包含缓冲物质的RNA组合物及其制备、储存和使用方法技术

本公开一般涉及包含缓冲物质的RNA组合物、制备和储存这类组合物的方法以及这类组合物在治疗中的用途的领域。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开一般涉及包含缓冲物质的rna组合物、制备和储存这类组合物的方法以及这类组合物在治疗中的用途的领域。

技术介绍

1、重组核酸(如dna或rna)在将外源遗传信息递送至靶细胞中的用途是众所周知的。使用rna的优点包括瞬时表达和非转化特征。rna不需要进入细胞核才能被表达，而且不会整合到宿主基因组中，从而消除了各种风险如肿瘤发生。

2、重组核酸可以裸露形式向有此需要的受试者给药；然而，通常使用药物组合物给药重组核酸。例如，可以使用不同的递送媒介物将rna递送至受试者，主要基于阳离子聚合物或脂质，它们与rna一起形成纳米颗粒。纳米颗粒的目的是保护rna免受降解，使rna能够递送至靶位点，并促进细胞摄取和靶细胞的处理。rna递送的效率部分依赖于纳米颗粒的分子组成，并受许多参数的影响，包括粒径、制剂以及分子部分的电荷或接枝(graft)，如聚乙二醇(peg)或其他配体。这类纳米颗粒制剂的命运由不同的关键因素控制(例如，纳米颗粒的尺寸和尺寸分布等)。例如，这些因素自2018年在fda"liposome drug productsguidance"中被称本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种组合物，其包含(i)RNA；(ii)阳离子可电离脂质；和(iii)水相，

2.权利要求1的组合物，其中

3.权利要求1或2的组合物，其中

4.权利要求1-3中任一项的组合物，其中

5.权利要求1-4中任一项的组合物，其中

6.权利要求1-5中任一项的组合物，其中

7.权利要求1-6中任一项的组合物，其中R4各自独立地选自-OH、2-羟基乙氧基和双(2-羟乙基)氨基。

8.权利要求1-7中任一项的组合物，其中R1、R2和R3中的每一个独立地选自甲基、乙基、2-羟乙基、2-(2-羟基乙氧基)乙基、2-...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种组合物，其包含(i)rna；(ii)阳离子可电离脂质；和(iii)水相，

2.权利要求1的组合物，其中

3.权利要求1或2的组合物，其中

4.权利要求1-3中任一项的组合物，其中

5.权利要求1-4中任一项的组合物，其中

6.权利要求1-5中任一项的组合物，其中

7.权利要求1-6中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、2-羟基乙氧基和双(2-羟乙基)氨基。

8.权利要求1-7中任一项的组合物，其中r1、r2和r3中的每一个独立地选自甲基、乙基、2-羟乙基、2-(2-羟基乙氧基)乙基、2-[双(2-羟乙基)氨基]乙基和1,5-二羟基-3-(2-羟乙基)戊烷-3-基。

9.权利要求1-8中任一项的组合物，其中r1、r2和r3都相同。

10.权利要求9的组合物，其中r1、r2和r3都是甲基、乙基或2-羟乙基。

11.权利要求1-8中任一项的组合物，其中r1和r2相同，并且r3与r1和r2不同。

12.权利要求11的组合物，其中r1和r2中的每一个是2-羟乙基、乙基或甲基。

13.权利要求11或12的组合物，其中r3选自甲基、乙基、2-羟乙基、2-(2-羟基乙氧基)乙基、2-[双(2-羟乙基)氨基]乙基和1,5-二羟基-3-(2-羟乙基)戊烷-3-基。

14.权利要求1的组合物，其中r1和r2与氮原子连接在一起形成5-或6-元n-杂环，所述5-或6-元n-杂环任选被一个或两个r5取代。

15.权利要求14的组合物，其中r3选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，

16.权利要求14或15的组合物，其中所述n-杂环是单环，其含有至少一个氮环原子和任选存在的选自o和s的另一个环杂原子。

17.权利要求14-16中任一项的组合物，其中所述n-杂环是单环，其含有(i)一个氮环原子；(ii)两个氮环原子；(iii)一个氮环原子和一个氧环原子；(iv)一个氮环原子和一个硫环原子；或者(v)三个氮环原子。

