一种吡咯生物碱蛋白加合物的检测方法及一种试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种吡咯生物碱蛋白加合物的检测方法及一种试剂盒，所述检测方法使用7,9‑di‑EtO‑DHP‑d3作为内标进行吡咯生物碱蛋白加合物的检测。7,9‑di‑EtO‑DHP‑d3在样本溶液的配制过程中不会被破坏，且与待测物具有相似的特性，能够有效校正整个样本前处理过程以及检测过程的误差。本发明专利技术提供的检测方法具有精密度好，准确度高的优点，尤其适用于低浓度吡咯生物碱蛋白加合物的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医学检测，具体涉及一种吡咯生物碱蛋白加合物的检测方法及一种试剂盒。

技术介绍

1、吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloid，pa)为自然界中广泛分布的一类生物碱成分，具有极强的肝毒性。中草药作为传统药物资源有着数千年的使用历史和文化传承，一直被广泛使用。一些含pa的植物，如菊科的土三七、千里光，豆科的猪屎豆，紫草科的天芥菜等，服用后可能导致严重的肝窦阻塞综合征(hsos)。为此，2017年颁布了《吡咯生物碱相关肝窦阻塞综合征诊断和治疗专家共识意见》共识与指南，该指南推荐意见：hsos以pa-hsos为主，pa-hsos病因以服用土三七最常见；证据等级为a级，推荐强度为1级。在hsos的诊断中，目前主要通过血浆胆红素等生化指标检测和超声、ct、mri等影像学的方法诊断hsos，缺乏直接检测hsos标志物的方法。

2、人体服用含pa的中草药后，pa在体内经过一系列的生物酶转化，最终生成吡咯生物碱蛋白加合物和吡咯生物碱-dna加合物，直接检测这些标志物不仅为hsos病因提供最直接证据，也为今后pa-hsos的体内病本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种吡咯生物碱蛋白加合物的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述释放剂为含硝酸银的乙醇溶液；

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1取第二上清液后还包括：将第二上清液与衍生剂混合，之后离心取上清为待测液；

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述蛋白沉淀剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇中的任意一种或至少两种的组合；

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述待测样本与乙腈、含硝酸银的乙醇溶液的体积比为1:(2-4):(1-3)；

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【技术特征摘要】

1.一种吡咯生物碱蛋白加合物的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述释放剂为含硝酸银的乙醇溶液；

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1取第二上清液后还包括：将第二上清液与衍生剂混合，之后离心取上清为待测液；

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述蛋白沉淀剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇中的任意一种或至少两种的组合；

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述待测样本与乙腈、含硝酸银的乙醇溶液的体积比为1:(2-4):(1-3)；

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李伟，徐敏强，徐英，
申请(专利权)人：苏州帕诺米克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：