【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于茶多糖的提取，尤其是涉及一种青砖茶多糖的提取纯化方法及获得的青砖茶多糖。
技术介绍
1、黑茶(dark tea)是六大茶类之一，主要包括普洱茶、青砖茶、六堡茶和茯砖茶等，因其具有独特的风味和有益的生理活性而受到国内外消费者和学者的广泛关注。黑茶属于后发酵茶，茶性温和，陈香浓郁，滋味醇厚，口感顺滑。其制作需要经过5道工序，包括杀青、揉捻、渥堆发酵、复揉和烘焙。黑茶的发酵也包含两个阶段，第一阶段为制作过程中渥堆发酵，再压成型前进入发酵间发酵，第二过程为储藏发酵。青砖茶属于黑茶，主要种植于湖北，长盛川牌青砖茶悠久历史，起源于唐朝，兴盛于明清，曾是中俄万里茶道的主要贸易商品，广受藏族、蒙古族和维吾尔族等边疆少数民族的喜爱。青砖茶属于砖形压制茶，由叶片和叶梗压制而成。青砖茶的生产工艺与黑茶一样，其中渥堆发酵是青砖茶感官品质形成的关键阶段，这是因为发酵过程中化学组分会发生变化，如茶氨酸、多酚和茶褐素等。青砖茶中含有丰富的生物活性化合物，包括茶氨酸、茶多糖、茶多酚、茶色素和黄酮类化合物等。近年来，大量研究表明，青砖茶具有抑菌、抗氧化、改善非酒精性脂肪肝、降血脂、调节胃肠道和改善脂质代谢等生理活性。
2、茶多糖是一组与蛋白质结合的具有生物活性的杂多糖，其含量会随着生茶叶成熟度的增加而增加。茶多糖的生物活性与化学组成和分子量及单糖组成等结构密切相关，而其化学组成和结构特征又受茶树品种、茶叶加工工艺和分离方法等因素的影响。目前，茶多糖的研究主要集中在提取分离、纯化、理化性质、药理作用等方面，而大分子杂多糖的整体复杂性阻碍了
3、热水浸提法是茶多糖提取的传统方法，具有操作简单和经济等优点，但也存在时间长和效率低等缺点。为提高提取效率缩短提取周期，酶法辅助提取、超声辅助提取和微波辅助提取等辅助提取法被应用于茶多糖的提取。粗茶多糖中含有蛋白质、茶多酚、茶色素和无机盐等物质，因此，需要通过一定的工艺手段对茶多糖进行分离纯化。粗茶多糖通常采用乙醇沉淀、sevage试剂脱蛋白、树脂脱色和透析袋透析去除无机盐等小分子物质，通过这些步骤得到初步纯化的茶多糖。初步纯化得到的茶多糖可通过乙醇分级沉淀法得到纯度更高的茶多糖，此外，可以通过柱色谱法得到高纯度的茶多糖，但柱色谱法操作繁琐，以及实验周期较长。不同的提取方法和分离纯化方法将会影响茶多糖的化学组成和结构构象，进而影响茶多糖的生理活性，因此，选择合适的提取分离纯化方法至关重要。
4、公开号为cn115386015a的中国专利已申请公开了一种具有抗氧化活性的青砖茶多糖的提取方法，通过将纤维素酶和果胶酶1:1混合，制得复合酶，然后利用复合酶降解青砖茶的细胞壁，使茶多糖溶出，然后通过一系列处理制备得到茶多糖成品。该提取方法结合多糖类物质提取关键因素如酶添加量、酶解时间、ph以及酶解时间，借助响应面法优化多糖类物质的提取工艺为：复合酶用量3.5％，酶解ph为7，酶解温度70℃，酶解时间2h，此时湖北青砖茶多糖的提取率为6.34％。优化后的提取工艺具有反应条件温和，提取率高，且不影响青砖茶多糖的抗氧化活性。其采用的是酶解的方法来提取青砖茶多糖，需要使用纤维素酶和果胶酶。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种青砖茶多糖的提取纯化方法及获得的青砖茶多糖，进而缩短提取周期和降低经济成本，获得纯度高且活性强的多糖，为青砖茶多糖的应用提供参考，拓展青砖茶深加工工艺，提高青砖茶产值，在食品、保健品、医药卫生和化妆品等领域有重要意义。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：
3、本专利技术提供一种青砖茶多糖的提取纯化方法，青砖茶经过水提醇沉、脱蛋白、透析、deae-sepharose fast flow gel阴离子交换层析填料进一步纯化和冻干得到纯化青砖茶多糖。
4、在本专利技术的一个实施方式中，青砖茶多糖的提取纯化方法，包括以下步骤：
5、(1)原料预处理：将青砖茶干燥、粉碎、过筛得到青砖茶粉末；
6、(2)水提：将步骤(1)得到的青砖茶粉末加入超纯水得到青砖茶溶液，控制温度和转速，浸提，离心取上清液，收集下层滤渣，加入超纯水再次浸提，将滤液并入至上清液中；
7、(3)旋蒸浓缩：旋转蒸发浓缩步骤(2)所得的上清液；
8、(4)醇沉：向步骤(3)得到的浓缩液中加入95％乙醇溶液，静置过夜，离心，弃去上清液，向沉淀中加水复溶，得到多糖溶液；
9、(5)脱蛋白：向步骤(4)得到的多糖溶液中加入sevage试剂脱蛋白，剧烈振荡，离心，收集上清液，重复上述步骤三次，得到脱蛋白多糖；
10、(6)透析：将步骤(5)得到的脱蛋白多糖倒入透析袋中透析，将透析过的多糖冷冻保存；
11、(7)冷冻干燥：将步骤(6)得到的透析多糖冷冻干燥，得到青砖茶粗多糖；
12、(8)离子交换层析柱：将步骤(7)得到的青砖茶粗多糖缓慢且均匀加入以deae-sepharose fast flow gel为填料的凝胶柱中，用0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/l的nacl溶液依次进行梯度洗脱，用自动收集器收集，收集0.2m nacl洗脱的洗脱液；
13、(9)旋蒸浓缩：将步骤(8)得到的洗脱液旋转蒸发浓缩至一定体积，得到透析多糖溶液；