18.权利要求14-17中任一项的组合物，其中所述n-杂环是单环5-或6-元n-杂环，如单环6-元n-杂环。

19.权利要求14-18中任一项的组合物，其中所述n-杂环选自吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基、1,2-六氢哒嗪基、1,3-六氢哒嗪基、1,3,5-六氢三嗪基、吗啉基和硫代吗啉基，

20.权利要求14-19中任一项的组合物，其中，如果所述n-杂环仅含有一个氮环原子，则这个氮环原子被r3取代，r3不是h，或者，

21.权利要求14-20中任一项的组合物，其中r5各自独立地选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，

22.权利要求14-21中任一项的组合物，其中所述n-杂环是哌啶基，并且环n原子被r3取代，r3不是h。

23.权利要求14-21中任一项的组合物，其中所述n-杂环是哌嗪基，两个环n原子中的一个被r3取代，r3不是h，并且另一个环n原子任选被r5取代，优选地，另一个环n原子被r5取代。

24.权利要求23的组合物，其中两个环n原子都被取代，并且r5选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，

25.权利要求14-24中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、-o-(c1-4亚烷基-oh)和-n(c1-4亚烷基-oh)2，

26.权利要求14-25中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、2-羟基乙氧基和双(2-羟乙基)氨基。

27.权利要求14-26中任一项的组合物，其中r3和r5相同。

28.权利要求27的组合物，其中r3和r5均为甲基、乙基、2-羟乙基或2-(2-羟基乙氧基)乙基，优选地，r3和r5均为2-羟乙基。

29.权利要求14-26中任一项的组合物，其中r3和r5互不相同。

30.权利要求1的组合物，其中r1是h。

31.权利要求30的组合物，其中r2和r3中的每一个独立地选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4、ch(c1-5亚烷基-r4)2和c(c1-5亚烷基-r4)3，其中r2和r3中的至多一个是ch(c1-5亚烷基-r4)2或c(c1-5亚烷基-r4)3，

32.权利要求30或31的组合物，其中r2和r3中的每一个独立地选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，其中r2和r3中的至多一个是c(c1-5亚烷基-r4)3，

33.权利要求30-32中任一项的组合物，其中r2和r3中的每一个独立地选自c1-6烷基和c1-6亚烷基-r4，

34.权利要求30-33中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、-o-(c1-4亚烷基-oh)和-n(c1-4亚烷基-oh)2，

35.权利要求30-34中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、2-羟基乙氧基和双(2-羟乙基)氨基。

36.权利要求30-35中任一项的组合物，其中r2和r3中的每一个独立地选自甲基、乙基、2-羟乙基、2-(2-羟基乙氧基)乙基、2-[双(2-羟乙基)氨基]乙基和1,5-二羟基-3-(2-羟乙基)戊烷-3-基，优选地，r2和r3均为2-羟乙基或2-(2-羟基乙氧基)乙基。

37.权利要求1-36中任一项的组合物，其中所述缓冲物质选自双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷(bis-tris-甲烷或btm)及其质子化形式、三乙醇胺(tea)及其质子化形式、乙基二乙醇胺及其质子化形式、2-(二乙基氨基)乙-1-醇及其质子化形式、三乙胺及其质子化形式、2-[2-(二乙基氨基)乙氧基]乙-1-醇及其质子化形式、二乙醇胺及其质子化形式、n,n'-双(2-羟乙基)哌嗪及其质子化形式、n,n,n',n'-四(2-羟乙基)乙二胺及其质子化形式和三甲胺n-氧化物及其质子化形式。

38.权利要求1-37中任一项的组合物，其中所述缓冲物质包含至少一个c1-6亚烷基-r4(如2-羟乙基)部分。

39.一种组合物，其包含(i)rna；和(ii)水相，其中所述水相包含缓冲系统，所述缓冲系统包含缓冲物质，所述缓冲物质具有式n(r1)(r2)(r3)，它的n-氧化物，或其质子化形式，其中：

