一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法技术

本发明专利技术提供了一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，包括以下步骤：S1，菌株培养与鉴定：S11，设计海分枝杆菌的引物，将样品接种于M7H10培养基上，在30℃下接种2周；S12，挑取菌落，进行DNA提取；S13，将提取的DNA进行测序，将测序序列在NCBI进行比对确定为海分枝杆菌；S2，模型构建；S3，模型皮损评估：将海分枝杆菌菌悬液注射进小鼠爪部2周后，观察正常组和对照组小鼠皮损；S4，模型病原学评估；S5，模型病理学评估。本方案简便易行，需实验耗材少，成模时间短，符合人体的实际感染暴露途径，适合实验室的常规操作且重复性好，更能反应海分枝杆菌感染人的实际进展情况，为新治疗方法与药物的开发提供了新手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海分枝杆菌皮肤感染模型构建，具体为一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法。

技术介绍

1、海分枝杆菌是一种常见的非典型分枝杆菌，可能引起人体机会性感染，临床以皮肤感染为主、且多为首发部位，皮肤感染后多迁延不愈或瘢痕形成，严重者可影响患者容貌，累及关节部位可导致功能丧失，免疫力低下的患者经皮肤感染后可导致系统性播散死亡，随着广谱抗生素、糖皮质激素及免疫抑制剂等大量应用，器官移植开展和人口老龄化，免疫受损和低下人群逐渐增多，由非典型分枝杆菌——海分枝杆菌皮肤感染的发病率逐年增高。

2、由于交通运输高速发展，海分枝杆菌皮肤感染的患者不仅局限于沿海地区，全国甚至全球范围不同地区发病率均出现逐渐增高的趋势；目前多联抗生素系统性应用为海分枝杆菌感染首选治疗方法，但用药疗程多长达数月、甚至数年，患者多难以耐受，且部分抗生素如利福平、异烟肼及链霉素等存在肝、肾毒副作用，一些患者因存在肝肾功能损害限制了抗生素的使用；同时部分海分枝杆菌存在天然耐药，加之抗生素的不规范使用继发性耐药菌株亦日益增多。

3、因此，海分枝杆菌感染的治疗仍面临巨大挑本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述M7H10培养基配方如下：

3.根据权利要求1所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述S12挑取菌落，进行DNA提取的具体步骤为：

4.根据权利要求3所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述裂解液的组成成分及含量如下：40mMTris-醋酸、20mM醋酸钠、1mM EDTA、1％SDS。

5.根据权利要求4所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征...

【技术特征摘要】

1.一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述m7h10培养基配方如下：

3.根据权利要求1所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述s12挑取菌落，进行dna提取的具体步骤为：

4.根据权利要求3所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述裂解液的组成成分及含量如下：40mmtris-醋酸、20mm醋酸钠、1mm edta、1％sds。

5.根据权利要求4所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述裂解液的ph为7.8。

6.根据权利要求3所述的一种海分枝杆菌皮肤感染模型的构建方法，其特征在于，所述醋酸钾的规格为浓度3m，ph8.0。

7.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：史冬梅，杨智雅，冯亚辉，
申请(专利权)人：济宁市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：