【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，具体为一种人脐带间充质干细胞注射液的制备及应用。
技术介绍
1、2015年，美国有510万65岁以上的人被诊断患有阿尔兹海默病(alzheimer’sdisease,ad)，估计全球有4700多万人患有神经认知障碍。据预测，到2050年，美国的病例数将增加到1380万，而全球的病例数将超过1.3亿。ad的主要特征症状包括各种认知障碍，如记忆或回忆近期事件的困难。ad的症状可分为轻度、中度和重度。有轻微ad症状的人更容易迷路，判断力差，导致错误的决定，增加焦虑和性格变化。患有中度阿尔茨海默症的人会失去学习新事物的能力，出现阅读和组织思想等语言问题，并难以认识家庭成员。患有严重ad症状的患者会出现体重减轻、皮肤感染、吞咽困难和失去沟通能力。而且ad患者更容易出现一些感染，与ad相关的感染包括肺炎、口腔疱疹和引起莱姆病和牙龈疾病的螺旋体细菌感染。这些相关的传染性疾病可导致慢性炎症并最终死亡。流行病学研究显示，中国60岁及以上的ad患者数量接近983万，65岁以上人群的发病率约为1％-3％。70岁以后，患ad的风险每5年翻一番临床上，患者可能处于临床前期，约8-10年无明显症状之后，他们会经历进行性记忆衰退、失语症、失用症、无知、执行功能障碍、性格改变和行为症状。
2、ad患者的神经丢失率很高，这使得治疗这种疾病变得困难。虽然有各种治疗ad的方法，如胆碱酯酶抑制剂、美金刚胺、nmda受体拮抗剂和抗氧化剂，但它们的有效性很低，会产生不良的副作用。干细胞疗法是一种潜在的ad疗法，可以克服这些不良结果。干细
3、在不同的成体干细胞(asc)系中，间充质干细胞(mscs)容易获得，因此是最广泛研究的可能治疗ad的干细胞。mscs是分级的出生后干细胞，能够自我更新并保持不同的分化潜能。mscs分离自脂肪组织、脐带、骨髓、牙髓或羊膜，除了促进血管生成外，还可发挥广泛的治疗反应，包括抗炎、免疫调节、神经保护和抗纤维化作用，还具有自我复制和自我繁殖的能力。重要的是mscs不表达主要组织相容性复合体ii类细胞表面受体hla-dr，表明具有较高的免疫耐受性。间充质干细胞(mscs)可以从脐带(huc-mscs)中分离出来的，具有抗炎和免疫调节活性等治疗潜力。
4、huc-mscs可用于产生胆碱能神经元，并表现出无致瘤性、低免疫原性、突出的自我更新和免疫调节特性。由于来源于人类，huc-mscs在未来的临床治疗中似乎更容易被医生和患者接受，助于推进干细胞的ad临床治疗应用转化。
技术实现思路
1、(一)解决的技术问题
2、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种人脐带间充质干细胞注射液的制备及应用，提供一种治疗阿尔兹海默病的技术手段，减轻阿尔兹海默病症状。
3、(二)技术方案
4、一种人脐带间充质干细胞注射液的制备，所述制备方法如下：
5、(1)在无菌条件下，取无污染脐带，生理盐水清洗并剪成小段，去除内部残留的脐血，酒精浸泡后放于生理盐水中备用，剔除脐带静脉及动脉，剥离华通氏胶并将其剪碎成小块，接种于含培养基的t-75培养瓶中，培养至p4代；流式细胞仪测定间充质干细胞表面标志物，要求cd73+、cd90+、cd105+≥95％、cd34+≤5％；
6、(2)将人脐带间充质干细胞与生理盐水配置成注射液，每毫升注射液中含有1×105个人脐带间充质干细胞。
7、优选的，所述步骤(1)中培养方法为置37℃，5％二氧化碳的饱和湿度环境下培养，5d后换液，以后每4d换液1次，观察细胞达90％局部融合后，0.25％胰酶消化2min，按1*106/t-75密度传代，继续培养至p4代。
8、优选的，所述注射液注射方式为尾静脉注射。
9、优选的，所述人脐带间充质干细胞注射液的应用。
10、优选的，所述一种人脐带间充质干细胞治疗阿尔兹海默病的技术手段，减轻阿尔兹海默病症状。
11、优选的，所述利用间充质干细胞治疗app/ps1转基因小鼠，提高阿尔兹海默病小鼠学习记忆能力，减轻认知功能障碍。
12、优选的，所述利用间充质干细胞改善阿尔兹海默病小鼠焦虑情绪。
13、优选的，所述利用间充质干细胞有效地提高阿尔兹海默病小鼠的运动能力，改善运动耐力。
14、(三)有益的技术效果
15、本专利技术是提供一种人脐带间充质干细胞治疗阿尔兹海默病的技术手段，减轻阿尔兹海默病症状。提高阿尔兹海默病小鼠学习记忆能力，减轻认知功能障碍。改善阿尔兹海默病小鼠焦虑情绪。有效地提高阿尔兹海默病小鼠的运动能力，改善运动耐力。本专利技术制备间充质干细胞的原料来源是脐带，其制备成本低廉，采集方便，为无创性操作，脐带来源丰富，可以进行规模化生产。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述制备方法如下：
2.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述步骤(1)中培养方法为置37℃，5％二氧化碳的饱和湿度环境下培养，5d后换液，以后每4d换液1次，观察细胞达90％局部融合后，0.25％胰酶消化2min，按1*106/T-75密度传代，继续培养至P4代。
3.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述注射液注射方式为尾静脉注射。
4.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述人脐带间充质干细胞注射液的应用。
5.根据权利要求4所述的人脐带间充质干细胞注射液的应用，其特征在于：所述一种人脐带间充质干细胞治疗阿尔兹海默病的技术手段，减轻阿尔兹海默病症状。
6.根据权利要求4所述的人脐带间充质干细胞注射液的应用，其特征在于：所述利用间充质干细胞治疗APP/PS1转基因小鼠，提高阿尔兹海默病小鼠学习记忆能力，减轻认知功能障碍。
7.根据权利要求4所述的人脐带间充质干细胞注射
8.根据权利要求4所述的人脐带间充质干细胞注射液的应用，其特征在于：所述利用间充质干细胞有效地提高阿尔兹海默病小鼠的运动能力，改善运动耐力。
...【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述制备方法如下：
2.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述步骤(1)中培养方法为置37℃，5％二氧化碳的饱和湿度环境下培养，5d后换液，以后每4d换液1次，观察细胞达90％局部融合后，0.25％胰酶消化2min，按1*106/t-75密度传代，继续培养至p4代。
3.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述注射液注射方式为尾静脉注射。
4.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞注射液的制备，其特征在于：所述人脐带间充质干细胞注射液的应用。
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘心星，李双，刘喜富，王宁眉，孙璐瑶，张佳燚，曹津萌，刘风清，
申请(专利权)人：张家口健垣精准医学有限公司，
类型：发明
国别省市：
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