【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及人工角膜材料制备，具体涉及一种交联增强型角膜内皮层替代材料及其制备方法。
技术介绍
1、人工角膜，指用人工合成材料制成的一种特殊屈光装置，用以替代病变后阻碍眼球光学通路的浑浊角膜，使患者获得一定视力。角膜病和白内障是引起眼盲的主要原因，这些疾病可以通过移植人工角膜方法进行治愈；人工角膜的出现，使角膜移植摆脱了供体缺乏和移植成功率低的问题，为角膜盲的患者带来新的希望。
2、猪角膜来源广泛，是比较理想的角膜内皮层植入材料；但是猪角膜内皮层很容易破裂，需要进行增强；因此，提供一种以猪角膜为原料，提供一种交联增强型角膜内皮层替代材料具有重要的应用价值。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的至少之一的技术问题，本专利技术提供了一种交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法。
2、本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：
3、本专利技术交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其包含如下步骤：
4、(1)取猪角膜，裁剪成圆片，再经清洗后得猪角膜圆片；
5、(2)取猪角膜圆片，用飞秒激光设备对猪角膜圆片进行切割，保留猪角膜的后弹力层以及内皮层，得到带有后弹力层以及内皮层的圆形猪角膜；
6、(3)将带有后弹力层以及内皮层的圆形猪角膜放入脱细胞液中进行脱细胞处理，得脱细胞处理后的圆形猪角膜；
7、(4)将脱细胞处理后的圆形猪角膜放入到透光模具中，接着在模具中加入交联溶液；
8、(5)将模具
9、本专利技术提供了一种全新的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法；该方法采用edc/nhs交联剂以及紫外光对带有后弹力层以及内皮层的圆形猪角膜进行双交联，可以使得圆形猪角膜的强度得到增强。
10、尤其是，再配合在模具合模过程中施加压力，可以使得圆形猪角膜的强度得到进一步的提高。
11、优选地，步骤(4)中所述的透光模具采用的是pmma材质的透光模具。
12、优选地，步骤(4)中交联溶液与圆形猪角膜的用量比为5～10ml:1g。
13、最优选地，步骤(4)中交联溶液与圆形猪角膜的用量比为6ml:1g。
14、优选地，步骤(4)中所述的交联溶液为edc/nhs交联溶液。
15、优选地，所述的edc/nhs交联溶液包含如下重量份的组分：
16、碳二亚胺edc 1～3份；n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)1～3份；mes缓冲液100份。
17、最优选地，所述的edc/nhs交联溶液包含如下重量份的组分：
18、碳二亚胺edc 2份；n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)2份；mes缓冲液100份。
19、优选地，所述的edc/nhs交联溶液中还包含中药提取物0.5～2份。
20、优选地，所述的中药提取物通过如下方法制备得到：
21、取中药人参以及菟丝子混合后，用乙醇提取，提取结束后将提取液浓缩干燥后得中药乙醇提取物；取中药乙醇提取物即得所述的中药提取物。
22、专利技术人在研究中发现，在本专利技术脱细胞液中加入以人参以及菟丝子为原料，通过本专利技术上述方法制备得到的中药提取物，可以有效地提高交联增强型角膜内皮层替代材料对人角膜内皮细胞的生长作用。
23、优选地，人参以及菟丝子的重量比为1～3:1～3。
24、优选地，人参以及菟丝子的重量比为1:1。
25、优选地，中药人参以及菟丝子的总重量与乙醇的重量比为1：8～15。
26、优选地，中药人参以及菟丝子的总重量与乙醇的重量比为1：12。
27、优选地，所述的乙醇是指体积分数为20～50％的乙醇水溶液。
28、优选地，所述的乙醇是指体积分数为30％的乙醇水溶液。
29、优选地，所述的提取具体为加热回流提取，提取的温度为80～100℃，提取时间为1～2h。
30、最优选地，所述的提取的温度为90℃，提取时间为1.5h。
31、进一步的，所述的中药提取物的制备方法还包含如下步骤：
32、将中药乙醇提取物上大孔树脂柱，先用5倍柱体积的体积分数为4％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用6倍柱体积的体积分数为17％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为17％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后即得所述的中药提取物。
33、专利技术人在进一步研究中发现，在本专利技术脱细胞液中加入进一步通过本专利技术所述大孔树脂洗脱条件后制备得到的中药提取物，其可以进一步提高交联增强型角膜内皮层替代材料对人角膜内皮细胞的生长作用。
34、优选地，所述的mes缓冲液具体为浓度为0.2m，ph为6.5的mes缓冲液。
35、优选地，步骤(5)中所述的紫外光是指波长为250～380nm的紫外光；紫外光的照射强度为2～10mw/cm2；
36、最优选地，步骤(5)中所述的紫外光是指波长为330nm的紫外光；紫外光的照射强度为5mw/cm2。
37、优选地，步骤(5)中所述的交联时间为2～5h；
38、最优选地，步骤(5)中所述的交联时间为4h。
39、优选地，步骤(5)中所述的合模压力为0.1mpa。
40、本专利技术还提供了一种由上述制备方法制备得到的交联增强型角膜内皮层替代材料。
41、有益效果：本专利技术提供了一种全新的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法；该方法采用edc/nhs交联剂以及紫外光对带有后弹力层以及内皮层的圆形猪角膜进行双交联，可以使得圆形猪角膜的强度得到增强。尤其是，再配合在模具合模过程中施加压力，可以使得圆形猪角膜的强度得到进一步的提高。此外，本专利技术所述的交联增强型角膜内皮层替代材料还可以促进人角膜内皮细胞的生长。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
2.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的透光模具采用的是PMMA材质的透光模具。
3.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中交联溶液与圆形猪角膜的用量比为5～10mL:1g。
4.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中交联溶液与圆形猪角膜的用量比为6mL:1g。
5.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的交联溶液为EDC/NHS交联溶液。
6.根据权利要求5所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，所述的EDC/NHS交联溶液包含如下重量份的组分：
7.根据权利要求6所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，所述的MES缓冲液具体为浓度为0.2M，pH为6.5的MES缓冲液。
8.根据权利要求6所
9.根据权利要求6所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的交联时间为2～5h；
10.权利要求1～9任一项所述制备方法制备得到的交联增强型角膜内皮层替代材料。
...【技术特征摘要】
1.一种交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
2.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的透光模具采用的是pmma材质的透光模具。
3.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中交联溶液与圆形猪角膜的用量比为5～10ml:1g。
4.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中交联溶液与圆形猪角膜的用量比为6ml:1g。
5.根据权利要求1所述的交联增强型角膜内皮层替代材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的交联溶液为edc/nhs交联溶液。
6.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：钟杏霞，曹昭昭，陈雨晴，官习鹏，韦晓慧，
申请(专利权)人：广州悦清再生医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。