【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药领域，具体涉及采用高效液相色谱法建立人参益元颗粒的高效液相指纹图谱用于控制人参益元颗粒的质量。
技术介绍
1、近年来，恶性肿瘤的总体发病率继续呈上升趋势，已成为威胁人类健康的重大疾病。据报道90％以上的化疗药物可能导致骨髓抑制，主要表现为外周血白细胞、血小板、红细胞和血红蛋白出现不同程度的下降，可引起感染、出血和贫血，导致化疗中断，降低患者的生活质量，甚至危及患者生命。目前，西医治疗骨髓抑制的主要药物为集落刺激因子、重组人促血小板生成素及糖皮质激素等，但不良反应多。有研究表明集落刺激因子虽能迅速提高中性粒细胞，但因不能促进造血干细胞增殖而需反复用药，且存在加重肿瘤免疫抑制微环境的风险。恶性肿瘤化疗后的骨髓抑制在中医上属于“血虚”“虚劳”“血证”等范畴，传统中药单味药、经典方剂以益气养血为骨髓抑制的治疗原则，近年来临床研究及报道表明中医药与放化疗药物联用，能起到减毒增效的作用，能使患者按时足量地完成放化疗，改善预后。
2、人参益元颗粒具有益气补血、扶正培本的功效。用于治疗术后或恶性肿瘤化疗后所致骨髓抑制及免疫功能低下。是由人参，黄芪，白芍、白术、鸡血藤、炙甘草组成。方中药味，人参与黄芪配伍，益元养阴，补中益气，升阳固表，共为君药；白术健脾，助人参、黄芪益气补脾；白芍养血柔肝和营，均为臣药；鸡血藤活血补血，与其他药物共用，奏补而不滞之功，是为佐药；炙甘草为使，益气和中，调和诸药。诸药合用从而达到益气补血、扶正培本的功效。
3、在本专利技术完成前，以人参益元颗粒含有的化成分为指标建立指纹图谱的
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于，提供一种人参益元颗粒的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，采用该方法构建的指纹图谱能够全面地反映人参益元颗粒整体化学成分，为人参益元颗粒的整体质量控制及评价提供了有效手段，旨在解决现有技术中没有关于人参益元颗粒的指纹图谱文献报道的缺陷，有效的控制了人参益元颗粒的质量。
2、本专利技术目的之二在于，经过系统的成分指认和药品不同批次共有峰的单味药材归属，较全面的反应人参益元颗粒中各成分的现状，能够为人参益元颗粒质量提供参考依据。
3、本专利技术采用如下的技术方案：一种人参益元颗粒的指纹图谱检测方法，采用高效液相色谱法测定其指纹图谱。具体的，所述的人参益元颗粒的指纹图谱检测方法包括以下步骤：
4、采用80％甲醇对人参益元颗粒进行提取，提取液作为供试品溶液；取原儿茶酸、原儿茶醛、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、染料木素、甘草酸、白术内酯ⅲ对照品，甲醇溶解，作为对照品溶液；将所述对照品溶液及供试品溶液分别进行高效液相色谱分析，以对照品溶液的色谱峰为基准，得到人参益元颗粒指纹图谱。
5、优化地，所述人参益元颗粒重量为0.2～2g，80％甲醇的用量为：20～200ml。
6、优化地，所述提取在超声条件下进行，所述超声的功率为200～300w，频率为30～50khz；所述提取的时间为20～40min。
7、优选的，进行所述高效液相色谱分析时，流动相a为乙腈，流动相b为0.02～0.2％的磷酸水溶液；所述流动相体系的流速为0.7～1.2ml/min；采用梯度洗脱方式，梯度洗脱过程中，流动相a、b的比例变化为：0-10min，3％a；10-15min，3-10％a；15-35min，10-15％a；35-65min，15-30％a；65-90min，30-40％a；90-105min，40-80％a。
8、优选地，进行所述高效液相色谱分析时，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱规格为：250×4.60mm；柱温为20～40℃；检测波长为210～360nm；进样体积为5～15μl。
9、优选地，进行所述高效液相色谱分析时，理论塔板数按芍药苷峰计算不低于5000。
10、优选地，所述人参益元颗粒指纹图谱含有21个共有峰，其中4、5、8、10、12、18、19、21号色谱峰分别被指认为原儿茶酸、原儿茶醛、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、染料木素、甘草酸、白术内酯ⅲ。
11、优选地，所述21个共有峰分别归属于白芍、白术、甘草、黄芪、鸡血藤、人参等六味药材；其中1号峰归属于人参、黄芪，2号峰归属于白芍、白术，3号峰归属于白芍、鸡血藤，4号峰归属于鸡血藤，5号峰归属于鸡血藤，6号峰归属于甘草，7号峰归属于白芍，8号峰归属于白芍，9号峰归属于甘草、黄芪，10号峰归属于甘草，11号峰归属于白芍，12号峰归属于黄芪，13号峰归属于人参，14号峰归属于白芍，15号峰归属于甘草、黄芪、鸡血藤，16号峰归属于甘草，17号峰归属于白芍，18号峰归属于鸡血藤，19号峰归属于甘草，20号峰归属于甘草，21号峰归属于白术。
12、本专利技术提供了上述技术方案所述人参益元颗粒hplc指纹图谱的构建方法得到的人参益元颗粒指纹图谱。
13、本专利技术提供了上述技术方案所述人参益元颗粒指纹图谱在人参益元颗粒质量控制中的应用。
14、本专利技术的有益效果体现在：
15、1、本专利技术建立了10批人参益元颗粒的hplc指纹图谱，相似度均大于0.90，标记了21个共有峰，涵盖了7味中药，可以更加全面的反应人参益元颗粒所含有的化学信息，更好的表征其质量。
