一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物及其制备方法和应用技术

技术编号：40239753 阅读：5 留言：0更新日期：2024-02-02 22:38

本发明专利技术提供一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，包括菌种培养、发酵产酶、提酶、酶反应、纯化步骤；所述菌种为乳酸乳球菌乳亚种。所述发酵产酶：发酵温度为36‑38℃，培养24‑28小时后加入诱导物继续培养24‑36h，得到含酶培养液。所述诱导物包括以下成分人参皂苷Rb3、香菇提取物、虫草提取物、北沙参提取物。本发明专利技术制备的抗皱纹组合物，具有优异的抗衰效果，可以用于制备化妆品，具有显著的抗皱、除皱效果。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及护肤，具体涉及一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物及其制备方法和应用。

技术介绍

1、随着人们对皮肤保养的日益重视，功能性化妆品面临着空前的机会，因此，寻找具有抗皱纹、抗皱纹、抗老化等功能的化妆品原料成为化妆品行业的最大的痛点，也是最大的需求。作为中草药里面的翘楚，人参一种在抗皱纹方面发挥出色的作用，因此，其活性成分也是潜在的具有重大开发价值的候选者。但是，研究表明，人参中含有的天然的原型人参皂苷属于多糖基皂苷，很难直接穿透细胞膜被吸收，口服人参制品后，多糖基人参皂苷在消化系统中被消化液、肠道菌降解成低糖基人参皂苷代谢产物，然后才能被吸收利用。而当外用人参制品时，皮肤上没有能代谢人参皂苷的肠道菌，人参皂苷以多糖基的原型存在，利用度极低。因此，把多糖基皂苷改造成低糖基皂苷对外用产品的开发具有极其重要的意义。

2、目前，在抗皮肤老化的机制上，主要有以下四个方面：炎症信号通道、nrf2信号通道、mapk信号通道以及nf-κb信号通道，常见的引起皮肤衰老的因素，例如uvb、ros、暴露组等都与此四条信号通道有关。然而，对细胞的衰老有着重要的影响、被誉为“长寿基因”的sirt信号通道，在抗皮肤衰老方面的应用的研究还比较少。sirt信号通道对细胞的物质代谢与能量代谢有着重要的调节作用，与细胞的衰老通过多种途径有着直接或间接的联系，是一条潜在的重要的开发抗皮肤老化、抗皱纹技术的途径。sirt信号通道影响细胞衰老的机理图如附图8所示。因此，研发作用于sirt信号通道的产品对抗皮肤老化技术的开发具有重要意义。

<p>3、现有技术上尚没有通过调节sirt信号通道的表达进而实现抗衰、除皱的产品。

技术实现思路

1、针对以上技术问题，本专利技术提供种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物及其制备方法和应用，并要达到以下专利技术目的：促进sirt1的表达，实现显著的抗皱、除皱效果。

2、为实现以上专利技术目的，本专利技术采用技术方案如下：

3、一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法包括以下步骤：

4、步骤1、菌种培养

5、在常温常压条件下，将乳酸乳球菌乳亚种菌种接种到液体培养基中；液体培养基的配方为：

6、酵母浸粉7.5 g、葡萄糖10.0 g、番茄汁(压榨全汁)100.0 ml、蛋白陈7.5 g、kh2po42.0g、吐温800.5 ml、蒸馏水900.0 ml，ph为7.0。

7、所述乳酸乳球菌乳亚种：菌种来源于市售，菌株保藏编号为cicc 20402。

8、接种后，在37℃、通氧条件下培养35-38小时。

9、步骤2、发酵产酶

10、培养36小时后将培养液转移到发酵培养基中，接种量为1-2%。

11、发酵培养基为：人参总皂苷40-44g、蚕蛹粉4.5-6g、牛乳粉 3.5-5g、大豆异黄酮1.8-2.2g、甘露糖醇 1.8-2.3g、柠檬酸二铵0.9-1.3g、抗坏血酸 0.9-1.1g、维生素b120.8-1.2g、k2hpo4 0.25-0.35g、znso4·7h2o 0.15-0.25g、mnso4·h2o 0.05-0.06g、（nh4）so4·h2o 0.05-0.06g、ca（no3）20.8-1.2g、岩藻多糖 5-7g、谷氨酸0.8-1.2g、蒸馏水 1.0l，ph6.8-7.0。在温度为36-38℃条件下，培养时间为24-28小时，然后加入诱导物，加入后将培养基摇匀，诱导物的加入量为扩培培养基质量的1-5%，继续培养24-36h，得到含酶培养液。

