【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药生物，具体涉及一种人动脉组织细胞悬液酶解方法。
技术介绍
1、单细胞测序技术是一种通过细胞内转录组表达，结合生物信息学方法，对目标样本中每个细胞的种类及功能进行鉴别与分析的基因测序技术。该技术需要以细胞活性好的单细胞悬液作为平台进行实验，因此对于组织的单细胞测序，需要通过酶解消化的方法将组织消化为细胞悬液，这一过程需要多种酶的参与，而对于酶的种类、浓度、消化的时间都有严格的控制。因此，每一种消化的方案都需要长期的预实验探索。现阶段，各单细胞测序公司都有自己的酶解方案。
2、病变的人动脉组织根据不同的疾病会发生不同的器质性改变。例如，动脉粥样硬化的血管内膜会出现斑块，晚期甚至出现钙化，管壁坚硬如石头；动脉瘤和动脉夹层的血管管壁可变薄如纸易破；动脉炎的血管则因为炎症的原因出现纤维蛋白、胶原蛋白、弹性蛋白的增生使管壁韧性十足。这其中动脉粥样硬化和发生炎症的血管无疑会使血管管壁质地变硬，在制作这类病变血管的细胞悬液时，难度也会增加。若实验目的仅是针对平滑肌细胞、内皮细胞、纤维母细胞等结构细胞时，通常仅需选择消化效能...
【技术保护点】
1.一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，包括动脉组织样本处理、酶解终止试剂配制、动脉组织酶解消化和细胞悬液后处理步骤；
2.根据权利要求1所述的一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，所述动脉组织样本处理步骤包括：用磷酸缓冲盐溶液将新鲜的动脉组织样本冲洗干净，以减少血液残留，将清洗后的动脉血管壁样本剪至直径为1-2mm的碎片，置于细胞培养皿中备用。
3.根据权利要求1所述的一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，所述动脉组织酶解消化步骤包括：将动脉血管壁样本置于组织消化液中，置于35-40℃恒温箱中消化50-80分钟，期间每8-...
【技术特征摘要】
1.一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，包括动脉组织样本处理、酶解终止试剂配制、动脉组织酶解消化和细胞悬液后处理步骤；
2.根据权利要求1所述的一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，所述动脉组织样本处理步骤包括：用磷酸缓冲盐溶液将新鲜的动脉组织样本冲洗干净，以减少血液残留，将清洗后的动脉血管壁样本剪至直径为1-2mm的碎片，置于细胞培养皿中备用。
3.根据权利要求1所述的一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，所述动脉组织酶解消化步骤包括：将动脉血管壁样本置于组织消化液中，置于35-40℃恒温箱中消化50-80分钟，期间每8-15分钟吹打混合液1分钟，消化结束后，使用细胞筛过滤掉组织残渣，同时使用酶解终止试剂终止酶解反应。
4.根据权利要求1所述的一种人动脉组织细胞悬液酶解方法，其特征在于，所述细胞悬液后处理步骤包括：将终止酶解反应后的细胞悬液使用水平离心机200-500g离心8-15分钟，弃上清液，使用pbs缓冲液重悬沉淀后，水平离心机200-500g离心8-15分钟，弃上清液，此步骤重复1-3次后即得人动脉组织的单细胞悬液样本。
5.根据权利要求1...
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