【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于播种技术及微生物制剂，主要涉及一种生防微生物种衣剂及其制备方法与应用。
技术介绍
1、随着现代农业的发展，利用生防微生物进行包衣已逐渐成为国内外重要的病害防治策略。与化学防治相比，该技术具有绿色环保，高效价廉的优势，其关键在于生防微生物的开发与应用。虽然越来越多的功能微生物被发掘出来，但真正能形成商业化产品的菌株却很少，其中一个主要原因就是生防菌种衣剂稳定性差，主要表现为货架期短、加工过程容易造成菌体死亡或者活性降低。
2、将生防微生物进行包埋再进行包衣处理是目前提高微生物包衣性能的有效策略，即利用物理或者化学方法将微生物细胞包埋在有机高分子聚合物的凝胶或微囊中，从而降低环境因素对微生物活性造成的影响，可极大提高功能微生物在包衣过程和贮存过程的存活率，延长货架期，并可通过调整壁材的性能达到控制释放的效果。
3、目前应用较多的包埋材料主要包括合成高分子材料以及天然高分子材料。其中化学合成的高分子材料性能可控，能较大程度的满足生防菌对载体功能需求，但普遍存在制备工艺严格，成本较高的问题。与合成材料相比，大多数天然来源的高分子材料具有生态友好，可生物降解等特点，如木质素类，淀粉，海藻酸钠，壳聚糖及其衍生材料等都受到了广泛的关注，并且发展了对应的药物装载方法，包括复凝聚法，喷雾干燥法，溶剂蒸发法等，然而大多数工艺较为复杂或存在适用范围有限等问题。因此，发展新颖的良好的生物相容性的包埋材料以及简洁的制备工艺成为了该领域的研究热点。
4、近年来，植物花粉微凝胶作为一种新型的生物质材料，以其独
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种生防微生物种衣剂，其利用花粉微凝胶作为微生物载体及成膜剂，所得种衣剂有利于提高生防微生物的贮存稳定性，且所用原料来源广泛，绿色环保，制备工艺简单，在微生物种衣剂开发领域具有较大的应用前景。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种生防微生物种衣剂，包括如下组成：生防微生物及其载体；所述载体为花粉微凝胶。
4、所述花粉微凝胶是由天然花粉制得。所述天然花粉为油菜花粉、向日葵花粉、蒲公英花粉、茶花花粉和松花粉中的一种或多种，优选为茶花花粉。
5、所述生防微生物为枯草芽胞杆菌、多粘类芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌或蜡质芽孢杆菌中的一种或多种。示例性地，所述生防微生物为枯草芽胞杆菌zf71（ bacillus subtilis zf71）。
6、所述生防微生物种衣剂中，所述生防微生物的含量为107-1011cfu/g。
7、第二方面，本专利技术进一步提供所述生防微生物种衣剂的制备方法，包括如下步骤：
8、s1、将天然花粉脱脂，碱处理，得到花粉微凝胶；
9、s2、将所述花粉微凝胶加入含有生防微生物的菌悬液中分散，涡旋处理，孵育，得到负载生防微生物的种衣剂。
10、步骤s1中，所述脱脂使用的有机溶剂为丙酮、乙酸乙酯、乙醇和甲醇中的一种或多种，优选为丙酮。
11、所述有机溶剂的体积浓度范围为80-100%，优选为100%。
12、所述天然花粉与所述有机溶剂的比例为：1 g：8-50 ml；优选为1 g：10 ml。
13、所述脱脂的条件为：30-80 ℃下搅拌1-3h，优选为50℃下搅拌1h，搅拌速度为100-1000转/分钟，优选为800转/分钟。
14、所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化钙中的一种或多种，优选为氢氧化钠。
15、所述碱处理使用的碱液的浓度为1（w/v）%-15（w/v）%，优选为10（w/v）%。
16、所述脱脂花粉与所述碱液的比例为：1g：5-20 ml。
17、所述碱处理的条件为：60-90 ℃下搅拌3-5h，优选为80℃下搅拌3h。
18、所述花粉微凝胶的ph为7-7.5。
19、步骤s2中，所述菌悬液是由生防微生物加入液体培养基中培养形成的；其中：
20、所述液体培养基由如下重量百分比组分组成：酵母提取物0.1-0.8％，胰蛋白胨0.5-2％，葡萄糖0.2-0.5％，氯化钠0.5 -1.5％，ph 7.2-7.5，余量为水。
21、所述培养的时间为10-36h，优选为20h。
22、所述菌悬液的浓度范围为1亿-1000亿cfu/g，优选为1000亿cfu/g。
