【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学成分分析，具体涉及八味齐薷散中多成分的分析方法。
技术介绍
1、藏药作为中国传统医学的重要组成部分，以其独特的用药和药物来源而备受瞩目。藏药的应用范围广泛，其疗效在临床实践中得到了广泛的认可和应用。八味齐薷散作为藏药之一，是历代医家对方剂理论及其临床应用的成果。本方由黄花香薷、酸藤果、香茶菜、垂果蒜芥、西藏凹乳芹、灰灰菜、裂叶独活、人工麝香八味药组成；具有祛风燥湿、杀菌止痒、清热解毒、散寒消肿、舒筋活络、行气止痛、清利湿热的功效，用于治疗妇科症、肛周炎、痔疮等各类炎症。其中，黄花香薷有防生虫、治肛门发炎等功效，用于湿滞痞满食少，腹痛吐泻，虫积，疥癣湿痒，阴道滴虫。酸藤果用于杀虫，提升胃温，主治绦虫病，浮肿。《甘露本草明镜》记载药方中香茶菜功效为消炎止痛、杀虫，主治沙眼、结膜炎等眼病，以及寄生虫引起的胃肠绞痛；垂果蒜芥功效为消肿，治乳房肿胀、炭疽。
2、现阶段，关于八味齐薷散的药理药效学研究暂处于空白阶段，只有小区域、小规模临床用药研究，并未有进行具体药效学方面的研究。然而，对此类藏医临床用药多、效果好的方剂进行具体药效学研究是尤为重要而紧迫的。因此，进一步探究八味齐薷散的主要化学成分，对其药效物质进行阐明和作用机制进行研究非常重要。
技术实现思路
1、本专利技术的专利技术目的在于：针对上述存在的问题，提供八味齐薷散中多成分的分析方法，本专利技术采用利用三重四极杆飞行时间高分辨质谱（uplc-q-tof-ms）对八味齐薷散中的化学成分进行分析鉴定，为进一
2、为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、八味齐薷散中多成分的分析方法，包括以下步骤：
4、s1.制备供试样品溶液：取八味齐薷散样品，采用甲醇溶液提取其活性成分，提取时料液比为0.2g：5ml，提取液离心取上清液，过膜，得到供试样品溶液；
5、s2.将所述供试样品溶液采用三重四极杆飞行时间高分辨质谱进行检测分析，检测条件包括：
6、色谱条件：色谱柱为c18，规格为2.1mm×100mm，1.7μm；柱温为45℃；流速为0.4ml/min；进样量为4μl；流动相采用乙腈-0.1%甲酸水溶液的梯度洗脱程序，具体为：0~0.01min，5%b；0.01~15min，5%~30%b；15~35min，30%~95%b；35~37min，95%b；37~37.1min，95%~5%b；37.1~40min，5%~0b；以上浓度均为体积百分数；
7、质谱条件：一级质谱扫描，离子化模式为电喷雾正离子模式，离子源电压为5500v，离子源温度为500℃，去簇电压为100v，碰撞能量为35ev，碰撞能量扩展为15ev；雾化气体为氮气，辅助气1为50psi，辅助气2为50psi，气帘气为40psi；一级质谱母离子扫描范围为 50～1000，ida设置响应值超过100cps的6个最高峰进行二级质谱扫描；子离子扫描范围为50～1000，开启动态背景扣除dbs，离子化模式为电喷雾负离子模式，离子源电压为-4500v，离子源温度为500℃，去簇电压为100v，碰撞能量为-35ev，碰撞能量扩展为15ev；雾化气体为氮气，辅助气1为50psi，辅助气2为50 psi，气帘气为40 psi；
8、s3.对质谱采集的数据进行分析，从而对八味齐薷散的成分进行分析鉴定。
9、本专利技术中，优选地，步骤s1中采用体积浓度为50%的甲醇溶液进行提取。
10、本专利技术中，优选地，步骤s1中采用超声提取的方式进行提取，提取时间45分钟。
11、本专利技术中，优选地，步骤s1中的离心为于13000rpm离心10min。
12、本专利技术中，优选地，步骤s3中所述的分析鉴定方法为：首先，查阅文献获得关于八味齐薷散化学成分的数据，将关于化学成分的化合物名称、分子式、相对分子量及碎片信息输入shortcut to peakview软件以建立筛查数据库；其次，将质谱采集的数据导入shortcut to peakview软件进行自动筛查匹配；最后，结合相关文献对化合物的精确质量数和质谱裂解碎片及特征碎片离子进行结构推断，确定最终筛选结果。
13、由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
14、本专利技术首次通过uplc-q-tof-ms法来对八味齐薷散进行初步化学成分活性分析，通过对有效成分的提取条件、色谱条件和质谱条件进行优化，在正负离子模式下建立了一种高效分离多种有效成分的方法，并通过与数据库的活性匹配，定性分析样品的中药化学活性成分，共鉴定出89种中药活性成分，并对89种活性成分的药物来源进行归属。本专利技术使用 uplc-q-tof-ms技术，系统、准确地对八味齐薷散中的化学成分进行表征，为进一步开展该方的药代动力学和药效物质基础研究提供了数据支持，为临床应用奠定了理论基础。
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1.八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤S1中采用体积浓度为50%的甲醇溶液进行提取。
3.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤S1中采用超声提取的方式进行提取，提取时间45分钟。
4.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤S1中的离心为于13000rpm离心10min。
5.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤S3中所述的分析鉴定方法为：首先，查阅文献获得关于八味齐薷散化学成分的数据，将关于化学成分的化合物名称、分子式、相对分子量及碎片信息输入Shortcut to PeakView软件以建立筛查数据库；其次，将质谱采集的数据导入Shortcut to PeakView软件进行自动筛查匹配；最后，结合相关文献对化合物的精确质量数和质谱裂解碎片及特征碎片离子进行结构推断，确定最终筛选结果。
【技术特征摘要】
1.八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤s1中采用体积浓度为50%的甲醇溶液进行提取。
3.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤s1中采用超声提取的方式进行提取，提取时间45分钟。
4.根据权利要求1所述的八味齐薷散中多成分的分析方法，其特征在于：步骤s1中的离心为于13000rpm离心10min。
【专利技术属性】
技术研发人员：严志宏，陈扬，王瑞儒，陈仪晶，蔡瑛，杨雅雯，张臣，
申请(专利权)人：江西中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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