【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于提取物，涉及生漆提取部位、乙醇馏分、漆酚单体及其应用。
技术介绍
1、三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,tnbc)是乳腺癌中最具侵袭性的亚型，约占所有乳腺癌病例的15％～20％，与其他亚型相比，tnbc的临床表现特点为肿瘤直径更大、恶性程度更高，且侵袭性强、预后差，早期患者在三年内复发率很高，五年内总生存率甚至低于70％，防控形势十分严峻。
2、目前临床上主要采用化疗药物对tnbc患者进行治疗，国际指南推荐的一线治疗药物为单药紫杉醇类或蒽环类药物，但由于tnbc独特的生物学特性，化疗并不能有效清除肿瘤，反而会给患者带来严重不良反应，再加之其对化疗药物的耐药性、极强的侵袭性和转移倾向，使得三阴性乳腺癌患者的生存率要远低于普通的乳腺癌患者。因此面对临床上治疗tnbc的窘境，寻找新型的抗tnbc药物已是迫在眉睫。
3、天然产物是抗肿瘤药物的重要来源,目前使用的抗肿瘤药物中约有50％直接或间接来源于天然产物,包括生物碱、皂苷、多酚、二萜等多种化合物类型。生漆，又名大漆、土漆、是一种采割自漆树的天然树脂，是我国重要的林木资源，世界上85％的生漆产自中国，但同时生漆也是我国常见的中草药之一，生漆的炮制品干漆可以直接入药。如：化症回生丹、妇科通经丸、韭子丸，大黄蛰虫丸等许多传统中药都引入了干漆这一成分。生漆的主要化学成分是漆酚(40％～80％)、漆多糖(5％～7％)、漆酶(<1％)和水分(20％～30％)，其中漆酚是一种邻苯二酚结构的烃基酚类化合物，其侧链为不
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种生漆提取部位、乙醇馏分、漆酚单体及其应用。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案如下：
3、一种生漆提取部位，其制备方法包括：将生漆与溶剂混合、超声5-10min过滤，得到滤液和滤渣；在滤渣中加入同一种溶剂超声、过滤，重复操作，直至滤液呈无色；合并滤液并减压蒸馏，得到提取部位。
4、在其中的一个优选的实施例中，所述溶剂为无水乙醇、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、石油醚中的一种。
5、在其中的一个优选的实施例中，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆35-45重量份，迅速加入无水乙醇350-450份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用无水乙醇提取滤渣，往滤渣中加入350-450份无水乙醇，超声提取5-10min、过滤；重复此操作3～5次，直至滤液呈无色；合并滤液减压蒸馏，得到生漆的乙醇提取部位。
6、在其中的一个优选的实施例中，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆45-55重量份，迅速加入乙酸乙酯450-550份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用乙酸乙酯提取滤渣，往滤渣中加入450-550份乙酸乙酯，超声提取5-10min、过滤；重复此操作5～7次，直至滤液呈无色；合并滤液减压蒸馏，得到生漆的乙酸乙酯提取部位。
7、在其中的一个优选的实施例中，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆10-20重量份，迅速加入甲醇200-400份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用甲醇提取滤渣，往滤渣中加入100-200份甲醇，超声提取5-10min、过滤；合并滤液减压蒸馏，得到生漆的甲醇提取部位。
8、在其中的一个优选的实施例中，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆10-20重量份，迅速加入二氯甲烷200-400份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用二氯甲烷提取滤渣，往滤渣中加入100-200份二氯甲烷，超声提取5-10min、过滤；合并滤液减压蒸馏，得到生漆的二氯甲烷提取部位。
9、在其中的一个优选的实施例中，所述生漆提取部位的制备方法包括：所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆10-20重量份，迅速加入石油醚200-400份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用石油醚提取滤渣，往滤渣中加入100-200份石油醚，超声提取5-10min、过滤；合并滤液减压蒸馏，得到生漆的石油醚提取部位。
10、生漆提取部位采用不同的溶剂分离的是不同的成分，其溶剂提取的时间、温度和提取次数对其中的组分影响较大，对药效有明显的影响。
11、本专利技术优选以上药效较佳的提取方法。
12、本专利技术还要求保护乙醇馏分，其制备方法包括：用硅胶柱层析对生漆的乙醇提取物进行分离，并采用薄层色谱法实时检测洗脱情况，以石油醚-乙酸乙酯(20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1)和甲醇作为洗脱剂，每个梯度洗脱3～5个柱体积，直至使用薄层色谱分析时已无明显斑点出现，合并类似的组分，得到sq-1到sq-7，共7个馏分。
13、在其中的一个优选的实施例中，硅胶柱层析中的硅胶的目数为300～400目。
14、本专利技术还要求保护漆酚单体，其结构式如下：
15、
16、本专利技术还要求保护所述漆酚单体的制备方法，包括：
17、s1、对sq-3进行层析、洗脱，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(5:1、2:1、1:1、0:1)和二氯甲烷-甲醇(100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、2:1、0:1)，每个梯度洗脱3～5个柱体积，直至使用薄层色谱分析时已无明显斑点出现，合并类似的组分，得到3个馏分sq-3-1～sq-3-3；
