一种传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开一种传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用，属于基因工程疫苗技术领域。所述亚单位疫苗包括传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白，所述传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述传染性法氏囊病病毒变异株为vaIBDV。该技术将vaIBDV的VP2基因克隆到原核表达载体pET‑28a，转化至大肠杆菌构建工程菌，诱导工程菌表达获得可溶性VP2蛋白。本发明专利技术制备蛋白与常规矿物油佐剂配制亚单位疫苗，利用免疫攻毒法评估疫苗保护效果，疫苗组可以提供100％保护，具有很好的商品化开发前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程疫苗，具体涉及一种传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用。

技术介绍

1、传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus，ibdv)属于双rna病毒科，禽双rna病毒属。ibdv可分为两个血清型，称为1型和2型，其中血清2型的毒株对鸡没有毒力。血清1型毒株根据致病力又可分为三种类型，分别是经典血清1型、变异型，以及超强毒力vvibdv。

2、基于饲养管理水平的提高和疫苗的广泛使用等因素，vvibdv感染逐渐被控制。2017年至今，不同于早期变异株的ibdv新型变异株vaibdv呈现流行趋势，其引起的非典型传染性法氏囊病(ibd)对禽类养殖带来了新的威胁。

3、在vvibdv的防控过程中，以主要保护性蛋白vp2为抗原的亚单位疫苗取得了很好的防控效果。但以vvibdv为基础而开发的亚单位疫苗已经不能控制新变异株的感染，所以亟需以新出现的vaibdv为防控目标，开发新的亚单位疫苗。

技术实现思路>

1、本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白亚单位疫苗，其特征在于，所述亚单位疫苗包括传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白，所述传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述传染性法氏囊病病毒变异株为vaIBDV。

2.权利要求1所述的传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的传染性法氏囊病病毒变异株的VP2蛋白亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述引物序列包括SEQ ID NO.1所示的正向引物VP2-f...

【技术特征摘要】

1.一种传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白亚单位疫苗，其特征在于，所述亚单位疫苗包括传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白，所述传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白的氨基酸序列如seq id no.3所示，核苷酸序列如seq id no.4所示，所述传染性法氏囊病病毒变异株为vaibdv。

2.权利要求1所述的传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述引物序列包括seq id no.1所示的正向引物vp2-f和seqid no.2所示的反向引物vp2-r。

4.根据权利要求2所述的传染性法氏囊病病毒变异株的vp2蛋白亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述分别进行双酶切的具体步骤为，分别采用2μg的pet-28a或peasy-t3-vp2、5μl的10×buffer、2μl的限制性内切酶bamhi、2μl的限制性内切酶xhoi，后加入ddh20补充至50μl的酶切体系放置37℃水中水浴1h，pet-28a和peasy-t3-vp...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱杰，牛晓赛，张飞，耿兴良，
申请(专利权)人：山东滨州博莱威生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：