【技术实现步骤摘要】
本申请涉及动物源真皮脱细胞支架的，更具体地说，它涉及一种玻尿酸修饰的脱细胞支架及其制备方法。
技术介绍
1、玻尿酸是一种多糖类化合物，也被称为透明质酸。它在人体内广泛存在于结缔组织、皮肤、关节液等处，起到保湿、润滑、填充等重要功能。在医学美容领域，玻尿酸被广泛应用于填充面部皱纹、增加面部轮廓、改善皮肤质地等方面。通过将玻尿酸注射到皮肤的特定部位，可以填充细纹、皱纹和凹陷处，使皮肤更平滑、紧致和年轻。
2、但是玻尿酸在生物组织内很容易发生自由基裂解，并形成非交联型的玻尿酸碎片，接着会转变成水与二氧化碳，从而影响玻尿酸的皮肤美容效果。
技术实现思路
1、为了延长玻尿酸的生命周期，本申请提供一种玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法。
2、第一方面，本申请提供一种玻尿酸修饰的脱细胞支架，采用如下的技术方案：
3、一种玻尿酸修饰的脱细胞支架，所述玻尿酸修饰的脱细胞支架由脱细胞支架与交联玻尿酸微球通过明胶水凝胶复合而得，所述交联玻尿酸微球为烟酰胺、玻尿酸、含有多库酯钠的正己烷及乙烯砜反应而得。
4、动物源真皮脱细胞支架是一种用于组织工程和再生医学的生物材料。它是从动物皮肤中提取的真皮经过特殊处理去除细胞，留下支架结构和天然的胶原蛋白网络。
5、脱细胞支架具有多种优点。首先，它作为一种生物活性支架，具有天然的胶原蛋白基质和支持细胞外基质形成的能力。这使得它能够为周围组织提供结构支持，并促进细胞附着、增殖和分化。其次，脱细胞支架具有良好的生物
6、明胶水凝胶是一种天然蛋白质，其具有良好的凝胶效果及增稠效果，同时还具有优良的生物相容性，因此当明胶水凝胶与脱细胞支架混合时，明胶水凝胶可以对脱细胞支架进行附着连接。而且，由于明胶水凝胶上含有大量的羟基和氨基，而玻尿酸上含有大量的羧基，而羧基与羟基或氨基均可以发生反应连接，进而形成玻尿酸-脱细胞生物支架-明胶水凝胶交联网络，促使脱细胞生物支架及明胶水凝胶同时对玻尿酸进行保护，有效延长玻尿酸的生命周期，同时提高玻尿酸对皮肤的填充修复效果。另外，通过乙烯砜对玻尿酸进行微球化处理也可以延长玻尿酸的生命周期、机械性质及美容效果。
7、第二方面，本申请提供一种玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，采用如下的技术方案：
8、一种玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，包括以下步骤：
9、交联玻尿酸微球制备：将烟酰胺添加至玻尿酸中搅拌均匀，随后滴定至含有多库酯钠的正己烷中进行混合搅拌，之后加入乙烯砜进行反应，最后用去离子水冲洗微粒，过滤冷冻干燥，得到交联玻尿酸微球；
10、脱细胞支架制备：首先将动物真皮用pbs缓冲液清洗，然后用纱布进行包裹，随后进行冻融循环处理；之后通过细胞脱洗液进行脱细胞处理，得到脱细胞生物支架；
11、脱细胞支架水凝胶制备：将脱细胞生物支架添加至明胶水凝胶中，随后升温至35℃进行恒温搅拌，得到脱细胞支架水凝胶；
12、玻尿酸修饰的脱细胞支架制备：将脱细胞支架水凝胶与交联玻尿酸微球进行混合，随后升温至45℃并持续搅拌，得到玻尿酸修饰的脱细胞支架。
13、优选的，所述交联玻尿酸微球制备中，所述含多库酯钠的正己烷中多库酯钠的浓度为0.1-0.3mol/l，所述烟酰胺、玻尿酸、含多库酯钠的正己烷及乙烯砜的质量比例为（0.6-1.0）：（2-4）：（4-6）：（0.8-1.2）。
14、在制备交联玻尿酸微球中，各组分采用上述质量比例时，制备得到的玻尿酸微球将具有更为均匀的粒径，从而有效提高玻尿酸的美容效果。
15、优选的，所述脱细胞支架制备中，所述细胞脱洗液包括pbs缓冲液、kcl/triton x-100溶液、tris缓冲液、胰蛋白酶溶液及核酸酶溶液。
