【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于间充质干细胞培养，特别是指一种人间充质干细胞无血清培养基。
技术介绍
1、间充质干细胞具有免疫调节和造血支持等多种成体细胞分化的能力，其来源广泛，可以从多种组织如骨髓、脐带、脂肪组织等中分离得到，而且易于外源基因导入表达，非常适合细胞治疗的临床应用。在培养过程中，如采用含有血清或动物源性物质的培养基会给间充质干细胞自我更新和分化带来不确定因素，造成分化过程出现误差，还可能在培养过程中引入污染，导致间充质干细胞被污染。因此，现有技术研制了无血清的人间充质干细胞无血清培养基，如invitrogen开发的msc sfm xenofree无血清培养基、加拿大stemcell公司开发的mesenculttm-xf medium无血清培养基、bd公司开发的bdmosaictm hmsc sfmedium和cellgenix开发的serum-free msc medium等。上述进口培养基虽具有与有血清的人间充质干细胞媲美的性能，但是价格昂贵，像市场上常用的加拿大stemcell开发的mesenculttm-xf medium无血清培养基，其售价高达为5400/500ml/kit，对于国内市场来说性价比不高，难以大规模产业化应用。如何设计一款成本低、性能优良的人间充质干细胞无血清培养基，使其既能提供足够营养物质维持细胞的良好生长，调控人间充质干细胞的品质，又适合大规模推广使用，是目前亟待解决的技术问题。
技术实现思路
1、为解决以上现有技术的不足，本专利技术提出了一种人间充质干细胞
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、一种人间充质干细胞无血清培养基，包括：氨基酸、维生素、无机盐、细胞因子和其他成份：
4、氨基酸包括：甘氨酸，丙氨酸，精氨酸，盐酸精氨酸，天冬酰胺，l-天冬酰胺，天冬氨酸，盐酸胱氨酸，胱氨酸，谷氨酸，l-谷氨酰胺，组氨酸，盐酸组氨酸一水物，异亮氨酸，亮氨酸，赖氨酸，盐酸赖氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，丝氨酸，苏氨酸，色氨酸，酪氨酸，缬氨酸；
5、维生素包括：生物素，氯化胆碱，d-泛酸钙，叶酸，烟酰胺，维生素b6，维生素b2核黄素，维生素b1硫胺素，微生素b12，肌醇，对氨基苯甲酸，抗坏血酸，棕榈酸，视黄醇乙酸酯，维生素e生育酚；
6、无机盐包括：氯化钙，硫酸镁，氯化钾，硝酸钾，氯化钠，磷酸二氢钠，磷酸氢二钠，亚硒酸钠，硝酸钙，硫酸铜；
7、细胞因子包括：igf-1，egf，bfgf，pdgf-bb，tgf-β1；
8、其他成份包括：d-葡萄糖，4-羟乙基哌嗪乙磺酸，酚红，丙酮酸钠，碳酸氢钠，谷胱甘肽，硫酸锌，次黄嘌呤，亚油酸，腐胺，胸苷，2-脱氧-d-核糖，硫酸腺嘌呤，腺苷-5-磷酸，5'-三磷酸腺苷，胆固醇，盐酸鸟嘌呤，核糖，吐温，尿嘧啶，黄嘌呤。
9、上述组分组成的人间充质干细胞无血清培养基可以保证人间充质干细胞的良好生长和繁殖，提供其培养所需的各种元素；而且，所添加的调控组分能够对培养的人间充质干细胞增殖速度进行调整，防止过度增长影响人间充质干细胞的品质；更重要的是，其成本较现有技术显著下降，经济效益可观。
10、优选的，氨基酸包括浓度以mg/l计的：甘氨酸35-45，丙氨酸20-30，精氨酸45-60，盐酸精氨酸35-50，天冬酰胺20-30，l-天冬酰胺10-15，天冬氨酸25-35，盐酸胱氨酸45-55，胱氨酸50-62，谷氨酸70-80，l-谷氨酰胺400-500，组氨酸12-20，盐酸组氨酸一水物15-25，异亮氨酸65-85，亮氨酸70-85，赖氨酸25-35，盐酸赖氨酸65-80，蛋氨酸20-25，苯丙氨酸45-55，脯氨酸35-45，丝氨酸30-40，苏氨酸65-80，色氨酸10-15，酪氨酸70-85，缬氨酸60-80；
11、维生素包括浓度以mg/l计的：生物素0.04-0.07，氯化胆碱2-3，d-泛酸钙2-3，叶酸2-3，烟酰胺2-3，维生素b6 2-3，维生素b2核黄素0.2-0.3，维生素b1硫胺素2-3，微生素b120.5-0.8，肌醇4-5，对氨基苯甲酸0.15-0.25，抗坏血酸20-30，棕榈酸0.0004-0.0006，视黄醇乙酸酯0.0004-0.0006，维生素e生育酚0.0004-0.0006；
12、无机盐包括浓度以mg/l计的：氯化钙160-200，硫酸镁85-105，氯化钾300-450，硝酸钾0.03-0.05，氯化钠5000-6000，磷酸二氢钠110-150，磷酸氢二钠150-170，亚硒酸钠0.007-0.01，硝酸钙15-25，硫酸铜0.0005-0.0015；
13、细胞因子包括浓度以mg/l计的：igf-1 0.6-1，egf 0.6-1，bfgf 0.6-1，pdgf-bb0.3-0.5，tgf-β1 0.15-0.25；
14、其他成份包括浓度以mg/l计的：d-葡萄糖2500-3000，4-羟乙基哌嗪乙磺酸2500-3500，酚红10-15，丙酮酸钠90-130，碳酸氢钠2000-3000，谷胱甘肽0.15-0.25，硫酸锌0.06-0.14，次黄嘌呤0.2-0.5，亚油酸0.0003-0.0008，腐胺0.0005-0.0015，胸苷0.1-0.3，2-脱氧-d-核糖0.4-0.6，硫酸腺嘌呤8-12，腺苷-5-磷酸1，5'-三磷酸腺苷0.1-0.3，胆固醇0.8-1.2，盐酸鸟嘌呤0.2-0.4，核糖0.3-0.7，吐温80 4-6，尿嘧啶0.2-0.4，黄嘌呤0.2-0.5。
15、进一步优选的，细胞因子还包括：lif，scf，il-3，il-6，bdnf，vegf，ctgf，bmp-2，ngf，mgf。
