【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物分析，具体涉及一种高效液相色谱法检测法匹拉韦及其有关物质的方法和其应用。
技术介绍
1、法匹拉韦(favipiravir，结构如式ⅰ所示)为rna依赖的rna聚合酶(rdrp)抑制剂类广谱抗病毒药物，该药物对人类应对可能出现的烈性病毒性传染病和可能的生物恐怖袭击具有重要的现实意义。
2、
3、法匹拉韦在氧化、强酸、强碱条件下不稳定，易发生降解而产生降解物质，且其制备中引入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物等，均成为影响药品质量的有关物质，故需对其加以控制，以保障药品质量和用药安全性，实现药品质量可控。
4、cn104914185a公开了一种用高效液相色谱法检测法匹拉韦及其有关物质的方法。该方法采用二极管阵列检测器，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-磷酸盐溶液(优选ph7.0)为流动相进行梯度洗脱。该方法存在下述缺陷：一是未具体给出法匹拉韦的任何有关物质信息，故无法得知其能够检测的有关物质；二是未明确检测波长，进而无法明确其能检测何种有关物质，三是仅检测了法匹拉韦制剂中的一个有关物质，难以有效分离并检测法匹拉韦及其制剂中存在的多种有关物质。
5、因此，如何高效地分离并检测法匹拉韦及其制剂中存在的多种结构相近的有关物质，以保障药品质量并实现药品质量可控成为本领域亟需解决的技术问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种高效液相色谱法分离检测法匹拉韦和/或其衍生物及其制剂中有关物质的方法，所述方法使用十八
2、本专利技术的优选技术方案中，所述流动相中含有离子对试剂，优选所述离子对试剂选自四丁基硫酸氢铵、四丁基氢氧化铵(10％水溶液)、四丁基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵、戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠中的任一种或其组合。
3、本专利技术的优选技术方案中，所述离子对试剂浓度为15nm-25nm，优选为18nm-22nm，更优选为20nm。
4、本专利技术的优选技术方案中，组成b相的有机溶剂选自乙腈、甲醇的任一种或其组合。
5、本专利技术的优选技术方案中，柱温选自25℃、30℃、35℃的任一种。
6、本专利技术的优选技术方案中，流动相的流速选自0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min的任一种。
7、本专利技术的优选技术方案中，检测波长为220nm-240nm，优选检测波长选自220nm、230nm、240nm的任一种。
8、本专利技术的优选技术方案中，a相的ph为4.5-5.5，优选为a相的ph4.7-5.3，更优选a相选自ph4.7、ph4.8、ph5.0、ph5.2、ph5.3的任一种。
9、本专利技术的优选技术方案中，0-10min时，流动相中a相:b相的体积比为85:15-95:5；优选为0-10min时，流动相中a相:b相的体积比为87:13-93:7；更优选0-5min时，a相:b相的体积比为87:13-93:7。
10、本专利技术的优选技术方案中，35-40min时，流动相中a相:b相的体积比为65:35-55:45，维持洗脱5-20min。
11、本专利技术的优选技术方案中，35-40min时，流动相中a相:b相的体积比为68:32-52:47，维持洗脱5-20min；更优选35min时，流动相中a相:b相的体积比为68:32-52:47，维持洗脱5-20min，优选维持洗脱10-20min。
12、本专利技术的优选技术方案中，组成a相的水溶液为磷酸盐水溶液，优选所述的磷酸盐选自磷酸钠盐、磷酸钾盐、磷酸铵盐的任一种或其组合。
13、本专利技术的优选技术方案中，组成a相的磷酸盐水溶液的浓度为0.01％-0.35％，优选为0.05％-0.25％，更优选为0.15％。
14、本专利技术的优选技术方案中，组成a相的磷酸盐水溶液为磷酸二氢铵溶液，优选浓度为0.15％的磷酸二氢铵水溶液。
15、本专利技术的优选技术方案中，进样量为5-20μl，优选进样量选自5μl、10μl、15μl、20μl的任一种。
16、本专利技术的优选技术方案中，所述的待测物质、供试品、对照品溶液、供试品溶液的任一种用溶解溶剂溶解或稀释，优选所述的溶解溶剂选自甲醇-水溶液、磷酸盐水溶液的任一种。
17、本专利技术的优选技术方案中,用作溶解溶剂的甲醇-水溶液的体积比为1:0.5-1:1.5，优选为1:0.8-1:1。
18、本专利技术的优选技术方案中，用作溶解溶剂的磷酸盐选自磷酸钠盐、磷酸钾盐、磷酸铵盐的任一种或其组合。
19、本专利技术的优选技术方案中，用作溶解溶剂的磷酸盐水溶液的浓度为0.01％-0.35％，优选为0.05％-0.25％，更优选为0.15％。
20、本专利技术的优选技术方案中，用作溶解溶剂的磷酸盐为磷酸二氢铵。
21、本专利技术的优选技术方案中，用作溶解溶剂的磷酸盐水溶液为0.15％磷酸二氢铵溶液。
22、本专利技术的优选技术方案中，所述磷酸二氢铵溶液的ph值为5.0-9.0，优选ph6.0-8.0，更优选ph7.0-7.5。
23、本专利技术的优选技术方案中，所述待测物质选自法匹拉韦或其衍生物、6-氯-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺、3-氨基甲酰基吡嗪-2-羟基钠、6-溴-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺、6-氟-3-羟基吡嗪-2-甲酸、6-((3-氨基甲酰基-5-氟吡嗪-2-基)氧代)-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺、6-氟-3-羟基-2-氰基吡嗪、3,6-二氟-2-氰基吡嗪、3,6-二氯-2-氰基吡嗪的任一种或其组合。
