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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物基因工程,具体涉及一种紫花苜蓿产jar1基因及其应用。
技术介绍
1、本部分的陈述仅仅是提供了与本专利技术相关的
技术介绍
信息,不必然构成在先技术。
2、紫花苜蓿(medicago sativa)作为豆科多年生牧草,是世界上种植面积最广泛的优良牧草之一,因其具有较高营养价值被称为“牧草之王”。植物分枝在植物的形态建成中具有重要作用,不仅决定植株高度、伸展度等形态指标,也影响生物量及结实量等经济指标。分枝数是影响苜蓿种植密度的重要因素,也是植物在生长发育过程中形成的一种重要农艺性状,是影响其株型结构的重要因素之一。萨如拉等研究发现影响苜蓿产量的主要因子是株高和侧枝数,并且苜蓿的品质也会极大影响其利用率。苜蓿是典型的异花授粉植物,其开花性状更是重要的农艺性状,苜蓿产量的积累主要发生在开花前,多数情况下可通过提前开花时间来提高苜蓿产量。
3、茉莉酰氨基酸结合物合成酶(jar1)可以催化茉莉酸(ja)形成茉莉酸的活性形式茉莉酸异亮氨基酸复合体(ja-ile),从而激活ja信号途径。研究表明jar1作为ja与ile结合的关键酶基因,促进ja-ile的形成的同时不仅调节植物的生长和发育,如萌发、衰老、果实成熟、根的生长、花粉发育和球茎形成、卷须的缠绕等,还参与植物对机械损害、病害、虫害等环境的胁迫做出防御响应。
4、有研究表明,茉莉酸异亮氨酸(ja-ile)是激活茉莉酸调节花朵发育和创伤应激反应的关键信号分子。并在拟南芥中构建jar1敲除突变体,发现突变体能够调节花骨朵发育,表现为影响花雄
技术实现思路
1、为实现上述目的,本专利技术的一个或多个实施例提供了如下技术方案:
2、第一方面,提供msjar1基因在调控植物开花时间上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、具体实施方式中,所述调控表现为提前开花时间。
4、第二方面,提供msjar1基因在提高植物侧枝数量上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示;所述侧枝为二级侧枝。
5、第三方面,提供含有msjar1基因的重组dna、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分在调控植物开花时间上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示;具体表现为提前开花时间。
6、第四方面,提供含有msjar1基因的重组dna、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分在在提高植物侧枝数量上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
7、第五方面,提供一种提前植物开花时间的方法,包括利用基因工程手段,在植物中过表达msjar1基因;所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示;
8、所述过表达的方式选自以下1)~5),或任选的组合:
9、1)通过导入具有所述基因的质粒;
10、2)通过增加植物染色体上所述基因的拷贝数;
11、3)通过改变植物染色体上所述基因的启动子序列;
12、4)通过将强启动子与所述基因可操作地连接;
13、5)通过导入增强子;
14、所述植物优选为双子叶植物,所述双子叶植物包括苜蓿、大豆;
15、优选地,采用农杆菌介导法将外源基因基因msjar1转入到中苜1号紫花苜蓿植株中,获得该基因过表达的转基因植株;
16、优选地,将msjar1基因构建到植物表达载体pcambia1300-35s-egfp上,转化农杆菌,然后通过遗传转化方法获得载有msjar1基因的紫花苜蓿中苜1号转化体,筛选转基因植株。
17、第六方面,提供一种提高植物侧枝数量的方法,包括利用基因工程手段,在植物中过表达msjar1基因;所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示;
18、所述过表达的方式选自以下1)~5),或任选的组合:
19、1)通过导入具有所述基因的质粒;
20、2)通过增加植物染色体上所述基因的拷贝数;
21、3)通过改变植物染色体上所述基因的启动子序列;
22、4)通过将强启动子与所述基因可操作地连接;
23、5)通过导入增强子;
24、所述侧枝为二级侧枝;
25、所述植物优选为双子叶植物,所述双子叶植物包括苜蓿、大豆;
26、优选地,采用农杆菌介导法将外源基因基因msjar1转入到中苜1号紫花苜蓿植株中,获得该基因过表达的转基因植株;
27、优选地,将msjar1基因构建到植物表达载体pcambia1300-35s-egfp上,转化农杆菌,然后通过遗传转化方法获得载有msjar1基因的中苜1号紫花苜蓿转化体,筛选转基因植株。
