【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于脂质体领域，具体涉及一种纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法。
技术介绍
1、岩藻黄质(fucoxanthin)是一种类胡萝卜素的天然色素，从褐藻中提取的天然海洋色素。然而，岩藻黄素水溶性差，在光和热条件下易降解，口服生物利用度低，限制了其应用。因此，使用载体对岩藻黄素进行包埋是近年来重要的研究课题。
2、目前作为岩藻黄质的载体主要有乳液，脂质体，纳米颗粒，水凝胶和微胶囊等。其中，现有研究在脂质体的表面修饰上主要分为三大类：蛋白质类，碳水化合物类，脂质类等。脂质体的制备方法主要有冷冻干燥法、注射法、薄膜分散法、逆向蒸发法等，以及最近的挤出机挤出法、探针-超声法、微流体动力学技术和超临界流体技术。但上述的制备方法存在以下弊端：传统脂质体的制备方法由于融合、聚集和降解而稳定性差，导致封装的药物在储存和递送过程中泄漏；采用毒性较大的有机溶媒，或者形成的多层脂质体层与层之间药物浓度不均一。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术存在的不足而提供一种基于纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法。该方法利用纳米纤维素对载岩藻黄质脂质体进行表面修饰，可实现在4-60℃和ph 2-10范围内，大幅度提高岩藻黄质脂质体的稳定性，并能够对其在贮藏和体内消化过程中的化学稳定性提供了良好的保护作用。
2、本专利技术为解决上述提出的问题所采用的技术方案为：
3、一种基于纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，是以岩藻黄质
4、上述纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：
5、(1)将混合脂质在无水乙醇中溶解，再加入岩藻黄质，在温度40～60℃加入磷酸钾缓冲溶液并搅拌，然后旋转蒸发除去乙醇，得到脂质体溶液；
6、(2)将脂质体溶液与纳米纤维素溶液混合，搅拌一段时间使二者融合，静置后放入冰箱冷藏，得到纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体。
7、按上述方案，步骤(1)中，考虑到岩藻黄质受热易分解，故本专利技术首先将岩藻黄质与混合脂质(胆固醇-卵磷脂)融合，温度为40～60℃，搅拌转速为300～1000rpm，搅拌时间为1～15min；所述岩藻黄质在无水乙醇中的含量为0.1～1.5mg/ml；所述磷酸钾缓冲溶液ph为6～10，加入体积为无水乙醇的2～5倍。
8、按上述方案，步骤(1)中，所述脂质体是由胆固醇和卵磷脂按质量比(0.1～0.5):1构成的混合脂质；岩藻黄质与混合脂质的质量比为(0.1～0.4):1。为了控制脂质体的颗粒大小达到预期的尺寸，混合脂质浓度不能高出岩藻黄质太多倍数，因此将胆固醇和卵磷脂质量比控制在(0.1～0.5):1这个范围内。
9、按上述方案，步骤(1)所得脂质体溶液的固含量为2～5mg/ml(固含量以胆固醇、卵磷脂和岩藻黄质三者的总质量与磷酸钾缓冲溶液体积之比来计)，岩藻黄质含量为0.2～0.4mg/ml。
10、按上述方案，步骤(2)中，所述脂质体溶液与纳米纤维素溶液的体积比为(0.5～1.5)：1，此时纳米纤维素溶液中纳米纤维素含量为0.5～8mg/ml，脂质体溶液的岩藻黄质含量为0.2～0.4mg/ml。这是基于脂质体溶液中岩藻黄质与纳米纤维素溶液中纳米纤维素的质量比为(1～5):50得出的。
11、按上述方案，步骤(2)中，搅拌转速为500～1500rpm，搅拌时间为1～20min。
12、按上述方案，所述纳米纤维素溶液的制备方法如下：将纤维素配制成浓度0.5～1.5％的纤维素水溶液，加入2,2,6,6-四甲基哌啶-氮-氧化物和溴化钠搅拌均匀后，用naoh溶液调节体系的ph为9.5～10.5，接着用naclo溶液将体系ph调节至10.0～10.5，再用1mnaoh溶液调节ph在10.00至稳定，然后透析6～8天，期间每2～4小时换水，直至溶液呈中性，最后超声3～10h，得到纳米纤维素溶液，羧基含量在1～2mmol/g，纳米纤维素含量为10～20mg/ml；其中，2,2,6,6-四甲基哌啶-氮-氧化物和溴化钠的添加量分别为纤维素质量的1～2％、5～15％。
13、按上述方案，步骤(2)中，静置采用常温静置5～30min，冷藏温度为0～6℃。
14、上述方法制备的纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体为溶液状态，其中纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体的有效含量为1.5～5.5mg/ml，粒径为239.33±3.4nm，zeta电位为-65.08±1.6mv，岩藻黄质的平均包封率为80～90％。
15、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
16、(1)本专利技术以岩藻黄质为芯材，通过乙醇注射法将其负载于脂质体中，然后利用纳米纤维素对岩藻黄质进行包埋，可在4～60℃和ph 2～10范围内大幅度提高岩藻黄质脂质体的稳定性，能够在并能够对其在贮藏和体内消化过程中的化学稳定性提供了良好的保护作用。
17、(2)本专利技术所得纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体分布比较均匀，颗粒直径为239.33±3.4nm，zeta电位为-65.08±1.6mv，经过2周的贮藏实验发现，其粒径稳定，这为复合脂质体良好的物理稳定性提供了保证。
18、(3)本专利技术所采用的制备方法在利用脂质体特有性能的基础上使用单一壁材纳米纤维素对岩藻黄质进行制备，直接简化了制备程序，并且具有高再现性和快速实施性，使其成为脂质体递送体系的可行选择，且经济成本较低，工艺简单，包埋效果理想。
