一种外周血Hb-Aβ复合物定量检测试剂盒、检测方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种外周血Hb‑Aβ复合物定量检测试剂盒、检测方法及应用，本发明专利技术所述方法包括，将Protein G或链霉亲和素(Streptavidin，SA)固定在固相载体上，随后加入抗Hb抗体(AHb)或生物素化抗Hb抗体(B‑AHb)形成结合体，与样本中的Hb‑Aβ复合物，然后分别与酶标抗Aβ抗体(E‑AAβ)、化学发光液反应的步骤，或分别与生物素标记抗Aβ抗体(B‑AAβ)、酶标亲和素(E‑SA)、化学发光液反应的步骤；本发明专利技术还涉及在液相反应液中首先形成Hb‑Aβ‑AAβ复合物，复合物进一步与抗Hb抗体结合，进行化学发光反应的步骤；本发明专利技术进一步包括在含有酶标记抗体或酶标记亲和素的反应步骤中，通过向反应液中加入聚乙二醇(PEG)以增强抗原与抗体的结合效率和酶催化化学发光反应的效率，大幅度提高了检测方法的灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫测定领域，涉及一种血红蛋白-β-淀粉样肽(hb-aβ)复合物定量检测试剂盒、检测方法及应用，具体涉及定量检测外周血中hb-aβ复合物的试剂盒、方法及其应用，其中所述hb-aβ复合物主要来自外周血红细胞。

技术介绍

0、技术背景

1、β-淀粉样肽(amyloidβpeptide，aβ)是指由36～43个氨基酸构成的多肽分子，是β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein，app)在β分泌酶的作用下产生的多肽降解产物。aβ可由神经元、星形胶质细胞、激活的小胶质细胞产生，并进入到细胞外液中，包括组织间隙液、脑脊液、血浆、淋巴液、唾液和尿液。aβ具有较强的聚集特性，尤其是由42个氨基酸构成的aβ1-42或aβ42；aβ异常聚集体通过直接作用于神经元或激活胶质细胞炎症反应等机制而对神经元产生毒性作用，是诱发阿尔茨海默病(alzheimer’s disease，ad)发生发展的重要原因。aβ异常聚集体在细胞外沉积形成ad的标志性病理结构—老年斑(senileplaque，sp)，后者是ad病理学和影像学诊断的主本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种Hb-Aβ复合物的定量检测方法，所述Hb-Aβ复合物来自外周血红细胞，所述方法包括，将Protein G或链霉亲和素(Streptavidin，SA)固定在固相载体上，随后加入抗Hb抗体(AHb)或生物素化抗Hb抗体(B-AHb)形成结合体，并与样本中的Hb-Aβ复合物反应，随后分别与酶标抗Aβ抗体(E-AAβ)、化学发光液反应的步骤或分别与生物素标记抗Aβ抗体(B-AAβ)、酶标记亲和素(E-SA)、化学发光液进行反应的步骤；其中，AAβ可以是特异性识别Aβ42、Aβ40或任何其它Aβ肽的抗体；在酶标记AAβ或酶标记亲和素的反应步骤中，向反应液中加入聚乙二醇(PEG)；其中所述...

【技术特征摘要】

1.一种hb-aβ复合物的定量检测方法，所述hb-aβ复合物来自外周血红细胞，所述方法包括，将protein g或链霉亲和素(streptavidin，sa)固定在固相载体上，随后加入抗hb抗体(ahb)或生物素化抗hb抗体(b-ahb)形成结合体，并与样本中的hb-aβ复合物反应，随后分别与酶标抗aβ抗体(e-aaβ)、化学发光液反应的步骤或分别与生物素标记抗aβ抗体(b-aaβ)、酶标记亲和素(e-sa)、化学发光液进行反应的步骤；其中，aaβ可以是特异性识别aβ42、aβ40或任何其它aβ肽的抗体；在酶标记aaβ或酶标记亲和素的反应步骤中，向反应液中加入聚乙二醇(peg)；其中所述peg的浓度为0.1～12％，优选的为2～8％，更为优选的为5％。

2.根据权利要求1所述的检测方法，进一步包括，血液样本的收集，在含有peg的液相反应液中形成hb-aβ-aaβ复合物，采用发光法对抗原抗体结合物进行检测的步骤。

3.根据权利要求1所述的检测方法，方法如下：

4.根据权利要求1所述的检测方法，

5.根据权利要求1所述的检测方法，

6.根据权利要求1所述的检测方法，所述方法包括以下步骤：

7.根据权利要求1所述的检测方法，所述方法包括以下步骤：

8.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：于顺，李鹏杰，李昕，蔡燕宁，
申请(专利权)人：首都医科大学宣武医院，
类型：发明
国别省市：