28、第七方面,提供第五方面或第六方面所述方法获得的转基因植物在植物育种中的应用。
29、第八方面,提供一种高效的苜蓿遗传转化方法,所述方法包括如下步骤:
30、1)将含有msjar1基因的农杆菌侵染液与待转化的外植体混合,倒入聚乙烯塑料袋中,采用抽真空、超声再抽真空的方式获得侵染后外植体;
31、2)将侵染后的外植体转移到共培养固体培养基上,培养至外植体变硬,边缘微微翘起;
32、3)将步骤2)中培养后的外植体转移至筛选培养基中后继代到愈伤培养基中培养,得愈伤组织;
33、4)将愈伤组织放置于分化培养基中培养;
34、5)将步骤4)所得愈伤组织放在含有筛选剂得生芽培养基中诱导培养,得到具有丛生芽外植体;
35、6)将步骤5)中丛生芽外植体放在生根培养基中生根培养,得到再生紫花苜蓿植株,实现紫花苜蓿遗传转化;
36、所述msjar1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示;
37、所述紫花苜蓿优选为中苜1号。
38、具体实施方式中,所述外植体为紫花苜蓿三出复叶;所述外植体表面轻划伤口;真空的条件为:抽气75s,在真空条件下静止10min;超声条件为:40khz,5min;
39、优选地,所述愈伤培养基的配方为:称取4.43g ms粉粉末,添加30g蔗糖,7.5g琼脂,2ml2,4-d,0.1ml6-bap,调节ph至5.8,加水定容至1l。
40、以上一个或多个技术方案存在以下有益效果:
41、本专利技术提供了msjar1基因及其应用。本专利技术提供了msjar1基因在调控植物开花时间、增加植物分支中的应用,所述ms本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.MsJAR1基因在调控植物开花时间上的应用,所述MsJAR1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述调控表现为提前开花时间。
3.MsJAR1基因在提高植物侧枝数量上的应用,所述MsJAR1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。所述侧枝为二级侧枝。
4.含有MsJAR1基因的重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分在调控植物开花时间上的应用,所述MsJAR1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示;具体表现为提前开花时间。
5.含有MsJAR1基因的重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分在在提高植物侧枝数量上的应用,所述MsJAR1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
6.一种提前植物开花时间的方法,其特征在于,包括利用基因工程手段,在植物中过表达MsJAR1基因;所述MsJAR1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
7.一种提高植物侧枝数量的方法,其特征在于,
8.权利要求6或7所述方法获得的转基因植物在植物育种中的应用。
9.一种高效的苜蓿遗传转化方法,所述方法包括如下步骤:
10.根据权利要求9所述的遗传转化方法,其特征在于,所述外植体为紫花苜蓿三出复叶;所述外植体表面轻划伤口;真空的条件为:抽气75s,在真空条件下静置10min;超声条件为:40kHz,5min;
...【技术特征摘要】
1.msjar1基因在调控植物开花时间上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述调控表现为提前开花时间。
3.msjar1基因在提高植物侧枝数量上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。所述侧枝为二级侧枝。
4.含有msjar1基因的重组dna、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分在调控植物开花时间上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序列如seq idno.1所示;具体表现为提前开花时间。
5.含有msjar1基因的重组dna、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分在在提高植物侧枝数量上的应用,所述msjar1基因的核苷酸序...
【专利技术属性】
技术研发人员:张志强,代蕊,陈崎,霍晓伟,爽爽,栗振义,石凤翎,
申请(专利权)人:内蒙古农业大学,
类型:发明
国别省市:
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