16、具体来说，细胞因子包括浓度以mg/l计的：lif0.15-0.25，scf0.5-0.8，il-30.15-0.25，il-6 0.15-0.25，bdnf0.005-0.015，vegf0.005-0.015，ctgf0.005-0.015，bmp-2 0.005-0.015，ngf0.005-0.015，mgf0.005-0.015。
17、进一步优选的，所述人间充质干细胞无血清培养基还包括蛋白成分，蛋白成分包括：重组人白，重组人转铁蛋白，层粘连蛋白ln，纤连蛋白fn，血浆蛋白，肌动蛋白，肌球蛋白，组织蛋白酶a，组织蛋白酶。
18、具体来说，蛋白成分包括浓度以mg/l计的：重组人白3-5，重组人转铁蛋白150-200，层粘连蛋白ln0.8-1.2，纤连蛋白fn0.8-1.2，血浆蛋白3.5-6，肌动蛋白1.5-2.5，肌球蛋白1.5-2.5，组织蛋白酶a 0.000005-0.000015，组织蛋白酶d0.000005-0.000015。
19、进一步优选的，所述人间本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：包括：氨基酸、维生素、无机盐、细胞因子和其他成份：
2.根据权利要求1所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述氨基酸包括浓度以mg/L计的：甘氨酸35-45，丙氨酸20-30，精氨酸45-60，盐酸精氨酸35-50，天冬酰胺20-30，L-天冬酰胺10-15，天冬氨酸25-35，盐酸胱氨酸45-55，胱氨酸50-62，谷氨酸70-80，L-谷氨酰胺400-500，组氨酸12-20，盐酸组氨酸一水物15-25，异亮氨酸65-85，亮氨酸70-85，赖氨酸25-35，盐酸赖氨酸65-80，蛋氨酸20-25，苯丙氨酸45-55，脯氨酸35-45，丝氨酸30-40，苏氨酸65-80，色氨酸10-15，酪氨酸70-85，缬氨酸60-80；
3.根据权利要求1所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述细胞因子还包括：LIF，SCF，IL-3，IL-6，BDNF，VEGF，CTGF，BMP-2，NGF，MGF。
4.根据权利要求3所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述细胞因子包括浓
5.根据权利要求1所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：还包括蛋白成分，所述蛋白成分包括：重组人白，重组人转铁蛋白，层粘连蛋白LN，纤连蛋白FN，血浆蛋白，肌动蛋白，肌球蛋白，组织蛋白酶A，组织蛋白酶。
6.根据权利要求5所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述蛋白成分包括浓度以mg/L计的：重组人白3-5，重组人转铁蛋白150-200，层粘连蛋白LN0.8-1.2，纤连蛋白FN0.8-1.2，血浆蛋白3.5-6，肌动蛋白1.5-2.5，肌球蛋白1.5-2.5，组织蛋白酶A0.000005-0.000015，组织蛋白酶D0.000005-0.000015。
7.根据权利要求1所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：还包括小分子化合物，所述小分子化合物包括：5-羟色胺，肾上腺素，前列腺素E2，GANT61，8-溴腺苷-3',5'-环单磷酸钠。
8.根据权利要求7所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述小分子化合物包括浓度以mg/L计的：5-羟色胺0.005-0.01，肾上腺素0.000005-0.000015，前列腺素E20.000005-0.000015，GANT61 3-4.15，8-溴腺苷-3',5'-环单磷酸钠3-4.15。
...【技术特征摘要】
1.一种人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：包括：氨基酸、维生素、无机盐、细胞因子和其他成份：
2.根据权利要求1所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述氨基酸包括浓度以mg/l计的：甘氨酸35-45，丙氨酸20-30，精氨酸45-60，盐酸精氨酸35-50，天冬酰胺20-30，l-天冬酰胺10-15，天冬氨酸25-35，盐酸胱氨酸45-55，胱氨酸50-62，谷氨酸70-80，l-谷氨酰胺400-500，组氨酸12-20，盐酸组氨酸一水物15-25，异亮氨酸65-85，亮氨酸70-85，赖氨酸25-35，盐酸赖氨酸65-80，蛋氨酸20-25，苯丙氨酸45-55，脯氨酸35-45，丝氨酸30-40，苏氨酸65-80，色氨酸10-15，酪氨酸70-85，缬氨酸60-80；
3.根据权利要求1所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述细胞因子还包括：lif，scf，il-3，il-6，bdnf，vegf，ctgf，bmp-2，ngf，mgf。
4.根据权利要求3所述的人间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述细胞因子包括浓度以mg/l计的：lif0.15-0.25，scf0.5-0.8，il-3 0.15-0.25，il-6 0.15-0.25，bdnf0.005-0.015，vegf0.005-0.015，ctgf0.005-0.015，bm...
【专利技术属性】
技术研发人员：李冬梅，
申请(专利权)人：利行智泉武汉医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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