirna是指微小rna，即小的非编码rna分子，是一类内生的、长度约20-24个核苷酸的小rna，其在细胞内具有多种重要的调节作用。主要在转录后水平调控基因表达（大约调控1/3的蛋白编码基因），从而控制细胞的凋亡、增殖、分化、代谢以及个体的发育和肿瘤的发生、发展以及耐药。mirna存在多种形式，最原始的是pri-mirna，长度大约为300-1000个碱基；pri-mirna经过一次加工后，成为pre-mirna，即mirna前体，长度大约为70-90个碱基；pre-mirna再经过dicer酶的酶切后，成为长约20-24 nt的成熟mirna。
8、在本专利技术的具体实施方案中，所述mirna生物标志物mir-3104-5p的序列信息可在mirbase数据库（http://microrna.sanger.ac.uk/）中进行查询获得。
9、在一些实施方案中，本专利技术所述的mir-3104-5p抑制剂包括任何能够抑制mir-3104-5p表达水平的生物合成物质、化学合成物质、天然纯化物质、经修饰的天然纯化物质、半合成物质和/或其任意组合，包括但不限于：靶向mir-3104-5p的sirna、shrna、dsrna、微小rna、反义核酸，以及能表达或形成所述sirna、shrna、dsrna、微小rna、反义核酸的构建物、小分子化合物等。本专利技术所述的抑制mir-3104-5p表达的试剂并不局限于本专利技术具体实施例中使用的如seq id no:2所示的靶向mir-3104-5p的sirna。任何能够抑制mir-3104-5p表达的试剂均在所述mir-3104-5p抑制剂的范畴内。
10、在本专利技术中，所述糖尿病是指特征在于长时间高血糖水平的疾病，可以指糖尿病的所有或任何类型，包括但不限于：1型糖尿病、2型糖尿病、囊性纤维化相关糖尿病、外科手术性糖尿病、妊娠糖尿病和线粒体糖尿病等。在一些实施方案中，糖尿病可以是遗传性糖尿病的形式。在本专利技术的具体实施方案中，糖尿病是指生命早期高脂饮食暴露引发的糖尿病。
11、在本专利技术中，所述治疗通常涉及治疗人类或动物（例如，被兽医所应用），其中可达到某些预期的治疗效果，例如，抑制病症的发展（包括降低病症发展速度、使病症发展停止）、改善病症和治愈病症。还包括作为预防措施（例如预防）的治疗。对还没有发展为病症但有发展为该病症危险的患者的用途，也包括在所述术语治疗中。
12、在本专利技术中，所述sirna是指小干扰性核糖核酸，即相对短长度的双链核酸或任选其较长前体。在一些实施方式中，本专利技术中可用sirna的长度优选为约20至50 bp的长度。但是，在此对可用sirna的长度没有特殊限制。例如，sirna可以最初以前体形式存在于细胞中，所述前体形式与递送至靶细胞时或递送至靶细胞后表现和发挥基因沉默活性的sirna的最终或加工形式实质上不同。例如，sirna的前体形式可以包括前体序列元件，所述元件在递送时或递送后就会被加工、降解、改变或切割，以产生在细胞内有介导基因沉默活性的sirna。在一些实施方式中，可用的sirna具有的前体长度为例如约100至200个碱基对或50至100个碱基对或少于约50个碱基对，其在靶细胞内会产生有活性的、加工过的sirna。在其它实施方式中，可用的sirna或sirna前体长度约为10至49 bp或15至35 bp或约21至30 bp。
13、在本专利技术中，所述shrna是指短发夹rna，shrna包括两个短反向重复序列。克隆到shrna表达载体中的shrna包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔，组成发夹结构，由polⅲ启动子控制。随后再连上5-6个t作为rna聚合酶ⅲ的转录终止子。shrna可以稳定地整合到细胞的基因组中，允许长期基因敲除。
14、在本专利技术中，所述dsrna是指双链核糖核酸，由两条互补链复性形成的rna分子，可以被dicer酶切割形成sirna。dsrna通过rna干扰（rnai）来抑制基因的表达，dsrna不需要与靶基因序列具有100%的同源性，只要其能够抑制靶基因表达即可。
15、在本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.miR-3104-5p抑制剂在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述miR-3104-5p抑制剂包括抑制miR-3104-5p表达的干扰分子。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述miR-3104-5p抑制剂包括靶向miR-3104-5p的siRNA、shRNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸中的任意一种或多种。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述靶向miR-3104-5p的siRNA的序列如SEQ ID NO:2所示。
5.检测miR-3104-5p表达水平的试剂在制备用于诊断糖尿病的诊断产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述检测miR-3104-5p表达水平的试剂包括特异性识别miR-3104-5p的探针和/或特异性扩增miR-3104-5p的引物。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述特异性识别miR-3104-5p的探针的序列如SEQ ID NO:1所示。
8.如下任一种应用，所述应用
9.如下任一种产品，所述产品包括：
10.如下任一种方法，所述方法包括：
...【技术特征摘要】
1.mir-3104-5p抑制剂在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述mir-3104-5p抑制剂包括抑制mir-3104-5p表达的干扰分子。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述mir-3104-5p抑制剂包括靶向mir-3104-5p的sirna、shrna、dsrna、微小rna、反义核酸中的任意一种或多种。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述靶向mir-3104-5p的sirna的序列如seq id no:2所示。
5....
【专利技术属性】
技术研发人员：张茜，肖新华，吴伊凡，曾缘，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：
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