【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及以大黄酸作为poi配体，以来那度胺或者泊马度胺作为e3配体，linker选择脂肪链和peg链，设计合成大黄酸系列protacs的制备方法及其在美白及抗肿瘤方面的应用。
技术介绍
1、protacs是一种对蛋白质进行化学降解的技术，目前已成为药物研发领域的新兴方向。protac由三部分组成，分别为目标蛋白配体、e3泛素连接酶配体以及中间的连接链linker，其技术原理是protac分子可以同时与目标蛋白和e3泛素连接酶相结合，形成一种三元复合物，从而使目标蛋白和e3连接酶相互接近，让目标蛋白泛素化，最后通过蛋白酶体系统(ups)的降解功能对目标蛋白进行降解。即使药物与靶标弱结合，也可以利用protac可以找到靶标，通过差异蛋白组学技术进一步分析，从而使蛋白丰度差异性放大，并且不会与多个蛋白靶标结合。因此，protac和差异蛋白组学技术联用为找到发现大黄酸抗肿瘤的作用靶标提供实践上与技术上的可能。protacs分子不需要与靶标的高活性区域高度嵌合，只需与其表面产生短暂的黏合效应，即只需要通过一些特殊的分子间作用力、氢键等低键能的弱结合作用即可实现靶标分子的降解。目前，protacs介导的蛋白质降解的独特驱动模型有巨大的治疗潜力，故该技术目前主要应用在药物开发方面，有些protacs已经进行了临床试验。
2、且protac药物比传统的小分子药物有着众多的优势，大致如下：
3、(1)protac药物的设计可以不受限于lipinski法则；
4、(2)传统小分子的药理作用靠的对靶点蛋白关键
5、(3)人体内约50％的蛋白被发现跟人类疾病相关，其中只有约20％的蛋白能被传统小分子结合而protac理论上可以和蛋白的任何地方相结合；
6、(4)protac相抵于传统小分子，耐药性的问题可以忽视。理论上protac可以较好的兼容靶蛋白的突变；
7、(5)protac更持久，抑制力度更强。
8、蓼科植物——大黄酸为大黄、何首乌、芦荟等中药的主要成分之一，具有抗菌、抗炎、利尿、降解调脂、抗癌等药理活性。本专利技术通过抑制酪氨酸酶等试验验证大黄酸具有良好的抑制酪氨酸酶效果，同时研究其机制证明其具有良好的美白功效及价值。其次大黄酸可通过调节促分裂原活化蛋白激酶、磷肌醇3激酶、核转录分子及多种信号途径抑制肿瘤细胞增殖侵袭转移，促进细胞凋亡，可联合放化疗药物减毒增效来发挥抗肿瘤作用。目前虽已证实大黄酸能很好地抑制肝癌、乳腺癌、肺癌等多种癌症，但其具体相应的抗肿瘤靶标蛋白还未完全阐明。
技术实现思路
1、基于以上研究背景，本专利技术的第一方面在于合成一系列大黄酸protacs及该大黄酸protacs的制备方法。
2、本专利技术的第二方面在于提供大黄酸protacs及其抗肿瘤功效的应用。所述肿瘤包括肝癌、乳腺癌、肺癌、舌癌、胃癌、大肠癌或神经系统癌症中的至少一种。
3、本专利技术的第三方面在于提供大黄酸protacs及其美白功效或及皮肤疾病治疗药物中的应用。所述皮肤疾病包括皮肤色素过度沉着的肤质，如雀斑、黄褐斑、太田痣、焦油黑变病、肢端色素沉着种族性黑皮病、黑素瘤、咖啡斑等。
4、为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案如下：
5、下面论述本专利技术的第一个目的：
6、首先，提供一种通式所示的大黄酸的protac化合物或其药理或生理上可接受的盐，合成具有美白及抗肿瘤活性的大黄酸protacs。
7、
8、以来那度胺或泊马度胺为e3配体，linker选择脂肪链或peg链中的至少一种，所述脂肪链为-(ch2)n-，其中n表示3到8的自然数；所述的peg链为-(ch2ch2 o)n-ch2ch2-，其中n表示2或者3。
9、优选地，本专利技术提供的大黄酸protacs包括但不限于如下表1所示的化合物：
10、表1
11、
12、
13、
14、
15、
16、本专利技术的第二个目的是提供大黄酸protacs的制备方法
17、一种通式大黄酸protacs的制备方法，包括如下步骤：
18、(1)将上述通式所示的大黄酸protacs分为系列i大黄酸protacs、系列ii大黄酸protacs。
19、(2)其中，系列i大黄酸protacs为通式i所示化合物，linker选择脂肪链，e3ligase为来那度胺或者氟代沙利度胺。
20、通式i：
21、
22、(3)系列ii大黄酸protacs为通式ii所示化合物，linker选择peg2(二聚乙二醇)或peg3(三聚乙二醇)，e3 ligase为泊马度胺。
23、通式ii：
24、
25、首先，申请人发现大黄酸本身对酪氨酸酶有很好的抑制作用。因此，专利技术以大黄酸作为靶标蛋白配体(poi ligand)。选择水溶性较好和分子量较低的来那度胺和泊马度胺作为初步的e3配体小分子，为了便于linker与e3配体连接，在选择氨基带有一定长度的boc基团连接链的e3配体和来那度胺反应。
26、合成反应式如下：
27、e3 ligand：
28、
29、在e3配体连接一定长度的连接链后，再和poi配体大黄酸进行酰胺化缩合反应，使得poi配体与e3连接酶配体相连接，得到系列i大黄酸protacs化合物。
