【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及肿瘤标志物，更具体地，涉及检测rip3 r486甲基化修饰的试剂在肿瘤诊断、预后预测中的应用，尤其是在肠癌诊断、预后预测中的应用。
技术介绍
1、肿瘤是危险人类健康与生命的重大疾病。临床上运用手术切除、放化疗及靶向治疗等手段治疗肿瘤，但肿瘤治疗后复发且恶化仍然是普遍现象，成为治愈肿瘤最主要的挑战。绝大多数肿瘤患者因为手术等治疗后复发而最终死亡。肿瘤预后分析标志物，既可以帮助建立免疫治疗方案，还可以评估肿瘤术后复发，并采取针对性的术后干预治疗策略从而改善肿瘤预后，对于最终治愈肿瘤具有重要意义。虽然目前已经有报道多种肿瘤预后分析标志物，包括肿瘤免疫细胞浸润、癌基因或者抑癌基因等。然而，大多数肿瘤诊断和预后分析标志物检测假阳性比率仍非常高，尤其是各种恶性肿瘤标志物尚未真正发现，这给肿瘤诊断和治疗带来了难题。
2、肿瘤程序性坏死信号通路是与肿瘤恶性进展密切相关的重要信号通路，rip3(受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶)作为程序性坏死信号通路上游重要的信号因子，参与肿瘤恶性进展过程。近年来的研究报道表明，肿瘤程序性坏死细胞通过分泌损伤相关分子模式(damp)，募集mdsc(髓系来源免疫抑制细胞)，导致肿瘤免疫逃逸微环境形成，抑制t细胞抗肿瘤免疫反应，从而促进肿瘤的恶性进展。通过敲除或小分子失活rip3抑制肿瘤程序性坏死通路，在多种肿瘤如肠癌、胰腺癌中激发抗肿瘤免疫，从而抑制杀伤肿瘤。因此，进一步探讨rip3与肿瘤发展之间的关系，对于肿瘤的诊断治疗及预后分析研究具有重要意义。
3、中国专利cn108
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供甲基转移酶prmt1或rip3 r486甲基化修饰蛋白作为标志物在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
2、本专利技术的第二个目的在于提供检测甲基转移酶prmt1表达水平的试剂或检测rip3r486甲基化修饰表达水平的试剂在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
3、本专利技术的第三个目的在于提供一种用于肿瘤诊断和预后的试剂盒。
4、本专利技术上述目的通过以下技术方案予以实现：
5、本专利技术通过免疫印迹法发现rip3发生单甲基化和非对称性二甲基化，根据软件预测与质谱分析获得rip3甲基化修饰位点位于第486位精氨酸，通过多克隆抗体的制备获得rip3 r486甲基化修饰特异性抗体，同时发现甲基转移酶prmt1催化rip3甲基化修饰；通过检测肠癌肿瘤组织中prmt1和rip3 r486甲基化修饰水平，显示prmt1和rip3 r486甲基化修饰在肿瘤组织中表达显著正相关，且prmt1和rip3 r486甲基化修饰水平与肿瘤患者的预后呈明显正相关。表明甲基化修饰酶prmt1和rip3 r486甲基化修饰蛋白可以作为肿瘤诊断和/或肿瘤患者预后预测的标志物。
6、因此，本专利技术首先提供甲基转移酶prmt1或rip3 r486甲基化修饰蛋白作为标志物在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。所述prmt1和rip3 r486甲基化修饰在肿瘤组织中表达显著正相关，且prmt1和rip3 r486甲基化修饰水平与肿瘤患者的预后呈明显正相关。
7、具体地，所述rip3 r486甲基化修饰为rip3蛋白第486位精氨酸发生单甲基化和非对称性二甲基化，所述rip3的氨基酸序列如seq id no.1所示。
8、本专利技术还提供检测甲基转移酶prmt1表达水平的试剂或检测rip3 r486甲基化修饰表达水平的试剂在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
9、优选地，所述肿瘤为肠癌。
10、优选地，所述产品为试剂盒。
11、本专利技术还提供一种用于肿瘤诊断和预后的试剂盒，所述试剂盒包含检测甲基转移酶prmt1表达水平的试剂和/或检测rip3 r486甲基化修饰表达水平的试剂。
12、优选地，所述检测甲基转移酶prmt1表达的试剂为prmt1蛋白的特异性抗体。
13、优选地，所述检测rip3 r486甲基化表达水平的试剂为rip3 r486甲基化修饰特异性抗体。
14、进一步优选地，所述rip3 r486甲基化修饰特异性抗体的制备方法如下：先将rip3抗原多肽与载体蛋白偶联形成免疫原并免疫宿主动物，再通过特异性亲和纯化方法获得特异性识别rip3 r486甲基化修饰的抗体。
15、进一步优选地，所述抗原多肽序列为：gkg(r-me2[asymmetrical])glq。
16、进一步优选地，所述载体蛋白为钥孔血蓝蛋白。
17、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
18、本专利技术提供了甲基转移酶prmt1或rip3 r486甲基化修饰蛋白作为标志物在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。本专利技术研究显示prmt1和rip3 r486甲基化修饰在肿瘤组织中表达显著正相关，且prmt1和rip3 r486甲基化修饰水平与肿瘤患者的预后呈明显正相关。表明甲基化修饰酶prmt1和rip3 r486甲基化修饰蛋白可以作为肿瘤诊断和/或肿瘤患者预后预测的标志物，能够快速、准确、清楚地表征肿瘤预后情况，尤其适用于肠癌的诊断和/或预后预测，为临床诊断与治疗方案提供了重要参照依据。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.甲基转移酶PRMT1或RIP3 R486甲基化修饰蛋白作为标志物在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
2.检测甲基转移酶PRMT1表达水平的试剂或检测RIP3 R486甲基化修饰表达水平的试剂在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，所述肿瘤为肠癌。
4.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，所述产品为试剂盒。
5.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述检测甲基转移酶PRMT1表达的试剂为PRMT1蛋白的特异性抗体。
6.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述检测RIP3 R486甲基化表达水平的试剂为RIP3 R486甲基化修饰特异性抗体。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述RIP3 R486甲基化修饰特异性抗体的制备方法如下：先将RIP3抗原多肽与载体蛋白偶联形成免疫原并免疫宿主动物，再通过特异性亲和纯化方法获得特异性识别RIP3 R486甲基化修饰的抗体。
8.根权利要求7所述应用，其特征在于，所述抗
9.一种用于肿瘤诊断和预后的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含检测甲基转移酶PRMT1表达水平的试剂和/或检测RIP3 R486甲基化修饰表达水平的试剂。
10.根据权利要求9所述试剂盒，其特征在于，所述检测甲基转移酶PRMT1表达的试剂为PRMT1蛋白的特异性抗体；所述检测RIP3 R486甲基化表达水平的试剂为RIP3 R486甲基化修饰特异性抗体。
...【技术特征摘要】
1.甲基转移酶prmt1或rip3 r486甲基化修饰蛋白作为标志物在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
2.检测甲基转移酶prmt1表达水平的试剂或检测rip3 r486甲基化修饰表达水平的试剂在制备肿瘤诊断和/或预测肿瘤患者预后的产品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，所述肿瘤为肠癌。
4.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，所述产品为试剂盒。
5.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述检测甲基转移酶prmt1表达的试剂为prmt1蛋白的特异性抗体。
6.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述检测rip3 r486甲基化表达水平的试剂为rip3 r486甲基化修饰特异性抗体。
7.根据权利要求6所...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。