16、优选的，所述脱细胞支架制备中，脱细胞处理主要包括七次洗脱，一次洗脱、四次洗脱、七次洗脱均采用pgs溶液；二次洗脱采用kcl/triton x-100溶液；三次洗脱采用tris缓冲液；五次洗脱采用胰蛋白酶溶液；六次洗脱采用核酸酶溶液；
17、一次洗脱、二次洗脱、三次洗脱及四次洗脱的处理条件均为0-4℃，1-5h；五次洗脱及六次洗脱的处理条件均为30-40℃，12-18h，七次洗脱的处理条件为20-35℃，15-25h。
18、优选的，所述脱细胞支架制备中，脱细胞处理通过脱细胞处理瓶进行；
19、所述脱细胞处理瓶包括瓶盖、连接部及瓶身，所述连接部可拆卸连接于所述瓶盖与所述瓶身之间，所述瓶盖上设置有五个进液管，五个所述进液管分别用于输送pbs缓冲液、kcl/triton x-100溶液、tris缓冲液、胰蛋白酶溶液及核酸酶溶液；
20、所述连接部包括连接环、设置于所述连接环内的过滤板及螺纹连接于所述连接环的外周面的水浴环，所述水浴环中空设置，动物真皮纱布架设于过滤板上，五个所述进液管的出液口均朝向所述过滤板。
21、目前采用的脱细胞处理方法为添加化学试剂同时机械振荡，但是该方法需要在多次洗脱过程中取出动物真皮，同时去掉相应溶液，之后再换成其他溶液，循环往复，进而导致脱细胞处理操作较为繁琐。而且多次取出动物真皮还很容易造成污染。
22、当采用脱细胞处理瓶进行脱细胞处理时，工作人员可以直接通过进液管调整洗脱溶液，而且不需要取出动物真皮便可以进行下一次洗脱操作，有效简化脱细胞处理的操作。
23、优选的，所述瓶盖上设置有搅拌组件，所述搅拌组件包括驱动电机、连接盘及若干锁定针，所述驱动电机的输出轴穿出所述瓶盖并与所述连接盘固定连接，所述连接盘于所述连接部内自由转动，若干所述锁定针固定连接于所述连接盘上，所述锁定针穿入动物真皮纱布内。
24、在需要对真皮进行洗脱操作时，锁定针插入真皮纱布内，随后开启驱动电机，驱动电机便可以驱使连接盘发生转动，而连接盘则通过锁定针迫使真皮纱布发生转动，从而促使对真皮的洗脱操作更为均匀有效。
25、优选的，所述连接部上设置有锁定组件，所述锁定组件包括压缩弹簧、束环套及若干设置于所述连接部的端部的锁定片，若干所述锁定片以所述连接部的轴线为中心周向均匀间隔设置，所述锁定片远离所述连接部的一端设置有锁定块，若干所述锁定块合拢形成锁定环；
26、所述压缩弹簧及所述束环套均滑移套设于所述连接部上，所述压缩弹簧的一端与所述水浴环抵接，所述压缩弹簧的另一端与所述束环套抵接，所述束环套的另一端与所述锁定环抵接；所述瓶盖上设置有连接管，所述连接管的外周面开设有连接槽，所述锁定环嵌设于所述连接槽内。
27、当需要将瓶盖与连接部进行连接时，工作人员可以控制束环套向靠近水浴环的方向移动，此时，束环套解除对锁定片的限位，之后迫使锁定片向外形变，进而将锁定环嵌设于连接槽内。之后只要松开束环套，压缩弹簧便可以迫使束环套复位，而本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种玻尿酸修饰的脱细胞支架，其特征在于：所述玻尿酸修饰的脱细胞支架由脱细胞支架与交联玻尿酸微球通过明胶水凝胶复合而得，所述交联玻尿酸微球为烟酰胺、玻尿酸、含有多库酯钠的正己烷及乙烯砜反应而得。
2.一种权利要求1所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述交联玻尿酸微球制备中，所述含多库酯钠的正己烷中多库酯钠的浓度为0.1-0.3mol/L，所述烟酰胺、玻尿酸、含多库酯钠的正己烷及乙烯砜的质量比例为（0.6-1.0）：（2-4）：（4-6）：（0.8-1.2）。
4.根据权利要求3所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述脱细胞支架制备中，所述细胞脱洗液包括PBS缓冲液、KCl/Triton X-100溶液、Tris缓冲液、胰蛋白酶溶液及核酸酶溶液。
