【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学检验领域，具体而言，本专利技术涉及一种基于磁性吸附剂提取的脂溶性维生素物质的提取方法。
技术介绍
1、维生素参与人体的正常新陈代谢，是生物生长和代谢所必需的微量营养物质之一，可分为脂溶性和水溶性维生素两大类，其中脂溶性维生素包括维生素a、d、e、k。维生素a(视黄醇)是维持人体正常视觉功能不可缺少的营养素，对人体生长发育、维持正常身体机能、抵抗疾病等有重要作用，维生素e又叫生育酚，在抗氧化、抗自由基、提高免疫功能抗衰老、抗癌变等过程中发挥重要作用,维生素k主要参与机体的凝血因子合成和骨骼中钙磷代谢，具有增强骨矿化作用。
2、现有技术中的脂溶性维生素的检测方法，大多仅检测4种物质(a、d3、d2、e)，且需要借用外部磁场将磁性固相萃取填料进行转移，此过程操作复杂，且不利于实现自动化，该方法对维生素a的检测灵敏度不高且无法对维生素k1进行检测；或是样本需要先经过蛋白沉淀、然后进行液液萃取后进行检测，前处理操作简单，但需要在ep管中进行，需要大量的高速涡旋振荡并配合离心工作，导致操作时间随之增加并且需要大量人工操作，不利于处理自动化，且需要用到大量挥发性强的试剂，对实验人员存在健康隐患；或是采用脂溶性维生素检测的试剂盒但也需要借用外部磁场将磁性固相萃取填料进行转移，此过程操作复杂且不利于实现自动化，且其前处理全过程中未加抗氧化剂，对于不稳定的脂溶性维生素(尤其是维生素a和k1)易造成降解，导致检测结果与实际结果不一致。
3、因此，提供一种操作简单且稳定的脂溶性维生素的提取方法一直是本领域研究人
技术实现思路
1、本专利技术旨在解决上述技术问题的至少之一。
2、为此，本专利技术的目的在于提供一种基于磁性吸附剂提取的脂溶性维生素物质的提取方法。
3、为实现本专利技术的目的，本专利技术提供一种基于磁性吸附剂的脂溶性维生素物质的提取方法，包括：
4、s100、制备样品试剂：将待测样品加入同位素内标溶液混匀，得到样品溶液；
5、s200、活化磁性吸附剂制备：将亲水亲脂平衡吸附剂活化后加入平衡液，振荡后制得活化磁性吸附剂；
6、s300、待测物质提取：将活化磁性吸附剂加入样品溶液，经淋洗、洗脱后得到待测溶液；将所述待测溶液进行氮吹浓缩，再加入有机溶剂复溶，得到脂溶性维生素物质。
7、其中，待测样品与内标溶液的体积比为1：(1-1.5)。
8、本专利技术通过在待测样品中加入同位素内标溶液，通过磁性亲水亲脂平衡吸附剂对待测样品中的脂溶性维生素进行提取，磁性亲水亲脂平衡吸附剂快速的提取待测样品中的脂溶性维生素，并提高其稳定性，为脂溶性维生素的快速提取和检测提供实验方案，实现对目标物的富集和提取，无需离心或过滤，可以快速实现脂溶性维生素物质维生素a、维生素d、维生素e和维生素k1的提取，使提取过程可以在15min内完成，提取效率高，且采用本专利技术的提取方法在处理过程中样本不会降解，不会影响检测；待测样品与内标溶液的体积比为1：(1-1.5)，内标溶液的用量适宜，能够很好地提取样品溶液中极性较小的维生素e和维生素k1且不影响极性相对较大的维生素a和维生素d的提取，并且此时提取的脂溶性维生素在后续检测中的信号响应结果最佳，适用于临床检测能够满足需求。
9、另外，本专利技术上述实施例提供的技术方案还可以具有如下技术特征：
10、上述技术方案中，该提取方法包括：
11、s100、制备样品溶液：将待测样品加入同位素内标溶液混匀，得到样品溶液；
12、s200、活化磁性吸附剂制备：将亲水亲脂平衡吸附剂活化后加入平衡液，振荡后制得活化磁性吸附剂；
13、s300、待测物质提取：将活化磁性吸附剂加入样品溶液，经淋洗、洗脱后得到待测溶液；将所述待测溶液进行氮吹浓缩，再加入有机溶剂复溶，得到脂溶性维生素物质。
14、其中，待测样品与内标溶液的体积比为1：1。
15、当待测样品与内标溶液的体积比为1：1时，对提取后的待测物质进行检测分析时信号响应效果佳，尤其是信号响应最低的维生素k1在此时的信号响应效果好，且各种脂溶性维生素的提取效果也较优，可以满足临床检测的要求，且实验效果最优。
16、上述任一技术方案中，s100中，内标溶液的溶剂为含2，6-二叔丁基对甲酚的乙腈溶液；和/或2，6-二叔丁基对甲酚的浓度为0.1-1.0mg/ml。