24、本专利技术的优选技术方案中，所述待测物质选自3-氨基甲酰基吡嗪-2-羟基钠和溶解溶剂的组合、法匹拉韦或其衍生物和6-((3-氨基甲酰基-5-氟吡嗪-2-基)氧代)-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺的组合、6-氯-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺和6-氟-3-羟基吡嗪-2-甲酸的组合、6-氟-3-羟基吡嗪-2-甲酸和6-溴-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺的组合、3,6-二氟-2-氰基吡嗪和3,6-二氯-2-氰基吡嗪中的任一种。
25、本专利技术的优选技术方案中，当所述有关物质包含3,6-二氟-2-氰基吡嗪时，增加检测波长为280nm-300nm的检测，优选增加检测波长为290nm的检测。
26、本专利技术的优选技术方案中，所述检测方法中溶剂峰与待测物质的任一种之间的分离度不低于1.5，优选所述的待测物质选自法匹拉韦或其衍生物、6-氯-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺、3-氨基甲酰基吡嗪-2-羟基钠、6-溴-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺、6-氟-3-羟基吡嗪-2-甲酸、6-((3-氨基甲酰基-5-氟吡嗪-2-基)氧代)-3-羟基吡嗪-2-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种高效液相色谱法分离检测法匹拉韦和/或其衍生物及其制剂中有关物质的方法，其中，所述方法使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温为25-35℃，检测波长为220nm-250nm，流动相由A相和B相组成，流动相的流速为0.8-1.2ml/min，其中，A相为pH为4.5-5.5的含有离子对试剂的磷酸二氢铵溶液，B相为甲醇，梯度洗脱条件：0-5min时，A相:B相的体积比为87:13-93:7；35min时，流动相中A相:B相的体积比为68:32-52:47，维持洗脱10-20min。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述离子对试剂选自四丁基硫酸氢铵、四丁基氢氧化铵(10％水溶液)、四丁基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵、戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠中的任一种或其组合。
3.根据权利要求1-2任一项所述的方法，其中，所述离子对试剂浓度为15nM-25nM。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述离子对试剂浓度为18nM-22nM。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述离子对试剂浓度为20nM。>
6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述柱温选自25℃、30℃、35℃的任一种。
7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述流动相的流速选自0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min的任一种。
8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述检测波长为220nm-240nm。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述检测波长选自220nm、230nm、240nm的任一种。
10.根据权利要求1所述的方法，其中，A相的pH为4.7-5.3。
...【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法分离检测法匹拉韦和/或其衍生物及其制剂中有关物质的方法，其中，所述方法使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温为25-35℃，检测波长为220nm-250nm，流动相由a相和b相组成，流动相的流速为0.8-1.2ml/min，其中，a相为ph为4.5-5.5的含有离子对试剂的磷酸二氢铵溶液，b相为甲醇，梯度洗脱条件：0-5min时，a相:b相的体积比为87:13-93:7；35min时，流动相中a相:b相的体积比为68:32-52:47，维持洗脱10-20min。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述离子对试剂选自四丁基硫酸氢铵、四丁基氢氧化铵(10％水溶液)、四丁基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵、戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠中的任一种或其组合。
3.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：范建国，杨成娜，刘严，邓声菊，徐艳君，王田园，
申请(专利权)人：北京四环制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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