40.权利要求39的组合物，其中r1、r2和r3中的每一个独立地选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4、ch(c1-5亚烷基-r4)2和c(c1-5亚烷基-r4)3，其中r1、r2和r3中的至多一个是ch(c1-5亚烷基-r4)2或c(c1-5亚烷基-r4)3，

41.权利要求39或40的组合物，其中r1、r2和r3中的每一个独立地选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，其中r1、r2和r3中的至多一个是c(c1-5亚烷基-r4)3，

42.权利要求39-41中任一项的组合物，其中r1、r2和r3中的每一个独立地选自c1-6烷基和c1-6亚烷基-r4，

43.权利要求39-42中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、-o-(c1-4亚烷基-oh)和-n(r6)z-(c1-4亚烷基-oh)2-z，其中z各自独立地选自0和1；并且r6各自独立地选自h和c1-3烷基，

44.权利要求39-43中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、-o-(c1-4亚烷基-oh)和-n(c1-4亚烷基-oh)2，

45.权利要求39-44中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、2-羟基乙氧基和双(2-羟乙基)氨基。

46.权利要求39-45中任一项的组合物，其中r1、r2和r3中的每一个独立地选自甲基、乙基、2-羟乙基、2-(2-羟基乙氧基)乙基、2-[双(2-羟乙基)氨基]乙基和1,5-二羟基-3-(2-羟乙基)戊烷-3-基。

47.权利要求39-46中任一项的组合物，其中r1、r2和r3都相同。

48.权利要求47的组合物，其中r1、r2和r3都是甲基、乙基或2-羟乙基。

49.权利要求39-46中任一项的组合物，其中r1和r2相同，并且r3与r1和r2不同。

50.权利要求49的组合物，其中r1和r2中的每一个是2-羟乙基、乙基或甲基。

51.权利要求49或50的组合物，其中r3选自甲基、乙基、2-羟乙基、2-(2-羟基乙氧基)乙基、2-[双(2-羟乙基)氨基]乙基和1,5-二羟基-3-(2-羟乙基)戊烷-3-基。

52.权利要求39的组合物，其中r1和r2与氮原子连接在一起形成5-或6-元n-杂环，所述5-或6-元n-杂环任选被一个或两个r5取代。

53.权利要求52的组合物，其中r3选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，

54.权利要求52-53中任一项的组合物，其中，如果所述n-杂环仅含有一个氮环原子，则这个氮环原子被r3取代，r3不是h，或者，

55.权利要求52-54中任一项的组合物，其中r5各自独立地选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，

56.权利要求52-55中任一项的组合物，其中所述n-杂环是哌啶基，并且环n原子被r3取代，其中r3不是h。

57.权利要求52-55中任一项的组合物，其中所述n-杂环是哌嗪基，两个环n原子中的一个被r3取代，r3不是h，并且另一个环n原子任选被r5取代，优选地，另一个环n原子被r5取代。

58.权利要求57的组合物，其中两个环n原子都被取代，并且r5选自c1-6烷基、c1-6亚烷基-r4和c(c1-5亚烷基-r4)3，

59.权利要求52-58中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、-o-(c1-4亚烷基-oh)和-n(c1-4亚烷基-oh)2，

60.权利要求52-59中任一项的组合物，其中r4各自独立地选自-oh、2-羟基乙氧基和双(2-羟乙基)氨基。

61.权利要求52-60中任一项的组合物，其中r3和r5相同。

62.权利要求61的组合物，其中r3和r5均为甲基、乙基、2-羟乙基或2-(2-羟基乙氧基)乙基，优选地，r3和r5均为2-羟乙基。

63.权利要求52-60中任一项的组合物，其中r3和r5互不相同。

64.权利要求39-63中任一项的组合物，其中所述缓冲物质选自双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷(bis-tris-甲烷或btm)及其质子化形式、三乙醇胺(tea)及其质子化形式、乙基二乙醇胺及其质子化形式、2-(二乙基氨基)乙-1-醇及其质子化形式、三乙胺及其质子化形式、2-[2-(二乙基氨基)乙氧基]乙-1-醇及其质子化形式、二乙醇胺及其质子化形式、n,n'-双(2-羟乙基)哌嗪及其质子化形式、n,n,n',n'-四(2-羟乙基)乙二胺及其质子化形式和三甲胺n-氧化物及其质子化形式。