17、2，6-二叔丁基对甲酚为抗氧剂，避免了样本在等待和提取过程的降解，提高了提取效率且不会影响检测；采用上述浓度的2，6-二叔丁基对甲酚能达到较好的抗氧效果；采用乙腈作为内标溶剂，可以对待测样品的脂溶性维生素中含量较少的维生素k1进行检测。
18、上述任一技术方案中，s200包括：
19、s210、将亲水亲脂平衡吸附剂加入磁珠活化液，振荡后制成悬浮液，在悬浮液中加入有机试剂活化；
20、s220、加入平衡液，振荡后制得活化磁性吸附剂。
21、在亲水亲脂平衡吸附剂加入磁珠活化液振荡后再加入有机试剂和平衡液，磁珠活化液可以1h内亲水亲脂平衡吸附剂不沉降，使其保持在均匀的悬浮状态，使活化磁性吸附剂的加入量可以较为准确。
22、上述任一技术方案中，亲水亲脂平衡吸附剂包括hlb磁珠；和/或有机试剂包括乙醇、甲醇中的至少一种，平衡液为甲醇水溶液；和/或平衡液为甲醇体积分数占5％-80％的甲醇水溶液；和/或悬浮液、有机试剂与平衡液的体积比为1：(5-20)：(5-20)。
23、hlb磁珠的吸附效果好，少量的hlb磁珠即可在较短的时间里实现对脂溶性维生素的吸附提取；采用乙醇或甲醇进行活化可以提高亲水亲脂平衡吸附剂得反应性，以提高其对脂溶性维生素的吸附从而提高提取效率；采用上述体积分数的甲醇水溶液做平衡液以及上述比例的悬浮液、有机试剂与平衡液制成的活化磁性吸附剂较好，有利于后续脂溶性维生素的提取。
24、上述任一技术方案中，s210中振荡时间均为5s-20s；和/或s220中振荡时间均为5s-20s。
25、采用上述振荡时间可以获得较好的振荡效果，使最终制得的活化磁性吸附剂具有较好的性能。
26、上述任一技术方案中，s300包括：
27、s310、在样品溶液加入活化磁性吸附剂，振荡；
28、s320、将s310中的固相活化磁性吸附剂转移至淋洗液中，振荡；
29、s330、将s320中的固相活化磁性吸附剂转移至洗脱液中，振荡，去除固相活化磁性吸附剂，得到待测溶液；
30、s340、将待测溶液进行氮吹浓缩，再加入有机溶剂复溶，得到脂溶性维生素物质。
31、将活化磁性吸附剂加入样品溶液中吸附样品溶液中的脂溶性维生素后进行淋洗，可以去除吸附于活化磁性吸附剂上的干扰物质，使后续检测结果更为准确；经过淋洗后的固性活化磁性吸附剂还需要进行洗脱，使吸附在活化磁性吸附剂上的脂溶性维本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于磁性吸附剂的脂溶性维生素物质的提取方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括：
3.根据权利要求1或2中任意一项所述的提取方法，其特征在于，所述S100中，
4.根据权利要求1或2中任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述S200包括：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，
7.根据权利要求1或2中任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述S300包括：
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，
10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，
【技术特征摘要】
1.一种基于磁性吸附剂的脂溶性维生素物质的提取方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括：
3.根据权利要求1或2中任意一项所述的提取方法，其特征在于，所述s100中，
4.根据权利要求1或2中任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述s200包括：
5.根据权利要求4...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹继华，沈敏，潘清清，杨晓东，李全乐，
申请(专利权)人：美康生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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