30、系列i大黄酸protacs化合物是以已合成的e3 ligand中间体和大黄酸为原料加入dmf(n,n-二甲基甲酰胺)溶剂，搅拌几分钟后依次加dipea(n,n-二异丙基乙胺)，hatu(多肽缩合试剂)，搅拌20min左右，tic检测(展开剂为cdcl3：meoh＝20：1)到活性酯生成后，加入中间体。室温条件下反应12h，tic检测(展开剂为二氯甲烷：甲醇＝20：1)原料反应完全。向反应液加入碎冰淬灭，用dcm(二氯甲烷)充分萃取，有机层用饱和氯化铵溶液和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到黄色液体，通过ptlc纯化，得到系列i大黄酸protacs。
31、合成方程式如下：
32、
33、系列ⅱ大黄酸protacs合成路线
34、以peg2和peg3，d(大黄酸)和来那度胺为原料加入dmf溶剂，搅拌几分钟后依次加入dipea(n,n-二异丙基乙胺),hatu(2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯)，室温条件下反应24h，得到中间体：
35、
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.大黄酸PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物，其中，所述大黄酸PROTAC如下列通式所示：
2.根据权利要求1所述的大黄酸PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物，其特征在于：所述PEG链为PEG2或PEG3。
3.根据权利要求1所述的大黄酸PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物，其特征在于：选自下列化合物中的至少一种：
4.根据权利要求1或2所述的大黄酸PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肿瘤包括肝癌、乳腺癌、肺癌、舌癌、胃癌、大肠癌或神经系统癌症中的至少一种。
6.根据权利要求1或2所述的大黄酸PROTAC化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物在制备皮肤美白化妆品或皮肤疾病治疗药物中的应用。
7.一种PROTAC化合物的制备方法，包括如下步骤：以脂肪链为原料，DMF作溶剂，以苯甲醚作为保护剂，
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以氟代沙利度胺、N-Boc-2,2’-(亚乙二氧基)二乙胺为原料，90℃条件下反应DMF作溶剂，经DIEPA、HATU活化，合成Linker-E3配体二元复合物，最终与大黄酸进行酰胺化反应形成PROTACs三元复合物，
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：包括如下步骤:以邻苯二甲酰亚胺钾盐，丙酮，烷烃链(γ-氨基链)为原料，DMF作溶剂，经DIEPA、HATU活化，合成Linker-E3配体二元复合物，最终与大黄酸进行酰胺化反应形成PROTACs三元复合物；
10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：以氟代沙利度胺，烷烃链(PEG链)为原料，DMF作溶剂，以苯甲醚作为保护剂，经DIEPA、HATU活化，合成Linker-E3配体二元复合物，最终与大黄酸进行酰胺化反应形成PROTACs三元复合物：
...【技术特征摘要】
1.大黄酸protac化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物，其中，所述大黄酸protac如下列通式所示：
2.根据权利要求1所述的大黄酸protac化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物，其特征在于：所述peg链为peg2或peg3。
3.根据权利要求1所述的大黄酸protac化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物，其特征在于：选自下列化合物中的至少一种：
4.根据权利要求1或2所述的大黄酸protac化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肿瘤包括肝癌、乳腺癌、肺癌、舌癌、胃癌、大肠癌或神经系统癌症中的至少一种。
6.根据权利要求1或2所述的大黄酸protac化合物或其药理或生理上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物在制备皮肤美白化妆品或皮肤疾病治疗药物中的应用。
7.一种protac化合物的制备方法，包括如下步骤：以脂肪链为原料，dmf作溶剂，...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘接卿，夏源希，徐萌，张茜，伍立军，周嘉铭，何心怡，施佳棋，张紫晴，张佩玺，汪巧来，沈瑞，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。