【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术通常涉及对多能干细胞特异性的标记物。特别地,本专利技术涉及由多能干细胞选择性表达的核酸和多肽标记物;以及通过检测一种或多种此类标记物的存在和/或不存在来检测一种或多种多能干细胞的存在和/或不存在的方法。
技术介绍
1、多能干细胞(psc)通常被认为在体外表现出无限自我更新的能力(即在未分化状态下无限分裂的能力);并具有分化成为代表早期胚胎的三个初级生殖细胞层(即外胚层、内胚层和中胚层)的细胞类型的能力。通过能够发育成这三个胚层,psc由此能够产生成熟生物体的所有细胞类型。参见thomson等人(science,1998;282:1145–1147)。在特殊情况下,例如环境条件和/或细胞信号通路的改变,psc退出自我更新的周期,并分化为来源于三个胚层的特化细胞类型。
2、最初,psc来源于胚胎(胚胎干细胞;esc),尽管最近,显示了psc通过重编程因子的表达从成熟(体)细胞中产生。参见takahashi等人(cell,2006,126(4):663-76)。这些psc被称为诱导性psc(ipsc),通常是通过向体细胞
...【技术保护点】
1.一种检测多能干细胞的方法,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中目的样本包含诱导多能干细胞。
3.根据权利要求1所述的方法,其中目的样本包含胚胎多能干细胞。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述目的样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
5.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mRNA表达水平检测所述至少一个标记基因的表达。
6.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测所述至少一个标记
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种检测多能干细胞的方法,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中目的样本包含诱导多能干细胞。
3.根据权利要求1所述的方法,其中目的样本包含胚胎多能干细胞。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述目的样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
5.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测所述至少一个标记基因的表达。
6.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测所述至少一个标记基因的表达。
7.根据权利要求5所述的方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测所述至少一个标记基因的表达:液滴数字聚合酶链式反应(dd-pcr)、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern blot分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述技术包括微阵列分析或下一代测序。
9.一种检测多能干细胞的方法,所述方法包括:
10.一种定量样本中多能干细胞数量的方法,所述方法包括:
11.根据权利要求9所述的方法,其中目的样本包含诱导多能干细胞。
12.根据权利要求9所述的方法,其中目的样本包含胚胎多能干细胞。
13.根据权利要求9所述的方法,其中所述目的样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
14.根据权利要求9所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
15.根据权利要求9所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
16.根据权利要求14所述的方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern blot分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
17.根据权利要求10所述的方法,其中目的样本包含诱导多能干细胞。
18.根据权利要求10所述的方法,其中目的样本包含胚胎多能干细胞。
19.根据权利要求10所述的方法,其中所述目的样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
20.根据权利要求10所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
21.根据权利要求10所述的方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
22.根据权利要求20所述的方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern印迹分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
23.一种用于检测治疗产品中的残留ipsc的检测方法,所述检测方法包括:
24.根据权利要求23所述的检测方法,其中所述样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
25.根据权利要求23所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
26.根据权利要求23所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
27.根据权利要求25所述的检测方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern印迹分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
28.一种用于定量治疗产品中残留ipsc数量的检测方法,所述检测方法包括:
29.根据权利要求28所述的检测方法,其中所述样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
30.根据权利要求28所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
31.根据权利要求28所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
32.根据权利要求30所述的检测方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern印迹分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
33.一种用于检测治疗产品中残留ipsc的检测方法,所述检测方法包括:
34.根据权利要求33所述的检测方法,其中所述样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
35.根据权利要求33所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
36.根据权利要求33所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
37.根据权利要求35所述的检测方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern印迹分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
38.一种在不同分化时间下定量治疗产品中残留ipsc数量的检测方法,所述检测方法包括:
39.根据权利要求38所述的检测方法,其中所述样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
40.根据权利要求38所述的检测方法,其中在步骤(c)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
41.根据权利要求38所述的检测方法,其中在步骤(c)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
42.根据权利要求40所述的检测方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern印迹分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
43.一种测定分化产品纯度的检测方法,所述检测方法包括:
44.根据权利要求43所述的检测方法,其中所述样本中的所述多个细胞以细胞混合物、细胞聚集体或组织的形式存在。
45.根据权利要求43所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量所述标记基因的mrna表达水平检测至少一个标记基因的表达。
46.根据权利要求43所述的检测方法,其中在步骤(b)中,通过测量由所述标记基因编码的表达蛋白的水平检测至少一个标记基因的表达。
47.根据权利要求45所述的检测方法,其中通过包括选自由以下技术组成的组中的方法中检测至少一个标记基因的表达:dd-pcr、聚合酶链式反应(pcr)、逆转录酶pcr(rt-pcr)、定量pcr、定量rt-pcr、northern印迹分析、差异基因表达、rna保护试验、微阵列分析、杂交试验和下一代测序。
48.一种确定...
【专利技术属性】
技术研发人员:T·伯克,S·史密斯,A·斯特劳斯,
申请(专利权)人:富士胶片细胞动力学公司,
类型:发明
国别省市:
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