一种靶向白蜡窄吉丁26Sprot基因的dsRNA及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种靶向白蜡窄吉丁26Sprot基因的dsRNA及其制备方法和应用。本发明专利技术提供的dsRNA能高效沉默白蜡窄吉丁26Sprot基因，注射后第4天26Sprot基因的相对表达量降低了90.48％，随着时间的增加，dsRNA沉默效果持续存在，能够导致白蜡窄吉丁生长发育受到限制，影响成虫进一步活动和繁育，最终达到防治的效果，为绿色防治林业害虫提供了一个新的思路和技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物，特别是涉及一种靶向白蜡窄吉丁26sprot基因的dsrna及其制备方法和应用。

技术介绍

1、白蜡窄吉丁(emerald ash borer，eab，agrilus planipennis fairmaire)，又名梣小吉丁、花曲柳窄吉丁，属鞘翅目(coleoptera)吉丁甲科(buprestidae)窄吉丁属(agrilus)，危害木犀科(oleaceae)白蜡属(fraxinus)树木。主要危害引进的北美白蜡树种，如美国红梣(洋白蜡，fraxinus pennsylvanica marsh.)、毡毛梣(绒毛白蜡，f.velutina torr)与美国白蜡(f.americana linn.)等，已成为重要的国际检疫性蛀干害虫之一。因此，白蜡窄吉丁的防治受到了林业昆虫学家的关注。

2、白蜡窄吉丁是蛀干类害虫，幼虫取食隐蔽性强，很难用常规的杀虫剂触碰并杀灭，防治起来比较困难。目前针对白蜡窄吉丁的有效的防治方法也十分有限。rna干扰作为一种具有应用前景的新型害虫防治技术，在白蜡窄吉丁防控中具有较好的潜力。26s核糖体酶调本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种靶向白蜡窄吉丁26Sprot基因的dsRNA，其特征在于，所述dsRNA由第一RNA分子和第二RNA分子组成；所述第一RNA分子和第二RNA分子互补配对；所述第一RNA分子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.一种制备权利要求1所述dsRNA的引物组，其特征在于，所述引物组包括第一引物对和第二引物对；

3.权利要求1所述dsRNA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述第一PCR扩增和第二PCR扩增的反应程序均包括：94℃预变性3min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸1...

【技术特征摘要】

1.一种靶向白蜡窄吉丁26sprot基因的dsrna，其特征在于，所述dsrna由第一rna分子和第二rna分子组成；所述第一rna分子和第二rna分子互补配对；所述第一rna分子的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.一种制备权利要求1所述dsrna的引物组，其特征在于，所述引物组包括第一引物对和第二引物对；

3.权利要求1所述dsrna的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述第一pcr扩增和第二pcr扩增的反应程序均包括：94℃预变性3min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸10min。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张苏芳，樊智智，张荣，陈静，孔祥波，张真，刘福，方加兴，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所国家林业和草原局世界自然遗产保护研究中心，
类型：发明
国别省市：