【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别地涉及用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒及制备方法。
技术介绍
1、干细胞具有自我更新和多向分化潜能，是实现细胞再生的“种子”，机体可通过自体干细胞的增殖和分化实现细胞更新；但各个组织器官的干细胞数量会随着年龄的增长而逐渐减少，增殖分化能力也会下降，故而受损的组织器官无法得到及时修复，导致人体衰老或疾病的发生。而细胞疗法之一的干细胞疗法，为人类寿命的延长提供了希望，并已初步在脂肪干细胞、骨髓间充质干细胞的抗衰老实验中得到证实。
2、这些细胞在特定条件下或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡，当衰退的进程大于再生长的能力时表现为衰老；如果细胞再生能力更强，那么组织衰老的进程将被延缓甚至阻断。可见，干细胞抗衰老效应的发挥取决于是否能够动员足够数量的理想的干细胞。
3、干细胞抗衰老除了干细胞本身在组织微环境作用下，多向分化为组织细胞，替代衰老死亡的细胞外，还具有强大的分泌功能，分泌一些生长因子、细胞因子，提升机体抗自由基能力，发挥促进血管生成及细胞增殖分化、抑制炎症反应及趋化性、调节细胞粘附及迁移的功能，刺激组织细胞的再生、修复功能，加速伤口愈合和组织重塑，达到对抗衰老的目的。
4、可用于抗衰老的外源成体干细胞主要包括脂肪干细胞、骨髓间充质干细胞和妊娠组织来源的间充质干细胞；高度未分化的胚胎干细胞也有少量应用，其中多能干细胞来源广泛且不涉及伦理问题，成为目前国际上研究和应用最多的干细胞种类。
5、干细胞
6、前面提到干细胞减少是机体衰老的根本原因，干细胞的确可以通过多方面的功能抗击衰老，因而科学家们提出通过向机体回输自体来源的干细胞来促进损伤修复、组织再生和抗击衰老，即干细胞疗法。
7、目前可用于干细胞疗法的细胞有胚胎干细胞/诱导多能性干细胞，成体干细胞，如脂肪干细胞、脐带血源的间充质干细胞、骨髓间充质干细胞等。
8、干细胞技术在抗衰老和延长健康寿命方面始终是社会关注热点，有巨大希望和潜力。但是目前干细胞抗衰老技术存在以下不足之处：
9、(1)安全性问题：干细胞治疗涉及到干细胞的移植和植入，存在潜在的安全性问题。这些问题包括细胞移植后的免疫排斥反应、异位移植风险、细胞畸变或不受控制的增殖等。在将干细胞应用于抗衰老治疗之前，必须确保干细胞的安全性和可靠性。
10、(2)操作复杂性：干细胞的培养、扩增和移植过程较为复杂，需要高度精准的操作和条件。这些过程的复杂性增加了治疗的难度和风险。
11、(3)效果的持久性：目前对于干细胞抗衰老的治疗效果持久性还不够明确。干细胞治疗可能需要多次注射或移植，以维持其效果，而长期的疗效仍需进一步研究。
12、(4)个体差异：每个人的体质和生理状态不同，对于干细胞抗衰老治疗的反应也可能存在个体差异。因此，需要个性化的治疗方案，而非一刀切的通用方法。
13、重编程细胞是指通过人工干预细胞的基因表达和表观遗传状态，将一种细胞类型转化为另一种细胞类型的过程。在这个过程中，细胞的特定基因表达模式和功能被改变，使其从一种分化状态回到类似于干细胞的状态，从而具有多向分化的能力。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提出用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒及制备方法。
2、本专利技术所提供的用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒，包括以下试剂a和试剂b：
3、试剂a为重编程因子：包含nr5a2、tbx3和sall4三种转录因子；
4、试剂b为细胞培养试剂：包含用于维持和培养干细胞的培养基和生长因子。
5、可选地，所述试剂盒还包括如下试剂c：试剂c为抗衰老活性成分：包含抗氧化剂、细胞周期调控因子、dna修复酶或细胞凋亡抑制剂。
6、可选地，所述试剂b中：
7、所述用于维持和培养干细胞的培养基为dmem/f12或dmem基础培养基；
8、所述生长因子选自碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、胰岛素生长因子-1、tgf-β抑制剂、sirt1激活剂中的一种或多种。
9、可选地，所述试剂c中：
10、所述抗氧化剂选自维生素c、维生素e、硫辛酸、多酚类化合物中的一种或多种；
11、所述细胞周期调控因子为p16ink4a抑制剂或telomerase活化剂；
12、所述细胞凋亡抑制剂为bcl-2家族抑制剂或caspase抑制剂。
13、可选地，所述试剂a和试剂b单独包装。
14、可选地，所述试剂a、试剂b和试剂c单独包装。
15、所述用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒在制备用于抗衰老的产品中应用也属于本专利技术的保护范围。
16、本专利技术还提供了用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法，包括如下步骤：
17、(1)从个体的皮肤组织中获取成体细胞；
18、(2)将转录因子导入所述步骤(1)获取的成体细胞中，得到中间成体细胞；所述转录因子包含nr5a2、tbx3和sall4中三种转录因子；