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1.一种基于纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，是以岩藻黄质为芯材，负载于脂质体中，得到载岩藻黄质脂质体；然后采用纳米纤维素对所述载岩藻黄质脂质体进行表面修饰，得到基于纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体；其中所述脂质体是由胆固醇和卵磷脂组成的混合脂质。
2.根据权利要求1所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，所述脂质体是由胆固醇和卵磷脂按质量比0.1:1～0.5:1构成。
3.根据权利要求1所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，所述岩藻黄质与混合脂质的质量比为0.1:1～0.4:1。
4.根据权利要求1～3任一项所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，搅拌转速为300～1000rpm，搅拌时间为1～15min；所述岩藻黄质在无水乙醇中的含量为0.1～1.5mg/ml，岩藻黄质与混合脂质的质量比为0.1:1～0.4:1；所述磷酸钾缓冲溶
6.根据权利要求4所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，所述纳米纤维素溶液的制备方法如下：将纤维素配制成浓度0.5～1.5％的纤维素水溶液，加入2,2,6,6-四甲基哌啶-氮-氧化物和溴化钠搅拌均匀后，用NaOH溶液调节体系的pH为9.5～10.5，接着用NaClO溶液将体系pH调节至10.0～10.5，再用1M NaOH溶液调节pH在10.00至稳定，然后透析6～8天，期间每2～4小时换水，直至溶液呈中性，最后超声3～10h，得到纳米纤维素溶液，羧基含量在1～2mmol/g，纳米纤维素含量为10～20mg/ml，再稀释至纳米纤维素含量为0.5～8mg/ml用于步骤(2)；其中，2,2,6,6-四甲基哌啶-氮-氧化物和溴化钠的添加量分别为纤维素质量的1～2％、5～15％。
7.根据权利要求5所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，纳米纤维素溶液中纳米纤维素含量为0.5～8mg/ml，脂质体溶液的岩藻黄质含量为0.2～0.4mg/ml，所述脂质体溶液与纳米纤维素溶液的体积比为(0.5～1.5)：1；搅拌转速为500～1500rpm，搅拌时间为1～20min。
8.根据权利要求5所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，静置采用常温静置5～30min，冷藏温度为0～6℃。
9.权利要求5制备的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体，其特征在于，步骤(2)制备的纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体为溶液状态，其中纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体的固含量为1.5～5.5mg/ml，粒径为230～250nm，Zeta电位为-54.8～-70.4mV，岩藻黄质的平均包封率在80％以上。
10.权利要求5制备的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体，其特征在于，步骤(2)制备的纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体为溶液状态，经干燥后，得到纳米纤维素修饰的岩藻黄质脂质体纳米颗粒，纳米颗粒的粒径为230～250nm。
...【技术特征摘要】
1.一种基于纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，是以岩藻黄质为芯材，负载于脂质体中，得到载岩藻黄质脂质体；然后采用纳米纤维素对所述载岩藻黄质脂质体进行表面修饰，得到基于纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体；其中所述脂质体是由胆固醇和卵磷脂组成的混合脂质。
2.根据权利要求1所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，所述脂质体是由胆固醇和卵磷脂按质量比0.1:1～0.5:1构成。
3.根据权利要求1所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，所述岩藻黄质与混合脂质的质量比为0.1:1～0.4:1。
4.根据权利要求1～3任一项所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，搅拌转速为300～1000rpm，搅拌时间为1～15min；所述岩藻黄质在无水乙醇中的含量为0.1～1.5mg/ml，岩藻黄质与混合脂质的质量比为0.1:1～0.4:1；所述磷酸钾缓冲溶液ph为6～10。
6.根据权利要求4所述的纳米纤维素修饰的载岩藻黄质脂质体的制备方法，其特征在于，所述纳米纤维素溶液的制备方法如下：将纤维素配制成浓度0.5～1.5％的纤维素水溶液，加入2,2,6,6-四甲基哌啶-氮-氧化物和溴化钠搅拌均匀后，用naoh溶液调节体系的ph为9.5～10.5，接着用naclo溶液将体系ph调节至10.0～10.5，再用1m naoh溶液调节p...
【专利技术属性】
技术研发人员：栾倩，蔡路昀，徐淑怡，田方，徐冉，
申请(专利权)人：浙江大学宁波五位一体校区教育发展中心，
类型：发明
国别省市：
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