【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于一种肽类的制备方法，具体涉及一种大豆豆粕低聚肽及其制备方法。
技术介绍
1、低聚肽是指分子量≤1kda的小分子肽段，一般由2～10个氨基酸连接组成。相较于大分子的蛋白质，低聚肽能够直接被机体吸收，转运快，耗能低，并可加快体内毒素排出，进而起到延缓衰老的作用。此外，低聚肽因其分子量小、特异性强而具有多种生理功能，如免疫调节、调节血脂、降血压等等，在功能性食品、药品中具有潜在的研究前景。
2、大豆豆粕是大豆经压榨后产生的加工副产物，来源广、成本低、营养价值丰富，蛋白质含量高达70％，但其中含有大量的抗原蛋白，约占总蛋白的60％～80％，主要有大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白等，人体或动物摄入过量容易引起免疫应激，并产生过敏反应。因此，将难以消化的抗原蛋白转化为具有多种生物活性功能的低聚肽是当前研究的重点。
3、目前利用豆粕生产低聚肽的主要方法有微生物发酵和酶水解技术，利用微生物产蛋白酶使蛋白质肽键断裂，进而得到分子量相对较小的肽链，h.yan等利用枯草芽孢杆菌发酵豆粕，抗原蛋白含量由305.68mg/g降低至25.73mg/g，低聚肽含量显著增加，但由于微生物代谢产物较为复杂，水解产物较难控制，且耗时长。而酶水解技术效率高，耗时短，wangchen等利用胰蛋白酶处理豆粕蛋白质10h，低聚肽含量显著升高，但单一蛋白酶特异性较强，导致低聚肽产量仍较低。因此利用微生物发酵、酶水解两步处理既能够缩短处理时间，又能够提高低聚肽产量。如yuan wang等利用嗜热链球菌、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌发酵豆粕，并通过酸
4、另外，有研究表明，利用挤压技术预处理大豆蛋白能够改变大豆蛋白结构，进而影响其功能性质，但目前对于挤压技术是否能够使蛋白质空间结构充分舒展和其在发酵酶解过程中所发挥的协同作用尚不清楚。
5、鉴于此，申请此专利。
技术实现思路
1、为了克服现有技术不足，本方法利用双螺杆挤压技术处理大豆豆粕，通过黑曲霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌及纳豆芽孢杆菌四种高产蛋白酶的菌种结合酸性蛋白酶、碱性蛋白酶及中性蛋白酶水解豆粕，得到一种高产低聚肽的大豆豆粕处理方法，降低低聚肽生产成本及生产耗时，降低抗原蛋白含量，提升原料消化率，将有利于低聚肽的应用及未来功能性食品、药品的研究与开发。
2、本专利技术的目的是提供一种大豆豆粕低聚肽的制备方法。
3、本专利技术的另一个目的是提供一种大豆豆粕低聚肽。
4、根据本专利技术的具体实施方式的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，所述的方法包括以下步骤：
5、(1)预处理：将原料大豆豆粕利用双螺杆挤压机进行挤压，挤出条件如下：进料速度0.05kg/min、挤压温度130～170℃、豆粕水分含量18％～26％、螺杆转速110～150r/min；挤压完成后将双螺杆挤压机冷却至室温，将挤压后的大豆豆粕于60℃烘干至恒重，经粉碎后，过80目筛，即得预处理豆粕；
6、(2)发酵：将步骤(1)得到的预处理豆粕20～40g与10～30ml混合菌液混合均匀，将混合物于26～40℃恒温发酵12～60h后，于60℃烘干箱烘干至恒重，得到发酵豆粕；
7、所述的混合菌液为米曲霉菌液、黑曲霉菌液、枯草芽孢杆菌菌液和纳豆芽孢杆菌液的混合液，所述的米曲霉菌液、黑曲霉菌液、枯草芽孢杆菌菌液和纳豆芽孢杆菌液的质量比例为1：0.2～5：0.2～5：0.2～5；
8、混合菌液浓度约107cfu/ml，米曲霉和黑曲霉购自北京生物保藏中心，米曲霉编号为cgmcc 3.951，黑曲霉编号为as3.350，枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，枯草芽孢杆菌编号为cicc 20522，纳豆芽孢杆菌编号为cicc 20637；
9、(3)酶解：将步骤(2)得到的发酵豆粕溶于80～160ml蒸馏水中，加入混合蛋白酶，于35～50℃的温度下水解2～4h后，于100℃水浴10min，即得所述的低聚肽；
