【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医药，具体涉及一种角蛋白(尤其是一种重组角蛋白)及其在毛发产品中的应用、包括该角蛋白的组合物和微针及其制备方法与用途。
技术介绍
1、现代医学认为，正常情况下，人体头发毛乳头内有丰富的血管，为毛乳头、毛球部提供充足的营养，从而头发生长激素顺利合成。各种不良刺激(激素水平影响，神经性刺激影响等)造成供应毛发营养的血管发生痉挛，使毛乳头、毛球部的营养运转功能发生障碍。当营养合成在毛乳头、毛球部的形成发生障碍，或虽然形成但因某种因素，具有细胞能量作用的atp物质的制造会因此而受阻。当作为热量源的atp无法产生出来，因此无法进行毛发的蛋白合成，毛母细胞失去活力，毛发髓质、皮质部分的营养减少，开始角质化，毛囊开始萎缩或者坏死，头发大量进入休止期，头发就会大量脱落。
2、脱发是一个古老又巨大的市场，但却一直缺乏创新。自非那雄胺首次获得fda批准以来，已经将近30年没有新疗法上市了，非那雄胺是fda批准的唯一可用于治疗雄激素性脱发的口服用药，但不适用于妇女以及儿童，而其口服给药方式使药物作用于全身，长期使用可能造成乳房触痛或肿大、性欲减退以及阳痿等副作用，故临床应用大大受限。
3、目前最常见的治疗脱发的外用药为5％米诺地尔，米诺地尔进入毛囊后代谢为活性物质米诺地尔硫酸盐发挥促毛发生长的作用。但由于米诺地尔的水溶性差，所以市售的大部分米诺地尔制剂由高比例的乙醇或丙二醇配制而成，重复使用时可引起非常严重的副反应(如头皮干燥、刺激感、烧灼感、发红和接触性皮炎等)；而米诺地尔硫酸盐为水溶性，但其性质不稳定，直接外
4、另外，最新的研究表明毛囊周围的treg细胞在毛发生长过程中起到必不可少的作用，而低剂量的白介素2能够有效的增加treg数目，且在一项ⅱ期临床试验中，斑秃患者皮下注射低剂量的白介素2能够有效促进毛发生长，但是白介素2的皮下注射过程痛苦，需要专业人士操作，而使其应用受到限制。
5、除此之外，植发也是脱发患者的治疗方案之一，但是植发因价格贵、需要专业人士参与限制其在脱发中的应用。
6、因此，目前上市的疗法并没有长期阻止脱发的能力，甚至在许多人种压根不起作用，更别说实现再生毛囊了。
7、角蛋白类似于胶原，具有氨基酸长链，角蛋白有两种主要蛋白，一种为含硫元素较多的细胞间质蛋白，含有胱氨酸，而胱氨酸是一种含硫氨基酸，多含于角蛋白中，是人体必需的氨基酸之一，其具有促进细胞氧化还原、细胞增殖的功能。角蛋白是人体毛发的主要结构成分，是维持毛囊结构并在毛囊中表达最丰富的蛋白质，是形成皮肤毛囊细胞的主要结构蛋白。角蛋白可以保护皮肤、毛囊细胞免受机械和非机械性损伤，并参与细胞信号转导和凋亡。研究表明，外源性的角蛋白能够激活内源角蛋白的表达，并促进相关细胞的增殖和迁移。角蛋白是一种理想的生物材料，可用于毛发护理和再生、皮肤创面及皮肤疾病的治疗。
技术实现思路
1、已有报道，采用基因工程技术，通过微生物发酵表达并通过纯化分离工艺制备出单一的角蛋白物质，能够促进毛发生长，基于此，本申请提供了一种角蛋白，其在促进毛发生长，防止脱发具有明显的效果。
2、具体的，本申请采用如下技术方案，
3、1、一种角蛋白，所述角蛋白包括如seq id no.2所示的氨基酸序列。
4、2、一种编码如项1所述的角蛋白的核苷酸序列。
5、3、根据项2所述的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq id no.3所示。
6、4、一种重组载体，所述重组载体包含如项2或3所述的核苷酸序列。
7、5、根据项4所述的重组载体，所述重组载体为原核细胞重组表达载体。
8、6、根据项5所述的重组载体，所述原核细胞重组表达载体为选自pet3a、pet9a、pet14b、pet15b、pet16b、pet20b、pet21a、pet22b、pet23a、pet28a、pet30a中的任意一种，优选的，所述原核细胞重组表达载体为pet22b。
9、7、一种宿主细胞，所述宿主细胞包含项4～6任一所述的重组载体。
10、8、根据项7所述的宿主细胞，所述宿主细胞为大肠杆菌；优选的，所述大肠杆菌选自bl21、bl21(de3)、rosetta(de3)、rosetta-gami(de3)plyss、rosetta(de3)plyss、bl21(de3)plyss、origamib(de3)、origamib(de3)plyss中的任意一种，优选的，所述宿主细胞为bl21(de3)。
11、9、一种制备如项1所述角蛋白的方法，包括：
