【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及疫苗，尤其是涉及一种编码sars-cov-2病毒抗原的mrna和疫苗。
技术介绍
1、
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3、目前上市和大多数处在临床试验阶段的新冠疫苗均是针对该毒株进行的抗原设计。自2020年7月起，新冠病毒alpha株、新冠病毒beta株、新冠病毒delta株和新冠病毒omicron（奥密克戎）株等变异株相继出现。
4、与最初的新冠病毒原始株序列相比，奥密克戎变异株至少新增了60个突变点，其中刺突蛋白（s蛋白）超过35个突变，而刺突蛋白（s蛋白）内最关键的受体结合结构域上携带15个突变，相对而言，德尔塔变异株在该区域仅有2个突变。根据突变位点的差异，奥密克戎变异株的主要流行株包括ba.1、ba.2、ba.2.12.1、ba.4和ba.5等。
5、研究发现，现有疫苗对变异株的保护效果出现不同程度的下降，尤其是针对新冠病毒omicron株。因此针对变异株具有更好保护效果的新冠疫苗亟待研发。
6、有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
1、本专利技术的第一目的在于提供一种编码sars-cov-2病毒抗原的mrna，该mrna递送至体内可以使机体产生免疫反应，能保护机体抵抗sars-cov-2病毒变异株，尤其是omicron毒株的感染，缓解了现有技术中存在的现有疫苗对变异株的保护效果不佳的技术问题。
2、本专利技术的第二目的在于提供一种疫苗，该疫苗含有上述编码sars-cov-2病毒抗原的mrna，或与其相关
3、为解决上述技术问题，本专利技术特采用如下技术方案：
4、根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种编码sars-cov-2病毒抗原的mrna，含有编码开放阅读框的片段；所述编码开放阅读框的片段编码如seq_1所示氨基酸序列。
5、优选地，所述编码开放阅读框的片段中总gc%含量为30~70%，所述编码开放阅读框的片段中任意一长度为60 bp的片段中gc%含量不低于40%。
6、优选地，所述编码开放阅读框的片段的核苷酸序列如seq_2或seq_21所示。
7、优选地，所述mrna从5’端到3’端分别依次包括：5’帽子、5’utr、编码所述开放阅读框的片段、3’utr和3’polya尾。
8、优选地，所述5’帽子为：m7g（5’）（2’-omea）pg；
9、和/或，所述5’utr的序列如seq_3所示；
10、和/或，所述3’utr的序列如seq_4所示；
11、和/或，所述3’polya尾的序列如seq_25所示。
12、根据本专利技术的一个方面，本专利技术还提供了一种生物材料，包括选自如下（a1）~（a4）；
13、（a1）编码所述mrna的dna；
14、（a2）、与（a1）中定义的dna互补的核酸；
15、（a3）、含有（a1）或（a2）中dna的表达盒或载体；
16、（a4）宿主细胞，所述宿主细胞被所述载体转化。
17、根据本专利技术的一个方面，本专利技术还提供了一种疫苗，所述疫苗含有所述编码sars-cov-2病毒抗原的mrna和疫苗，或所述生物材料。
18、优选地，所述疫苗含有核酸脂质纳米颗粒，所述核酸脂质纳米颗粒含有所述mrna和脂质成分；
19、按摩尔百分比计，所述脂质成分包括20~50%可质子化阳离子脂质、20~50％结构脂质、5~20％辅助脂质和1~5％表面活性剂，其中，可质子化阳离子脂质、结构脂质、辅助脂质和表面活性剂的摩尔含量合计100％；
20、所述可质子化阳离子脂质包括dlinmc3-dma、dodma、c12-200和dlindma中的至少一种；
21、和/或，所述辅助脂质包括dspc、dope、dopc、dopg和dops中的至少一种；
22、和/或，所述结构脂质包括胆固醇和/或胆固醇衍生物；
23、和/或，所述表面活性剂包括peg-dmg、peg-dspe和tpgs中的至少一种。
24、优选地，按照摩尔百分比计所述脂质成分包括dlin-mc3-dma 50％、dopg 10％、胆固醇38.5％和peg-dmg 1.5％。
25、优选地，所述核酸脂质纳米颗粒按照如下方法制备得到：
26、将含有所述编码sars-cov-2病毒抗原的mrna的水相和含有所述脂质成分的有机相混合均匀得到混合液，去除有机相后使体系中的mrna浓度为1~100 μg/ml，得到所述核酸脂质纳米颗粒；