18、s2、对sq-3-1进行层析，采用甲醇-水(60％、70％、80％、90％、纯甲醇)、甲醇-丙酮(10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、1:1、0:1)作为洗脱剂，每个梯度洗脱3～5个柱体积，合并类似的组分，得到8个馏分sq-3-1-1至sq-3-1-8；
19、s3、将sq-3-1-1进行柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇50:1进行洗脱，结合半制备型hplc的纯化，得到compound 1；
20、s4、将sq-3-1-4使用凝胶进行层析，用二氯甲烷-甲醇50:1进行洗脱，得到2个馏分sq-3-1-4-1和sq-3-1-4-2；
21、s5、sq-3-1-4-2通过半制备型hplc的纯化，得到compound 2和compound 3；
22、s6、sq-5通过半制备型hplc的纯化，得到compound 4。
23、在其中的一个优选的实施例中，采用填充100～200目聚酰胺的聚酰胺柱层析柱对sq-3进行层析。
24、在其中的一个优选的实施例中，采用200～300目的反相c18硅胶柱层析对sq-3-1进行层析。
25、在其中的一个优选的实施例中，采用sephadex lh-20凝胶作为填料对sq-3-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种生漆提取部位，其特征在于，其制备方法包括：将生漆与溶剂混合、超声5-10min过滤，得到滤液和滤渣；在滤渣中加入同一种溶剂超声、过滤，重复操作，直至滤液呈无色；合并滤液并减压蒸馏，得到提取部位；所述溶剂为无水乙醇、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、石油醚中的一种。
2.根据权利要求1所述的生漆提取部位，其特征在于，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆35-45重量份，迅速加入无水乙醇350-450份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用无水乙醇提取滤渣，往滤渣中加入350-450份无水乙醇，超声提取5-10min、过滤；重复此操作3～5次，
3.根据权利要求1所述的生漆提取部位，其特征在于，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆45-55重量份，迅速加入乙酸乙酯450-550份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用乙酸乙酯提取滤渣，往滤渣中加入450-550份乙酸乙酯，超声提取5-10min、过滤；重复此操作5～7次，
4.一种乙醇馏分，其特征在于，其制备方法包括：用硅胶柱层析对生漆的乙醇提
5.一种漆酚单体，其特征在于，其结构式如下：
6.根据权利要求5所述的漆酚单体的制备方法，其特征在于，包括：
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，采用填充100～200目聚酰胺的聚酰胺柱层析柱对SQ-3进行层析；采用200～300目的反相C18硅胶柱层析对SQ-3-1进行层析；采用Sephadex LH-20凝胶作为填料对SQ-3-1-1进行柱层析分离。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中的半制备型HPLC采用的溶剂为ACN体积浓度为60％至70％的乙腈-水混合溶液，梯度洗脱20min；步骤S5中的半制备型HPLC采用的溶剂为ACN体积浓度为65％至80％的乙腈-水混合溶液，梯度洗脱30min；步骤S6中的半制备型HPLC采用的溶剂为ACN体积浓度为60％至70％的乙腈-水混合溶液，梯度洗脱20min。
9.根据权利要求1或2所述的提取部位、权利要求4所述的乙醇馏分和权利要求5所述的漆酚单体在制备抗肿瘤药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括：肝癌MOLM13细胞、三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞、三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞、乳腺癌MCF-7细胞、肝癌Huh7细胞、肺癌NCl-H358细胞、结肠癌HCT116细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌HCC-1806细胞、肝癌SMMC-7721细胞、白血病MOLM-13细胞。
...【技术特征摘要】
1.一种生漆提取部位，其特征在于，其制备方法包括：将生漆与溶剂混合、超声5-10min过滤，得到滤液和滤渣；在滤渣中加入同一种溶剂超声、过滤，重复操作，直至滤液呈无色；合并滤液并减压蒸馏，得到提取部位；所述溶剂为无水乙醇、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、石油醚中的一种。
2.根据权利要求1所述的生漆提取部位，其特征在于，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆35-45重量份，迅速加入无水乙醇350-450份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用无水乙醇提取滤渣，往滤渣中加入350-450份无水乙醇，超声提取5-10min、过滤；重复此操作3～5次，
3.根据权利要求1所述的生漆提取部位，其特征在于，所述生漆提取部位的制备方法包括：取生漆45-55重量份，迅速加入乙酸乙酯450-550份，充分搅拌，超声提取5-10min，过滤、得到滤液和滤渣；继续用乙酸乙酯提取滤渣，往滤渣中加入450-550份乙酸乙酯，超声提取5-10min、过滤；重复此操作5～7次，
4.一种乙醇馏分，其特征在于，其制备方法包括：用硅胶柱层析对生漆的乙醇提取物进行分离，并采用薄层色谱法实时检测洗脱情况，以石油醚-乙酸乙酯(20:
5.一种漆酚单体，其特征在于，其结构式如下：
6.根据权利要求5所述的漆酚单体的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：王毅清，谭桂山，邹振兴，宋鸿哲，
申请(专利权)人：湖南中嘉生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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