12、首先合成编码项2或3所述的角蛋白的核苷酸序列，随后将核苷酸序列与原核细胞重组表达载体结合，得到重组载体；
13、将重组载体转入宿主细胞，随后诱导表达，并经过纯化得到角蛋白。
14、10、一种防脱生发的微针，包括：
15、针尖部分，所述针尖部分包含项1所述的角蛋白和针尖基质；以及
16、基座部分，所述基座部分包含基座基质。
17、11、根据项10的微针，所述角蛋白在针尖基质中的浓度为50-200mg/ml。
18、12、根据项10或11所述的微针，所述针尖中还包括第二活性成分，优选的，所述第二活性成分选自kgf、fgf或米诺地尔中的一种或两种以上。
19、13、根据项10～12中任一项所述的微针，所述微针含有下述药物中的一种或多种组合：疫苗、激素、基因工程药物、多肽、多糖、核苷类、蛋白质类、化学药物或天然药物成分。
20、14、一种制备项10～13中任一项所述的微针的方法，包括，
21、将角蛋白和针尖基质配置为针尖溶液；
22、将基座基质配置为基座溶液；
23、采用注模工艺将针尖溶液注入微针模具中，保持一定时间后去除表面气泡及多余液体，等待其形成角蛋白水凝胶；
24、随后，在模具基底加入基座溶液，干燥后从模具上取下得到所述微针。
25、15、根据项14的方法，所述保持为在真空下保持，所述保持时间为5～20min。
26、16、一种防脱生发的组合物，包含项1所述的角蛋白和生理学上可接受的载体。
27、17、根据项16所述的组合物，所述组合物为选自以下的制剂的形式：浆液、溶液、悬浮液、乳液、软膏、泡沫、糊剂、凝胶、乳膏、洗剂、喷雾剂或粉末。
28、18、根据项16或17所述的组合物，所述本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种角蛋白，其特征在于，所述角蛋白包括如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
2.一种编码如权利要求1所述的角蛋白的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包含如权利要求2或3所述的核苷酸序列。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为原核细胞重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述原核细胞重组表达载体为选自pET3a、pET9a、pET14b、pET15b、pET16b、pET20b、pET21a、pET22b、pET23a、pET28a、pET30a中的任意一种，优选的，所述原核细胞重组表达载体为pET22b。
7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求4～6任一所述的重组载体。
8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌；优选的，所述大肠杆菌选自BL21、BL21(DE3)、Rosetta(D
9.一种制备如权利要求1所述角蛋白的方法，其特征在于，包括：
10.一种防脱生发的微针，包括：
...【技术特征摘要】
1.一种角蛋白，其特征在于，所述角蛋白包括如seq id no.2所示的氨基酸序列。
2.一种编码如权利要求1所述的角蛋白的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列如seq id no.3所示。
4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包含如权利要求2或3所述的核苷酸序列。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为原核细胞重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述原核细胞重组表达载体为选自pet3a、pet9a、pet14b、pet15b、pet16b、pet20b、pet21a、pet22b、pet23a、pet28a、pet3...
【专利技术属性】
技术研发人员：郝石磊，王伯初，张豪杰，
申请(专利权)人：海南海默斯生物科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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