65.权利要求39-64中任一项的组合物，其中所述缓冲物质包含至少一个c1-6亚烷基-r4(如2-羟乙基)部分。

66.权利要求1-65中任一项的组合物，其中所述缓冲系统进一步包含阴离子，所述阴离子选自氯离子、乙酸根、乙醇酸根、乳酸根以及二羧酸或三羧酸的阴离子，如柠檬酸、琥珀酸、丙二酸、戊二酸或己二酸的阴离子。

67.权利要求1-66中任一项的组合物，其中所述组合物中缓冲物质的浓度在约10mm至约200mm之间，优选在约15mm至约100mm之间，更优选在约20mm至约80mm之间，更优选在约40mm至约60mm之间，如约50mm。

68.权利要求1-67中任一项的组合物，其中所述组合物的ph在约4.0至约8.0之间，优选在约4.5至约8.0之间，如约5.0至约8.0之间、约5.5至约8.0之间、约6.0至约8.0之间、约6.5至约8.0之间、约6.8至约7.9之间或者约7.0至约7.8之间。

69.权利要求1-68中任一项的组合物，其中水是所述组合物中的主要成分和/或所述组合物中含有的除水以外的溶剂的总量小于约0.5％(v/v)。

70.权利要求1-69中任一项的组合物，其中所述组合物的重量摩尔渗透压浓度至多约为1000x 10-3渗透压摩尔/kg，优选约100x 10-3渗透压摩尔/kg至约750x 10-3渗透压摩尔/kg之间，如约100x 10-3渗透压摩尔/kg至约500x 10-3渗透压摩尔/kg之间，更优选约300x10-3渗透压摩尔/kg。

71.权利要求1-70中任一项的组合物，其中所述组合物中rna的浓度为约5mg/l至约500mg/l，如约10mg/l至约400mg/l、约10mg/l至约300mg/l、约10mg/l至约200mg/l、约10mg/l至约150mg/l或约10mg/l至约100mg/l，优选约10mg/l至约140mg/l，更优选约20mg/l至约130mg/l，更优选约30mg/l至约120mg/l。

72.权利要求1-71中任一项的组合物，其中所述组合物包含冷冻保护剂。

73.权利要求1-38和66-72中任一项的组合物，其中所述阳离子可电离脂质包含头基，所述头基包括至少一个能够在生理条件下质子化的氮原子。

74.权利要求1-38和66-73中任一项的组合物，其中所述阳离子可电离脂质具有式(x)的结构

75.权利要求1-38和66-73中任一项的组合物，其中所述阳离子或阳离子可电离脂质具有式(xi)的结构：

76.权利要求1-38和66-75中任一项的组合物，其中所述阳离子可电离脂质包含存在于所述组合物中的总脂质的约20摩尔％至约80摩尔％，优选约25摩尔％至约65摩尔％，更优选约30摩尔％至约50摩尔％，如约40摩尔％至约50摩尔％。

77.权利要求1-76中任一项的组合物，其进一步包含一种或多种其他脂质，优选选自聚合物缀合脂质、中性脂质、类固醇及其组合，更优选所述组合物包含阳离子可电离脂质、聚合物缀合脂质、中性脂质(例如，磷脂)和类固醇。

78.权利要求77的组合物，其中所述聚合物缀合脂质包...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·潘茨纳，U·K·布拉施克，JJ·克里杰，C·库楚拉斯，
申请(专利权)人：生物技术欧洲股份公司，
类型：发明
国别省市：