23、所述花粉微凝胶与所述菌悬液的质量比为1 g：10-50 g，优选为1 g：40 g。
24、所述涡旋处理的条件为：速度为1000-3000转/min，优选为2000转/min，时间为10-30min，优选为10min。
25、所述孵育的条件为：温度为20-30℃，时间为5-48h，优选为12-24h。
26、步骤s2中，将完成孵育的菌悬液过滤、洗涤，加入助剂，得到生防微生物种衣剂。
27、第三方面，本专利技术进一步提供一种包衣种子，包括如下组成：种子和所述生防微生物种衣剂。
28、所述生防微生物种衣剂和所述种子的质量比为1:5-1:200，优选为1:5。
29、所述包衣种子的制备方法，包括如下步骤：将所述生防微生物种衣剂加入水中，得到分散液；将种子浸入所述分散液中，晾干，得到所述包衣种子。
30、本专利技术取得的有益效果如下：
31、1、本专利技术首次将植物花粉微凝胶作为微生物种衣剂的载体及成膜剂，既可以促进生防菌在微凝胶表面形成生物膜，增强生防菌抗逆能力，提高种衣剂贮存稳定性，又可以利用微凝胶的成膜特性将装载微生物的花粉微凝胶包裹于种子表面，无需使用合成的高分子成膜剂，所用原料来源广泛且绿色环保，是一种绿色环保的微生物种子包衣技术。
32、2、本专利技术巧妙的利用了芽孢杆菌趋向于在花粉微凝胶表面形成生物膜的特点，通过简单的孵育就可以有效的对生防菌进行装载，与喷雾干燥，复凝聚法等常见的生防菌包埋技术相比，工艺简单，制备条件温和。
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1.一种生防微生物种衣剂，包括如下组成：生防微生物及其载体；所述载体为花粉微凝胶。
2.根据权利要求1所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述花粉微凝胶由天然花粉制得。
3.根据权利要求2所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述天然花粉为油菜花粉、向日葵花粉、蒲公英花粉、茶花花粉和松花粉中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述生防微生物为枯草芽胞杆菌、多粘类芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌或蜡质芽孢杆菌中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述生防微生物种衣剂中，所述生防微生物的含量为107-1011CFU/g。
6.权利要求1-5任一项所述的生防微生物种衣剂的制备方法，包括如下步骤：
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述脱脂使用的有机溶剂为丙酮、乙酸乙酯、乙醇和甲醇中的一种或多种；
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化钙中的一种或多种；
9.
10.一种包衣种子，包括如下组成：种子和权利要求1-5任一项所述生防微生物种衣剂。
...【技术特征摘要】
1.一种生防微生物种衣剂，包括如下组成：生防微生物及其载体；所述载体为花粉微凝胶。
2.根据权利要求1所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述花粉微凝胶由天然花粉制得。
3.根据权利要求2所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述天然花粉为油菜花粉、向日葵花粉、蒲公英花粉、茶花花粉和松花粉中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述生防微生物为枯草芽胞杆菌、多粘类芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌或蜡质芽孢杆菌中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的生防微生物种衣剂，其特征在于：所述生防微生物种衣剂中，所述生防微生物的含量...
【专利技术属性】
技术研发人员：范腾飞，李宝聚，项盛，栾雨阳，石延霞，谢学文，柴阿丽，李磊，
申请(专利权)人：三亚中国农业科学院国家南繁研究院，
类型：发明
国别省市：
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