16、2、由于指纹图谱不是为了测定某个成分的精确含量，而是要充分反映化学成分的信息，因此，本专利技术选择在230nm波长处进行测定，其出峰较多，反映的信息较完全，各个峰吸收值良好，基线平稳。
17、3、本专利技术建立的高效液相指纹图谱方法首次实现了对人参益元颗粒全方的质量控制，不是对单一化合物或药材进行鉴别，克服了现有质量控制方法的单一性和片面性问题，能更有效地指导投料、严格规范生产操作，确保临床用药安全、有效。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种人参益元颗粒HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述人参益元颗粒重量为0.2～2g，80％甲醇的用量为：20～200mL。
3.根据权利要求2所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述提取在超声条件下进行，所述超声的功率为200～300W，频率为30～50kHz；所述提取的时间为20～40min。
4.根据权利要求1所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，进行所述高效液相色谱分析时，流动相A为乙腈，流动相B为0.02～0.2％的磷酸水溶液；所述流动相体系的流速为0.7～1.2mL/min；采用梯度洗脱方式，梯度洗脱过程中，流动相A、B的比例变化为：0-10min，3％A；10-15min，3-10％A；15-35min，10-15％A；35-65min，15-30％A；65-90min，30-40％A；90-105min，40-80％A。
5.根据权利要求1所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构
6.根据权利要求1所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，进行所述高效液相色谱分析时，理论塔板数按芍药苷峰计算不低于5000。
7.根据权利要求1～6任一项所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述人参益元颗粒指纹图谱含有21个共有峰，其中4、5、8、10、12、18、19、21号色谱峰分别被指认为原儿茶酸、原儿茶醛、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、染料木素、甘草酸、白术内酯Ⅲ。
8.根据权利要求7所述的人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述21个共有峰分别归属于白芍、白术、甘草、黄芪、鸡血藤、人参等六味药材；其中1号峰归属于人参、黄芪，2号峰归属于白芍、白术，3号峰归属于白芍、鸡血藤，4号峰归属于鸡血藤，5号峰归属于鸡血藤，6号峰归属于甘草，7号峰归属于白芍，8号峰归属于白芍，9号峰归属于甘草、黄芪，10号峰归属于甘草，11号峰归属于白芍，12号峰归属于黄芪，13号峰归属于人参，14号峰归属于白芍，15号峰归属于甘草、黄芪、鸡血藤，16号峰归属于甘草，17号峰归属于白芍，18号峰归属于鸡血藤，19号峰归属于甘草，20号峰归属于甘草，21号峰归属于白术。
9.权利要求1～8任一项所述人参益元颗粒HPLC指纹图谱的构建方法得到的人参益元颗粒指纹图谱。
10.权利要求9所述人参益元颗粒指纹图谱在人参益元颗粒质量控制中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种人参益元颗粒hplc指纹图谱构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的人参益元颗粒hplc指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述人参益元颗粒重量为0.2～2g，80％甲醇的用量为：20～200ml。
3.根据权利要求2所述的人参益元颗粒hplc指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述提取在超声条件下进行，所述超声的功率为200～300w，频率为30～50khz；所述提取的时间为20～40min。
4.根据权利要求1所述的人参益元颗粒hplc指纹图谱的构建方法，其特征在于，进行所述高效液相色谱分析时，流动相a为乙腈，流动相b为0.02～0.2％的磷酸水溶液；所述流动相体系的流速为0.7～1.2ml/min；采用梯度洗脱方式，梯度洗脱过程中，流动相a、b的比例变化为：0-10min，3％a；10-15min，3-10％a；15-35min，10-15％a；35-65min，15-30％a；65-90min，30-40％a；90-105min，40-80％a。
5.根据权利要求1所述的人参益元颗粒hplc指纹图谱的构建方法，其特征在于，进行所述高效液相色谱分析时，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱规格为250×4.60mm，5μm；柱温为20～40℃；检测波长为210～360nm；进样体积为5～15μl。
6.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：南敏伦，司学玲，刘建璇，林艳玲，赵昱玮，赫玉芳，吴荻，赵建慧，李锦锦，马洋，
申请(专利权)人：吉林省中医药科学院吉林省中医药科学院第一临床医院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。