27、所述水相为含有0.08~1.2 mg/l 所述编码sars-cov-2病毒抗原的mrna的水相缓冲液，所述水相缓冲液为柠檬酸盐缓冲液或醋酸钠缓冲液；
28、所述有机相为含有5~7 mg/l所述脂质成分的无水c1~c4低碳醇；
29、所述水相和所述有机相的体积比为1:2~4。
30、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
31、本专利技术提供的编码sars-cov-2病毒抗原的mrna至少含有编码sars-cov-2病毒omicron毒株的s蛋白编码区。该mrna编码的s蛋白的氨基酸序列如seq_1所示，上述s蛋白具有较强免疫原性，本专利技术提供的mrna递送至体内后能够在机体内表达s蛋白，触发机体的免疫反应。本专利技术通过实验发现编码sars-cov-2病毒变异株s蛋白的mrna递送至小鼠体内能够使小鼠体内产生抗体，该抗体针对sars-cov-2病毒变异株和原始株均有中和效果。
32、基于上述编码sars-cov-2病毒抗原的mrna的专利技术构思和其产生的技术效果，本专利技术还利用该mrna或其相关的生物材料开发了一种疫苗，该疫苗具有研发快速、安全性高、易产业化等优点，可迅速制备用于针对目前新冠流行株（包括原始株和变异株）的疫苗，达到足够的保护效果，在安全性、有效性方面优于现有的疫苗技术。本专利技术提供的疫苗接种动物后能产生有效抗体，对流行株，尤其是omicron株病毒均有中和效果，目前市面上还没有同类产品。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.编码SARS-CoV-2病毒抗原的mRNA，其特征在于，含有编码开放阅读框的片段；所述编码开放阅读框的片段编码如Seq_1所示氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的mRNA，其特征在于，所述编码开放阅读框的片段中总GC%含量为30~70%，所述编码开放阅读框的片段中任意一长度为60bp的片段中GC%含量不低于40%。
3.根据权利要求2所述的编码SARS-CoV-2病毒抗原的mRNA，其特征在于，所述编码开放阅读框的片段的核苷酸序列如Seq_2或Seq_21所示。
4.根据权利要求1-3任一项所述的编码SARS-CoV-2病毒抗原的mRNA，其特征在于，所述mRNA从5’端到3’端分别依次包括：5’帽子、5’UTR、编码所述开放阅读框的片段、3’UTR和3’polyA尾。
5.根据权利要求4所述的编码SARS-CoV-2病毒抗原的mRNA，其特征在于，所述5’帽子为：m7G（5’）（2’-OMeA）pG；
6.生物材料，其特征在于，包括选自如下（a1）~（a4）；
7.疫苗，其特征在于，含有权利要求1-5
8.根据权利要求7所述的疫苗，其特征在于，含有核酸脂质纳米颗粒，所述核酸脂质纳米颗粒含有权利要求1-5任一项所述的mRNA和脂质成分；
9.根据权利要求8所述的疫苗，其特征在于，按照摩尔百分比计所述脂质成分包括Dlin-MC3-DMA 50％、DOPG 10％、胆固醇38.5％和PEG-DMG 1.5％。
10.根据权利要求9所述的疫苗，其特征在于，所述核酸脂质纳米颗粒按照如下方法制备得到：
...【技术特征摘要】
1.编码sars-cov-2病毒抗原的mrna，其特征在于，含有编码开放阅读框的片段；所述编码开放阅读框的片段编码如seq_1所示氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的mrna，其特征在于，所述编码开放阅读框的片段中总gc%含量为30~70%，所述编码开放阅读框的片段中任意一长度为60bp的片段中gc%含量不低于40%。
3.根据权利要求2所述的编码sars-cov-2病毒抗原的mrna，其特征在于，所述编码开放阅读框的片段的核苷酸序列如seq_2或seq_21所示。
4.根据权利要求1-3任一项所述的编码sars-cov-2病毒抗原的mrna，其特征在于，所述mrna从5’端到3’端分别依次包括：5’帽子、5’utr、编码所述开放阅读框的片段、3’utr和3’polya尾。
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【专利技术属性】
技术研发人员：彭育才，刘隽，刘琪，雷奕欣，李爽，方子辉，罗丽平，金京，
申请(专利权)人：珠海丽凡达生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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