10、所述的混合蛋白酶为2500～4000u/g酸性蛋白酶，2500～4000u/g中性蛋白酶和2500～4000u/g碱性蛋白酶。
11、根据本专利技术的具体实施方式的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，所述的方法包括以下步骤：
12、(1)预处理：将原料大豆豆粕利用双螺杆挤压机进行挤压，挤出条件如下：进料速度0.05kg/min、挤压温度140～160℃、豆粕水分含量20％～24％、螺杆转速120～140r/min；挤压完成后将双螺杆挤压机冷却至室温，将挤压后的大豆豆粕于60℃烘干至恒重，经粉碎后，即得预处理豆粕；
13、(2)发酵：将步骤(1)得到的25～35g预处理豆粕与15～25ml混合菌液混合均匀，将混合物于30～35℃恒温发酵24～48h后，于60℃烘干箱烘干至恒重，得到发酵豆粕；
14、所述的混合菌液为米曲霉菌液、黑曲霉菌液、枯草芽孢杆菌菌液和纳豆芽孢杆菌液的混合液，所述的米曲霉菌液、黑曲霉菌液、枯草芽孢杆菌菌液和纳豆芽孢杆菌液的质量比例为1：0.5～2：0.5～2：0.5～2；
15、(3)酶解：将步骤(2)得到的发酵豆粕溶于100～140ml蒸馏水中，加入混合蛋白酶，于40～45℃的温度下水解2.5～3.5h后，于100℃水浴10min，即得所述的低聚肽；
16、所述的混合蛋白酶为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶，所述的酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶分别添加至2800～3500u/g酸性蛋白酶，2800～3500u/g中性蛋白酶及2800～3500u/g碱性蛋白酶。
17、根据本专利技术的具体实施方式的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，所述的方法包括以下步骤：
18、(1)预处理：将原料大豆豆粕利用双螺杆挤压机进行挤压，挤出条件如下：进料速度0.05kg/min、挤压温度150℃、豆粕水分含量22％、螺杆转速130r/min；挤压完成后将双螺杆挤压机冷却至室温，将挤压后的大豆豆粕于60℃烘干至恒重，经粉碎后，即得预处理豆粕；
19、(2)发酵：将步骤(1)得到的预处理豆粕30g与20ml混合菌液混合均匀，将混合物于32℃恒温发酵36h后，于60℃烘干箱烘干至恒重，得到发酵豆粕；
20、所述的混合菌液为米曲霉菌液、黑曲霉菌液、枯草芽孢杆菌菌液和纳豆芽孢杆菌液的混合液，所述的米曲霉菌液、黑曲霉菌液、枯草芽孢杆菌菌液和纳豆芽孢杆菌液的质量比例为1：1：1：1；
21、(3)酶解：将步骤(2)得到的发酵豆粕溶于120ml蒸馏水中，加入混合蛋白酶，于42℃的温度下本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的双螺杆挤压机购自济南赛百诺科技开发有限公司，型号为G30-IV，螺杆的长径比为32：1，输送和捏合螺杆的横截面为11 mm。
5.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）原料预处理后，大豆豆粕进行灭菌，灭菌条件为温度121 ℃、时间15 min。
6.利用如权利要求1-5所述的方法制得的低聚肽是由2～10个氨基酸构成的分子量小于1 KDa的肽链。
7.根据权利要求6所述的低聚肽，其特征在于，所述的低聚肽的抗原蛋白含量为0.48～1.06 g/kg。
8.根据权利要求6所述的低聚肽，其特征在于，所述的低聚肽的消化率为76.76%～97.93
...【技术特征摘要】
1.一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的一种大豆豆粕低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的双螺杆挤压机购自济南赛百诺科技开发有限公司，型号为g30-iv，螺杆的长径比为32：1，输送和捏合螺杆的横截面为11 mm。
【专利技术属性】
技术研发人员：张娜，王冰，许馨予，马春敏，边鑫，杨杨，王艳，刘晓飞，张光，
申请(专利权)人：哈尔滨商业大学，
类型：发明
国别省市：
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