14、(10)透析：将步骤(9)得到的透析多糖溶液倒入截流相对分子质量为3500的透析袋中透析48h，期间每隔4h换一次水，将透析过的多糖冷冻保存；
15、(11)冷冻干燥：将步骤(10)得到的透析多糖冷冻干燥，得到青砖茶纯化多糖。
16、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(2)中，所述青砖茶粉末与水的重量比为1：20，水提温度为95℃，浸提时间为2h。
17、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(2)中，加入超纯水再次浸提时，加入的超纯水的用量是下层滤渣重量的2倍。
18、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(3)中旋蒸浓缩的温度为60℃、转速为50r/min。
19、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(3)中，旋转蒸发浓缩至步骤(2)所得的上清液体积为初始体积的1/4。
20、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(4)中，向步骤(3)得到的浓缩液中加入4倍体积的95％乙醇溶液，在4℃冰箱中静置过夜。
21、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(5)中，sevage试剂与复溶得到的多糖溶液的体积比为1：10。
22、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(5)中，剧烈振荡的时间为15min。
23、在本专利技术的一个实施方式中，步骤(6)中，所用的透析袋为截流相对分子质量为3500da的透析袋，脱蛋白多本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，青砖茶经过水提醇沉、脱蛋白、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow gel阴离子交换层析填料进一步纯化和冻干得到纯化青砖茶多糖。
2.根据权利要求1所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，所述青砖茶粉末与水的重量比为1：20，水提温度为95℃，浸提时间为2h。
4.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(3)中旋蒸浓缩的温度为60℃、转速为50r/min。
5.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(3)中，旋转蒸发浓缩至步骤(2)所得的上清液体积为初始体积的1/4。
6.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(5)中，sevage试剂与复溶得到的多糖溶液的体积比为1：10。
7.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯
8.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(7)中，冷冻干燥的温度为-50℃，真空度为0-1Pa，时间为48h。
9.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(8)中，青砖茶粗多糖的上样浓度为50mg/mL，上样量为2mL，洗脱流速为2mL/min，5min/tube。
10.基于权利要求1-9中任一项所述方法制备得到的青砖茶纯化多糖，其特征在于，所得青砖茶纯化多糖的分子量为73734Da，由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成，其摩尔百分比含量分别为6.6％、21.0％、27.9％、24.2％、3.4％、2.5％和14.3％。
...【技术特征摘要】
1.一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，青砖茶经过水提醇沉、脱蛋白、透析、deae-sepharose fast flow gel阴离子交换层析填料进一步纯化和冻干得到纯化青砖茶多糖。
2.根据权利要求1所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，所述青砖茶粉末与水的重量比为1：20，水提温度为95℃，浸提时间为2h。
4.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(3)中旋蒸浓缩的温度为60℃、转速为50r/min。
5.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(3)中，旋转蒸发浓缩至步骤(2)所得的上清液体积为初始体积的1/4。
6.根据权利要求2所述的一种青砖茶多糖的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，步骤(5)中，sevage试剂与复溶得到的多糖溶液的体积比为1：1...
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