【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于酶工程领域，具体涉及一种可水解代谢t-2毒素与fb1的猪羧酸酯酶plef2，可用于处理受t-2毒素与fb1污染的农作物和饲料。
技术介绍
1、t-2毒素(t-2toxin)是由多种真菌产生的次级代谢产物，属于a型单端孢霉烯族化合物。t-2毒素具有四环倍半萜类c-12，c-13-环氧三萜-9-烯环，其中c-12，c-13-环氧环属于毒性基团。t-2毒素具有强烈毒性，可包括基因与细胞毒性、血液毒性、消化系统与肝脏毒性、免疫毒性、神经毒性和生殖发育毒性，其广泛存在于农产品、饲料和食品中，可严重危害人和动物的健康。人和动物摄入受到t-2毒素污染的食物后，可引起呕吐、腹泻、发烧等急性中毒症状。同时t-2毒素可抑制生物体中蛋白质的合成，并且可引起细胞dna的损伤。
2、伏马毒素(fumonisin)是由串珠镰刀菌、轮状镰刀菌等镰刀菌产生的一种水溶性的次级代谢产物。其骨架结构是由20个碳组成的直链，其中的氨基、羟基和酯基分布在直链两侧。伏马毒素热稳定性很强，100℃下30min无法破坏伏马毒素的结构，在食品和饲料加工过程中难以降解伏马毒素。目前研究发现伏马毒素共有11种，fb1、fb2、fb3是最常见的存在形式，其中伏马毒素b1(fb1)占总量的70％，毒性在11种伏马毒素中毒性最强。伏马毒素具有神经毒性、免疫毒性和致癌性等毒性作用。饲料中伏马毒素的污染不仅影响畜禽健康养殖，而且将通过食物链长期威胁人类健康。
3、猪羧酸酯酶(carboxylesterase)是一种由三个亚基组成的一种丝氨酸水解酶，在猪肝
4、本专利技术采用大肠杆菌表达出的一种猪羧酸酯酶同工酶，具有较强的t-2毒素与fb1代谢活性，对农作物和饲料脱毒具有巨大的实用价值。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种能同时代谢t-2毒素与fb1的猪羧酸酯酶亚型。
2、本专利技术的另一目的在于提供一种新的猪羧酸酯酶亚型plef2的核苷酸序列，对其进行原核表达以获得单一组分高纯度的酶。
3、本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
4、一种猪羧酸酯酶亚型plef2基因，将该基因连接至pet15b载体上，获得重组载体pet15b-ple。
5、一种含有重组载体pet15b-plef2的pgro7-origami2tm2(de3)细胞，所述细胞由该重组载体转化宿主细胞pgro7-origami2tm2(de3)而得。
6、一种含有重组载体pet15b-plef2的pgro7-origami2tm2(de3)细胞表达的重组猪羧酸酯酶亚型ple。
7、一种猪羧酸酯酶亚型plef2在降解t-2毒素与fb1毒素中的应用。
8、一种猪羧酸酯酶亚型plef2在降解t-2毒素与fb1毒素时的最适ph和温度条件的确定。
9、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术提供了一种重组猪羧酸酯酶亚型plef2蛋白，首次应用于t-2毒素与fb1的降解。猪羧酸酯酶亚型ple蛋白可应用于处理含有t-2毒素与fb1的材料，分别生成毒性更低的ht-2和hfb1，可应用于食品、饲料、农作物、粮油等材料的脱毒处理。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.SEQ ID NO：1所示一种猪羧酸酯酶亚型PLEF2在降解T-2毒素与FB1中的应用。
2.SEQ ID NO：2所示一种猪羧酸酯酶亚型PLEF2基因在降解T-2毒素与FB1中的应用。
3.权利要求1所述的猪羧酸酯酶亚型PLEF2，降解T-2毒素的最适pH条件为8.0，最适温度条件为40℃，5小时后该酶对T-2毒素降解率可达到71.63％。
4.权利要求1所述的猪羧酸酯酶亚型，降解FB1的最适pH条件为8.0，最适温度条件为37℃，30分钟后该酶对FB1降解率可达到98.11％。
【技术特征摘要】
1.seq id no：1所示一种猪羧酸酯酶亚型plef2在降解t-2毒素与fb1中的应用。
2.seq id no：2所示一种猪羧酸酯酶亚型plef2基因在降解t-2毒素与fb1中的应用。
3.权利要求1所述的猪羧酸酯酶亚型plef2，降...
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