【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多重pcr技术，具体涉及用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物。
技术介绍
1、珍珠鸡，又名为珠鸡、普通珠鸡，归为鸡形目(galliformes)珠鸡科(numididae)，学名为numida meleagris。珍珠鸡原产于非洲肯尼亚、几内亚等地，是一种生活在热带草原中的野禽。经过几十年的人工驯化，已培育成为家养禽类。珍珠鸡因具有肉质细嫩、味道鲜美、野味浓郁、蛋白质含量高、脂肪和胆固醇含量低，具有较高的营养价值。珍珠鸡对饲养条件不高，适应性强，具有很强的抗寒和耐热能力，抗病力、觅食能力强，食性广而杂，因此珍珠鸡饲养业具有投资少、成本低、周转快、效益高的特点。我国早在上世纪五十年代就开始从国外引进饲养，八十年代开始大规模人工驯化饲养，已被国家畜禽遗传资源委员会列为特禽，在禽类市场已有一定的影响力。随着生活水平的不断提高，人们对肉类的需求已由数量向质量转变。随着活禽市场的逐渐取消和饲养成本的不断增加，冰鲜肉/冷冻肉及分割肉的市场份额不断提升，以次充好的现象层出不穷。因此，研究动物源性食品安全检测技术，对食品动物源性成分进行准确鉴定，显得尤为重要。
2、对于肉源性成分的鉴定，普遍使用的是实时荧光定量pcr方法。该方法有较高的灵敏度，适合加工食品微量肉源成分检测，且能相对定量，因此该方法被广泛使用。然而，荧光定量pcr对有些物种的特异性探针和引物难以设计，且一套探针、引物仅对应某特定的单一的物种成分。也有使用通用引物或特异引物扩增测序的方法，对多种肉源性成分进行检测，但这种方法工作量大、成本高、还存在
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物，对珍珠鸡肉源具有较高特异性，可进行有效鉴定。
2、实现本专利技术的技术方案为：用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物，包括珍珠鸡特异性引物，其核苷酸序列为：
3、5’-ggtgatgggggtcttcttagc-3’。
4、进一步地，本专利技术提供的鉴定引物包括：
5、珍珠鸡特异引物：5’-ggtgatgggggtcttcttagc-3’
6、通用上游引物：5’-acgacctcgatgttggatca-3’
7、通用下游引物：5’-cggtctgaactcagatcacgta-3’。
8、本专利技术的另一个目的是提供包含上述用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物的试剂盒。
9、具体地，所述试剂盒中至少包括珍珠鸡特异引物：
10、5’-ggtgatgggggtcttcttagc-3’。
11、进一步地，本专利技术的试剂盒还包括：
12、通用上游引物：5’-acgacctcgatgttggatca-3’
13、通用下游引物：5’-cggtctgaactcagatcacgta-3’。
14、本专利技术的第三个目的是提供基于上述特异性鉴定引物的珍珠鸡肉源成分的多重pcr鉴定方法。
15、具体地，珍珠鸡肉源成分的多重pcr鉴定方法，取待鉴定肉源样品，置于裂解液中裂解后，提取基因组dna，pcr扩增，电泳；当电泳结果中，扩增产物只出现一条约100bp共有扩增条带时，判定样品为非珍珠鸡；当扩增产物同时出现约100bp共有扩增条带和240bp珍珠鸡特异条带时，判定样品为珍珠鸡；所述多重pcr扩增采用的引物如下：
16、通用上游引物：5’-acgacctcgatgttggatca-3’
17、通用下游引物：5’-cggtctgaactcagatcacgta-3’
18、珍珠鸡特异引物：5’-ggtgatgggggtcttcttagc-3’。
19、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
20、本专利技术提供珍珠鸡特异性引物对16s rrna进行常规pcr扩增，不需荧光定量pcr仪等昂贵设备，且扩增效果稳定，能够出现240bp特异性条带，有效地鉴定珍珠鸡肉源；而提供的通用引物，则可以有效避免假阴性。
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1.用于珍珠鸡肉源成分的多重PCR特异性鉴定引物，其特征是，包括珍珠鸡特异性引物，其核苷酸序列为5’-GGTGATGGGGGTCTTCTTAGC-3’。
2.根据权利要求1所述的用于珍珠鸡肉源成分的多重PCR特异性鉴定引物，其特征是，还包括以下通用引物：
3.包含权利要求1或2所述的用于珍珠鸡肉源成分的多重PCR特异性鉴定引物的试剂盒。
4.珍珠鸡肉源成分的多重PCR鉴定方法，其特征是，取待鉴定肉源样品，置于裂解液中裂解后，提取基因组DNA，PCR扩增，电泳；当电泳结果中，扩增产物只出现一条约100bp共有扩增条带时，判定样品为非珍珠鸡；当扩增产物同时出现约100bp共有扩增条带和240bp珍珠鸡特异条带时，判定样品为珍珠鸡；所述多重PCR扩增采用的引物如下：
【技术特征摘要】
1.用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物，其特征是，包括珍珠鸡特异性引物，其核苷酸序列为5’-ggtgatgggggtcttcttagc-3’。
2.根据权利要求1所述的用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物，其特征是，还包括以下通用引物：
3.包含权利要求1或2所述的用于珍珠鸡肉源成分的多重pcr特异性鉴定引物...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄勋和，李卫儿，杨嘉莹，张陆恒，杜炳旺，
申请(专利权)人：嘉应学院，
类型：发明
国别省市：
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