重组嗜盐菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种重组嗜盐菌及其应用。本发明专利技术以盐单胞菌为母体，接合转化PAL基因、4CL基因、CHS基因、CHI基因、Madl基因、Madm基因和mcs基因，同时抑制脂肪酸合成途径基因的表达，最终构建得到了具有高效生产柚皮素功能的重组嗜盐菌。本发明专利技术通过从头构建柚皮素生物合成途径，增强底物丙二酰辅酶A的合成，以及设计动态调控策略平衡丙二酰辅酶A和脂肪酸的合成，从而实现提高生物合成柚皮素的产量。该重组盐单胞菌可在开放的无灭菌和连续生长条件下进行发酵，高效生产柚皮素，对微生物合成柚皮素的工业化生产具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，尤其涉及一种重组嗜盐菌及其应用。

技术介绍

1、柚皮素(naringenin)是一种天然的黄酮类多酚化合物，主要存在于柑橘类水果如葡萄柚和番茄、樱桃等药用植物衍生食品中，具有重要的药理特性，包括抗炎、抗氧化、神经保护、抗肝和抗癌等生理活性，在食品、药品和化妆品等领域均有重要应用。此外，柚皮素是一种黄酮骨架物质,可经过不同催化反应形成种类众多的具有更高附加值的黄酮类化合物。目前，工业化生产柚皮素的方法只有植物组织提取法。然而，植物提取法存在利用大量耕地、植物组织中含量低提取困难、植物提取受到季节限制和气候干扰等问题，这导致其价格昂贵，且无法满足市场需求。因此，急需寻找一种更为高效稳定的柚皮素生产方法，取代受环境影响较大的植物提取法。

2、微生物合成法反应条件温和，且可专一性合成具有生理活性的手性化合物。因此，近年来微生物法合成柚皮素等黄酮类化合物受到越来越多的重视。已有研究通过工程化酿酒酵母生产柚皮素，其产量为2.05g/l，是目前微生物法生产柚皮素的最高产量。受限于工程化酿酒酵母生长缓慢和对培养条件的苛刻要求，以工程化酿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.重组嗜盐菌，其特征在于，所述重组嗜盐菌表达PAL基因、4CL基因、CHS基因、CHI基因、Madl基因、Madm基因和mcs基因；且所述重组嗜盐菌与野生型嗜盐菌相比，脂肪酸合成途径基因的表达降低，所述脂肪酸合成途径基因选自FabD、FabH、FabB、FabF和FabI中的至少一种。

2.根据权利要求1所述重组嗜盐菌，其特征在于，所述PAL基因来源于拟南芥，和/或，所述4CL基因来源于大豆。

3.根据权利要求2所述重组嗜盐菌，其特征在于，所述重组嗜盐菌包含用于表达PAL基因和4CL基因的插入质粒，所述用于表达PAL基因和4CL基因的插入质粒的核苷酸序列为SEQ...

【技术特征摘要】

1.重组嗜盐菌，其特征在于，所述重组嗜盐菌表达pal基因、4cl基因、chs基因、chi基因、madl基因、madm基因和mcs基因；且所述重组嗜盐菌与野生型嗜盐菌相比，脂肪酸合成途径基因的表达降低，所述脂肪酸合成途径基因选自fabd、fabh、fabb、fabf和fabi中的至少一种。

2.根据权利要求1所述重组嗜盐菌，其特征在于，所述pal基因来源于拟南芥，和/或，所述4cl基因来源于大豆。

3.根据权利要求2所述重组嗜盐菌，其特征在于，所述重组嗜盐菌包含用于表达pal基因和4cl基因的插入质粒，所述用于表达pal基因和4cl基因的插入质粒的核苷酸序列为seqid no：1。

4.根据权利要求1-3任意一项所述重组嗜盐菌，其特征在于，所述chs基因来源于茶，和/或，所述chi基因来源于紫苜蓿。

5.根据权利要求4所述重组嗜盐菌，其特征在于，所述重组嗜盐菌包含用于表达chs基因和chi基因的插入质粒，所述用于表达chs基因和chi基因的插入质粒选自核苷酸序列为seq id no...

【专利技术属性】
技术研发人员：张瑶瑶，刘絮，黄悟哲，杜开心，郑陶然，
申请(专利权)人：北京微构工场生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：