12、所述诱导物由人参皂苷rb3、香菇提取物、虫草提取物、北沙参提取物按照1-3：1-2：2-3：1-1.4的质量比混合而成。

13、步骤3、提酶

14、发酵结束后，先离心除去菌体，然后用超滤膜对发酵液进行浓缩，除去分子量低于20kda的蛋白、盐、糖等杂质，得到粗酶。

15、步骤4、酶反应

16、将粗酶溶于ph7.0、0.05m的磷酸缓冲液，粗酶与磷酸缓冲液的质量比为1：48-52，得到酶液。

17、将质量百分含量40%规格的rb3加入0.05m、ph7.0的磷酸缓冲液中，充分溶解，得到底物。所述rb3与磷酸缓冲液的质量比为1:15-25。所述rb3：来源于市售。

18、将酶液与底物溶液按照1:1的质量比混合，于35-38℃反应18-26h。

19、步骤5、纯化

20、发酵结束后，先过滤除去菌体，再将培养液进行浓缩，浓缩至培养液体积的5-20%，得到浓缩液。向浓缩液中加入浓缩液3-4倍的乙醇，震荡20-30min，离心保留离心液。乙醇浓度为95%。

21、将离心液上大孔吸附树脂进行纯化；皂苷被树脂吸附以后，水洗除去杂质；再用50%的乙醇洗柱除去多糖基皂苷；然后用浓度95%的酒精洗脱皂苷，洗脱液蒸干后得到粉末，即为抗衰组合物。

22、一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物，包括以下组分：人参皂苷cmc、人参皂苷cmx、人参皂苷ck；质量比例为cmc：cmx：ck=1:10-15:3-4。

23、与传统方法相比，本专利技术具有以下有益效果：

24、本专利技术制备的一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物，具有优异的抗衰效果，可以用于制备乳液、精华液、营养液、面霜等化妆品，能够明显促进sirt1蛋白的表达，具有显著的抗皱、除皱效果。

25、使用抗皱纹组合物制备的营养液进行护肤，能够明显减少皱纹的数量、面积以及长度。

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【技术保护点】

1.一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：包括菌种培养、发酵产酶、提酶、酶反应、纯化步骤；所述菌种为乳酸乳球菌乳亚种。

2.根据权利要求1所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述发酵产酶：发酵温度为36-38℃，培养24-28小时后加入诱导物继续培养24-36h，得到含酶培养液。

3.根据权利要求2所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述诱导物包括以下成分人参皂苷Rb3、香菇提取物、虫草提取物、北沙参提取物。

4.根据权利要求3所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述人参皂苷Rb3、香菇提取物、虫草提取物、北沙参提取物的配比为1-3：1-2：2-3：1-1.4。

5.根据权利要求1所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述酶反应：将酶液与底物混合，于35-38℃反应18-26h。

6.根据权利要求1所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述酶反

7.根据权利要求1所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述酶反应：将Rb3加入磷酸缓冲液中，充分溶解，得到底物；所述Rb3与磷酸缓冲液的质量比为1:15-25。

8.根据权利要求1所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述发酵产酶：采用的发酵培养基包括以下组分：人参总皂苷、蚕蛹粉、牛乳粉、大豆异黄酮、甘露糖醇、柠檬酸二铵、抗坏血酸、维生素B12、K2HPO4、ZnSO4·7H2O、MnSO4·H2O、（NH4）SO4·H2O、Ca（NO3）2、岩藻多糖、谷氨酸。

9.一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物，其特征在于：包括以下组分：人参皂苷CMc、人参皂苷CMx、人参皂苷CK。

10.根据权利要求9所述的一种基于Sirt信号通道的抗皱纹组合物，其特征在于：所述人参皂苷CMc、人参皂苷CMx、人参皂苷CK的质量比为1:10-15:3-4。

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【技术特征摘要】

1.一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：包括菌种培养、发酵产酶、提酶、酶反应、纯化步骤；所述菌种为乳酸乳球菌乳亚种。

2.根据权利要求1所述的一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述发酵产酶：发酵温度为36-38℃，培养24-28小时后加入诱导物继续培养24-36h，得到含酶培养液。

3.根据权利要求2所述的一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述诱导物包括以下成分人参皂苷rb3、香菇提取物、虫草提取物、北沙参提取物。

4.根据权利要求3所述的一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述人参皂苷rb3、香菇提取物、虫草提取物、北沙参提取物的配比为1-3：1-2：2-3：1-1.4。

5.根据权利要求1所述的一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制备方法，其特征在于：所述酶反应：将酶液与底物混合，于35-38℃反应18-26h。

6.根据权利要求1所述的一种基于sirt信号通道的抗皱纹组合物的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖永坤，王东明，李楚忠，刘春莹，
申请(专利权)人：三蚁科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：

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