19、(3)在用于维持和培养干细胞的培养基和生长因子中培养所述中间成体细胞，使所述中间成体细胞发生细胞重编程；
20、(4)筛选发生重编程的干细胞，即得到用于抗衰老的重编程干细胞。
21、可选地，所述方法还包括在得到用于抗衰老的重编程干细胞后，添加抗衰老活性成分的步骤。
22、可选地，所述步骤(1)中：所述个体为人或小鼠；所述成体细胞为：皮肤成纤维细胞、角质细胞或脂肪细胞。
23、可选地，所述步骤(3)中：所述用于维持和培养干细胞的培养基为dmem/f12或dmem基础培养基；所述生长因子选自碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、胰岛素生长因子-1、tgf-β抑制剂、sirt1激活剂中的一种或多种；所述培养的条件为：在36℃～38℃的体外培养箱中，以4％～6％ co2的气氛下培养。
24、可选地，所述抗衰老活性成分包含抗氧化剂、细胞周期调控因子、dna修复酶或细胞凋亡抑制剂。
25、进一步可选地，所述抗氧化剂选自维生素c、维生素e、硫辛酸、多酚类化合物中的一种或多种；所述细胞周期调控因子为p16ink4a抑制剂或telomerase活化剂；所述细胞凋亡抑制剂为bcl-2家族抑制剂或caspase抑制剂。
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【技术保护点】
1.用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒，其特征在于：包括以下试剂A和试剂B：
2.根据权利要求1所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括如下试剂C：
3.根据权利要求1所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂B中：
4.根据权利要求2所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂C中：
5.根据权利要求1至3中任一所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂A和试剂B单独包装。
6.根据权利要求2或4所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂A、试剂B和试剂C单独包装。
7.权利要求1至6中任一所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒在制备用于抗衰老的产品中应用。
8.用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法，包括如下步骤：
9.根据权利要求8所述的用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法，其特征在于：所述方法还包括在得到用于抗衰老的重编程干细胞后，添加抗衰老活性成分的步骤。
11.根据权利要求8所述的用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中：
12.根据权利要求9所述的用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法，其特征在于：所述抗衰老活性成分包含抗氧化剂、细胞周期调控因子、DNA修复酶或细胞凋亡抑制剂。
13.根据权利要求12所述的用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法，其特征在于：
14.权利要求8至13中任一所述的方法制备得到的重编程干细胞。
15.一种用于抗衰老的组合物，其包含权利要求14所述的重编程干细胞。
...【技术特征摘要】
1.用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒，其特征在于：包括以下试剂a和试剂b：
2.根据权利要求1所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括如下试剂c：
3.根据权利要求1所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂b中：
4.根据权利要求2所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂c中：
5.根据权利要求1至3中任一所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂a和试剂b单独包装。
6.根据权利要求2或4所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞试剂盒，其特征在于：所述试剂a、试剂b和试剂c单独包装。
7.权利要求1至6中任一所述的用于制备抗衰老的重编程干细胞的试剂盒在制备用于抗衰老的产品中应用。
8.用于抗衰老的重编程干细胞的制备方法...
【专利技术属性】
技术研发人员：约翰·泰勒·徐，
申请(专利权)人：澳大利亚健康产业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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