利用玉米BBM和WUS2基因提高玉米转化效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用玉米BBM和WUS2基因提高玉米转化效率的方法，构建BBM基因和WUS2基因的过表达载体，同时将Cre‑Gr基因与BBM基因融合表达，将构建的过表达载体通过农杆菌转化玉米，在产生愈伤组织后，通过外源添加地塞米松激活Cre蛋白，将愈伤组织中的BBM和WUS2基因表达框切除。避免由于BBM和WUS2基因在植株中过表达，产生大量的畸形苗，造成阳性苗得不到种子的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种利用玉米bbm和wus2基因提高玉米转化效率的方法，该方法适用于所有的玉米、高粱和大豆品种。

技术介绍

1、玉米转化需要受体材料能诱导出胚性愈伤组织为前提，玉米愈伤组织主要来源于幼胚。玉米愈伤组织的产生又高度依赖于基因型，这导致不少玉米自交系无法利用幼胚进行转化，使得基因编辑技术在创制玉米新种质中出现屏障。解决玉米转化受基因型限制和提高转化效率是研究玉米基因组功能和利用转基因产生具有育种价值新种质必须面对的问题。目前研究发现bbm基因过表达可以诱导玉米自交系产生胚性愈伤组织，wus2基因具有促进干细胞分化的功能，可以直接激活clv3信号途径；通过过表达bbm和wus2基因，促进幼胚和成熟胚快速产生胚性愈伤组织，提高玉米的转化效率。但是利用热激启动子驱动cre蛋白来切除bbm和wus2表达框的方法只能达到40％多的效率，愈伤组织会由于bbm和wus2表达量过高导致愈伤组织分化出现问题，甚至大部分转化苗出现畸形，得不到种子。

技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题为本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.利用玉米BBM和WUS2基因提高玉米转化效率的方法，构建BBM基因和WUS2基因的过表达载体，其特征在于，将Cre-Gr基因与BBM基因融合表达，将构建的过表达载体通过农杆菌转化玉米，在产生愈伤组织后，通过外源添加地塞米松激活Cre蛋白，将愈伤组织中的BBM和WUS2基因表达框切除。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述构建BBM基因和WUS2基因的过表达载体，同时将Cre-Gr基因与BBM基因融合表达的方法为：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述BBM基因序列如SEQ ID No.1所示，WUS2基因序列如SEQ ID No.2所示...

【技术特征摘要】

1.利用玉米bbm和wus2基因提高玉米转化效率的方法，构建bbm基因和wus2基因的过表达载体，其特征在于，将cre-gr基因与bbm基因融合表达，将构建的过表达载体通过农杆菌转化玉米，在产生愈伤组织后，通过外源添加地塞米松激活cre蛋白，将愈伤组织中的bbm和wus2基因表达框切除。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述构建bbm基因和wus2基因的过表达载体，同时将cre-gr基因与bbm基因融合表达的方法为：

3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文平，黄威，李晓辉，刘学岩，张春宵，金峰学，董菁，王英昊，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院中国农业科技东北创新中心，
类型：发明
国别省市：