5.根据权利要求4所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述脱细胞支架制备中，脱细胞处理主要包括七次洗脱，一次洗脱、四次洗脱、七次洗脱均采用PGS溶液；二次
6.根据权利要求5所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述脱细胞支架制备中，脱细胞处理通过脱细胞处理瓶进行；
7.根据权利要求6所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述瓶盖（1）上设置有搅拌组件（12），所述搅拌组件（12）包括驱动电机（121）、连接盘（122）及若干锁定针（123），所述驱动电机（121）的输出轴穿出所述瓶盖（1）并与所述连接盘（122）固定连接，所述连接盘（122）于所述连接部（2）内自由转动，若干所述锁定针（123）固定连接于所述连接盘（122）上，所述锁定针（123）穿入动物真皮纱布内。
8.根据权利要求7所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述连接部（2）上设置有锁定组件（24），所述锁定组件（24）包括压缩弹簧（241）、束环套（242）及若干设置于所述连接部（2）的端部的锁定片（243），若干所述锁定片（243）以所述连接部（2）的轴线为中心周向均匀间隔设置，所述锁定片（243）远离所述连接部（2）的一端设置有锁定块（2441），若干所述锁定块（2441）合拢形成锁定环（244）；
9.根据权利要求6所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述连接部（2）内转动连接有封堵盘（25），所述封堵盘（25）的材质为橡胶，所述封堵盘（25）的上端面与所述过滤板（22）的下端面抵接，所述封堵盘（25）上开设有若干通孔（251），所述通孔（251）与所述过滤板（22）的过滤孔一一对应；所述封堵盘（25）的外周面设置有若干拨片（252），所述连接部（2）的外周面开设有若干滑槽（253），所述拨片（252）滑移连接于所述滑槽（253）内。
...【技术特征摘要】
1.一种玻尿酸修饰的脱细胞支架，其特征在于：所述玻尿酸修饰的脱细胞支架由脱细胞支架与交联玻尿酸微球通过明胶水凝胶复合而得，所述交联玻尿酸微球为烟酰胺、玻尿酸、含有多库酯钠的正己烷及乙烯砜反应而得。
2.一种权利要求1所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述交联玻尿酸微球制备中，所述含多库酯钠的正己烷中多库酯钠的浓度为0.1-0.3mol/l，所述烟酰胺、玻尿酸、含多库酯钠的正己烷及乙烯砜的质量比例为（0.6-1.0）：（2-4）：（4-6）：（0.8-1.2）。
4.根据权利要求3所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述脱细胞支架制备中，所述细胞脱洗液包括pbs缓冲液、kcl/triton x-100溶液、tris缓冲液、胰蛋白酶溶液及核酸酶溶液。
5.根据权利要求4所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述脱细胞支架制备中，脱细胞处理主要包括七次洗脱，一次洗脱、四次洗脱、七次洗脱均采用pgs溶液；二次洗脱采用kcl/triton x-100溶液；三次洗脱采用tris缓冲液；五次洗脱采用胰蛋白酶溶液；六次洗脱采用核酸酶溶液；
6.根据权利要求5所述的玻尿酸修饰的脱细胞支架的制备方法，其特征在于：所述脱细胞支架制备中，脱细胞处理通过脱细胞处理瓶进行；
7.根据权利要求6所述的玻尿酸修...
【专利技术属性】
技术研发人员：左一聪，吴俊凤，黄露苇，阳卫国，
申请(专利权)人：深圳市迈捷生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。