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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物,具体涉及一种用于检测铜绿假单胞菌的引物组及方法。
技术介绍
1、重症监护病房(icu)多集中了全院危、重症患者,患者普遍存在自身免疫力低下、抵抗力差、接受侵入性诊疗多、监护措施多、使用广谱抗生素量大、时间长等特点,其院内感染率也远较普通病区高。因此准确、快捷地确认与检测患者感染的病原体,对感染性疾病的治疗和预后有重要意义。
2、铜绿假单胞菌是一种环境中普遍存在的革兰氏阴性菌,它在正常人群中很难引起感染疾病。但对于icu中免疫力低下的患者,可引起严重的肺部感染,是医院获得性感染的常见病原体之一。因此寻找一种简单快速铜绿假单胞菌检测方法对提高临床检测效率,灵敏、快速地鉴定icu患者感染病原体有重要意义,对icu患者感染的早期诊治、防治并发症和患者预后评估也有重要价值。
3、目前,临床针对icu病人感染病原体的检测方法一般为病原微生物培养,ngs二代测序检测等。这些方法要么检测时间长,要么价格昂贵,无法满足icu感染检测需要的精准快速的要求。
技术实现思路
1、鉴于以上所述现有技术的缺点,本专利技术的目的是提供一种用于检测铜绿假单胞菌的引物组及方法。
2、本专利技术一方面提供了一种用于检测铜绿假单胞菌的引物组,其特征在于,所述引物组包含引物的核苷酸序列如下所示:
3、seq id no.1:5’-tctgcgtgcgatcacca-3’;
4、seq id no.2:5’-acgacgctcgcccaga-3
5、seq id no.3:
6、5’-cgtgtacgtccagagcgcgttttcttcgagtacgacagctccg-3’;
7、seq id no.4:
8、5’-cgaaagacctgaaaggcagcggttttccatattgtactcgcgggtg-3’;
9、seq id no.5:5’-ggcttccggcttcaggt-3’;
10、seq id no.6:5’-cgtagtgctggaaggccaca-3’。
11、其中,正向外引物f3,其核苷酸序列如seq id no.1所示;反向外引物b3,其核苷酸序列如seq id no.2所示;正向内引物fip,其核苷酸序列如seq id no.3所示;反向内引物bip,其核苷酸序列如seq id no.4所示,环引物lb,其核苷酸序列如seq id no.5所示,环引物lf,其核苷酸序列如seq id no.6所示。
12、具体的,本专利技术还提供上述引物组的应用,上述引物组可以应用于制备铜绿假单胞菌试剂盒中,或者,利用所述的引物组检测铜绿假单胞菌中的应用,利用上述引物组在检测铜绿假单胞菌的微流控芯片中的应用,尤其是利用环介导等温扩增-光谱传感器-人工智能技术平台检测铜绿假单胞菌。
13、又一方面,本专利技术还提供了一种铜绿假单胞菌的检测方法,包括:利用lamp检测技术结合如上所述的引物组对待测样本进行环介导等温扩增;对扩增产物进行分析。
14、进一步的,所述环介导等温扩增的反应温度为65℃,反应时间为25~30分钟。
15、进一步的,所述环介导等温扩增的反应在微流控芯片中进行。
16、进一步的,所述对扩增产物进行分析的方法包括对lamp反应结果进行光谱分析和/或显色分析。
17、本专利技术的有益效果是,本专利技术利用lamp技术结合本专利技术提供的用于检测铜绿假单胞菌的引物组检测铜绿假单胞菌,其具有不输于qpcr的高精确度,且检测迅速,从采样到出结果仅需1小时,而且不需要复杂专业的操作即可满足对铜绿假单胞菌的即时检测。
18、本专利技术的其他特征和优点将在随后的说明书中阐述,并且,部分地从说明书中变得显而易见,或者通过实施本专利技术而了解。本专利技术的目的和其他优点在说明书以及附图中所特别指出的结构来实现和获得。
19、为使本专利技术的上述目的、特征和优点能更明显易懂,下文特举较佳实施例,并配合所附附图,作详细说明如下。
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1.一种用于检测铜绿假单胞菌的引物组,其特征在于,所述引物组包含引物的核苷酸序列如下所示:
2.根据权利要求1所述的引物组在制备铜绿假单胞菌试剂盒中的应用。
3.根据权利要求1所述的引物组在检测铜绿假单胞菌中的应用。
4.根据权利要求1所述的引物组在检测铜绿假单胞菌的微流控芯片中的应用。
5.一种铜绿假单胞菌的检测方法,其特征在于,包括:
6.根据权利要求5所述的铜绿假单胞菌的检测方法,其特征在于,
7.根据权利要求6所述的铜绿假单胞菌的检测方法,其特征在于,
8.根据权利要求5所述的铜绿假单胞菌的检测方法,其特征在于,
【技术特征摘要】
1.一种用于检测铜绿假单胞菌的引物组,其特征在于,所述引物组包含引物的核苷酸序列如下所示:
2.根据权利要求1所述的引物组在制备铜绿假单胞菌试剂盒中的应用。
3.根据权利要求1所述的引物组在检测铜绿假单胞菌中的应用。
4.根据权利要求1所述的引物组在检测铜绿假单胞菌的微...
【专利技术属性】
技术研发人员:关国良,陈巧玲,彭迪,
申请(专利权)人:常州先趋医疗科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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